高效液相色谱法同时测定蜜饯中5 种常见食品添加剂.docx

1、高效液相色谱法同时测定蜜饯中5 种常见食品添加剂高效液相色谱法同时测定蜜饯中5种常见食品添加剂汪辉,曹小彦,陈利国,黄秀明(长沙市食品质量安全监督检测中心,长沙410013摘要:建立同时测定蜜饯中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸的反相高效液相色谱法,用于监测蜜饯产品,提高时效性。安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸分别在112100gm L、012100gm L、111100gm L、612140gm L和217100gm L浓度范围内线性良好,相关系数分别为019997、019999、019996、019998和019993,检出限分别为15、112、18、50和20ng;平均回

2、收率均在95%以上,相对标准偏差均小于218%。此法样品处理简便易行,适于同时测定蜜饯中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸。关键词:高效液相色谱;蜜饯;食品添加剂;甜味剂;防腐剂中图分类号:O657.7文献标识码:A文章编号:100020720(2007112119204蜜饯是我国传统休闲食品,深受广大消费者喜爱。近年来市场上的蜜饯品种和数量均有明显的增长。蜜饯主要分为六大类:蜜饯类、果脯类、凉果类、话果类、果丹(饼类、果糕类。槟榔作为湖南特产之一,加工程序与传统蜜饯相似,具有健齿、消除口腔异味、提神提气、去寒气、助消化、解酒等功效,有“绿色口香糖”之称。但蜜饯和槟榔产品质量问题也较突

3、出,无论是从地区性的产品抽捡结果或省、市甚至国家级的抽捡结果,其产品合格率都不高,不合格原因主要是超范围或超量使用食品添加剂1。蜜饯中常用的食品添加剂主要有糖精钠(S A、乙酰磺胺酸钾(安赛蜜,AK、苯甲酸(BA、山梨酸(S OA和脱氢乙酸(DH A。目前,测定食品中防腐剂和甜味剂的方法主要有:薄层色谱法(T LC2、高效液相色谱法(HP LC36、气相色谱法(G C7,8等。其中以HP LC法最为常用。但大多数分析方法只能测定上述物质中的1种或少数2 3种,能够同时测定3种以上物质的方法较少,尤其是上述几种添加剂与脱氢乙酸同时检出的方法甚少。因此找到一种准确、快速测定蜜饯中食品添加剂的方法是

4、有必要的。本文建立了同时测定蜜饯中上述5种食品添加剂含量的反相高效液相色谱法。此法操作简便、快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,用于监测蜜饯中食品添加剂,保护消费者的健康。1实验部分1.1仪器与试剂岛津LC210AVP型(双泵高效液相色谱仪配紫外检测器和柱温箱,超声处理器;T U21900双光束紫外可见分光光度计;超纯水处理器;安赛蜜(纯度99%,迪马公司;苯甲酸和糖精钠(均为110mgm L,国家标准物质研究中心;山梨酸(纯度99%国家标准物质研究中心;脱氢乙酸(纯度99%,乙酸铵(纯度98%和甲醇(HP LC专用 (均购于国药集团化学试剂有限公司。1.2色谱条件色谱柱为Diam onsil

5、 C18色谱柱(150mm4.6 mm i.d.,5m;柱温为40;流速为1m Lmin;流动相为V(0.02m olL乙酸铵V(甲醇=955;检测波长为230nm;进样量20L。1.3标准溶液的配制准确称取安赛蜜、山梨酸、脱氢乙酸对照品各100mg于100m L容量瓶中,加水溶解并稀释至收稿日期:2006211210;修订日期:2007201215作者简介:汪辉(1983-,男,助理工程师 刻度,摇匀,作为混合标准贮备溶液。苯甲酸和糖精钠均为110mg m L 。1.4标准曲线的制备分别吸取110mg m L 安赛蜜、山梨酸、脱氢乙酸混合标准贮备溶液,110mg m L 苯甲酸标准溶液,11

6、0mg m L 糖精钠标准溶液011、012、013、014、015、016m L ,分别置于10m L 容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,经0145m 的水系滤膜过滤,按色谱条件进行测试(见图1。以各组分峰面积为纵坐标,质量浓度为横坐标,绘制标准曲线。 图1标准溶液的色谱图Fig .1Chrom atogram of a stand ard solution1-安赛蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精钠;5-脱氢乙酸1.5样品处理取粉碎均匀的样品1.0g ,准确至0.0001g ,加入适量的超纯水超声1h ,定容至100m L 。取上清液,经0.45m 的水系滤膜过滤,测定滤液中各组分得色谱图

7、(见图2。2结果与讨论2.1色谱条件的选择2.1.1检测波长的选择用紫外可见分光光度计在190400nm 之间对各组分的标准溶液进行光谱扫描,吸收光谱如图3。从图中可以看出,安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸的最大吸收波长分别为226.0、224.5、253.5、201.5、230.0nm 。5个组分中有3个组分在230nm 处有较高的灵敏度,由于流动相在低于210nm 的波长下背景的紫外吸收较高,253nm 处其它4个组分几乎无吸收,故选择中间波长230nm 为检测波长。图2样品的色谱图Fig .2Chrom atogram of a sample1-安赛蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4

8、-糖精钠;5-脱氢乙酸图3标准溶液的光谱图Fig .3Absorption specta of the stand ard solution 1-安赛蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精钠;5-脱氢乙酸2.1.2流动相的优化对不同流动相进行了多次实验,最后确定按不同比例进行实验,结果发现当V (0.02m ol L 乙酸铵V (甲醇=955时,5种物质能够完全分离。苯甲酸和山梨酸的p K a 值分别为4.19和4.769,表明这两种物质在酸性条件下能够很好地分离出来,安赛蜜和糖精钠在酸性流动相也能一一分离出,但脱氢乙酸在酸性流动相中分离效果不佳,峰形拖尾很严重,尤其当pH 4.0时,脱氢乙酸不

9、出峰。因此最后选择不调pH ,使其在乙酸铵本身的弱酸性条件下,将这5种物质一一分离出来,分离度1.5,且峰形尖锐,无拖尾现象。2.2线性范围与检出限在实验条件下,用峰面积比对质量浓度绘制曲线,所有分析物在其之间均具有良好的线性关系,以基线噪声3倍峰面积对应的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸作为检出限,回归方程式及相关系数均列于表1。表1回归方程、线性范围及其检出限T ab.1R egression equ ations,linear ranges and detection limits of SA,AK,BA,SOA,D H A 组分回归方程式线性范围(gm Lr检出限ng安赛蜜A=

10、3.23-7925.4 1.21000.999715苯甲酸A=3.51+3421.30.21000.9999 1.2山梨酸A=5.79+5926.8 1.11000.999618糖精钠A=2.24+6120.4 6.21400.999850脱氢乙酸A=7.09+2903.8 2.71000.9993202.3精密度实验取5种组分的混合标准样品做精密度实验,按上述色谱条件及实验方法对中间质量浓度0103 mgm L的标准样品进行测定,重复进样10次,RS D 均在1.0%2.8%之间,说明该方法具有较高的精密度。2.4标准加入回收实验采用加标测定回收率。取同一蜜饯样品6份,分别加入一定量的5种混

11、合标准使用液。测定结果(见表2,已去本底值表明,平均回收率基本在95%以上,完全可以满足分析方法的要求。2.5样品测定用上述方法对市售的几种蜜饯类食品进行了测定,并与传统方法进行了比较。传统方法中,安赛蜜按G BT5009.14022003方法进行测定,苯甲酸、山梨酸按G BT5009.2922003方法进行测定,糖精钠按G BT5009.2822003方法进行测定,脱氢乙酸采用HP LC法10进行测定。测定结果见表3。其结果表明,上述方法同时测定蜜饯中5种常见添加剂与用传统方法对照,测定的结果是基本吻合的,具有很好的一致性。由此可见,用上述方法同时测定蜜饯中5种常见添加剂是一种行之有效的方法

12、,同时,也可以应用于其它食品中的添加剂测定。表2标准加入回收率(n=10T ab.2R ecoveries of SA,AK,BA,SOA,D H A组分添加量mmg实测值mmg回收率%平均回收率%安赛蜜0.1000.093593.50.2000.191295.696.10.4000.396899.2苯甲酸0.1000.095395.30.2000.197698.897.60.4000.197498.7山梨酸0.1000.096396.30.2000.2022101.198.90.4000.396899.2糖精钠0.1000.097397.30.2000.197498.798.80.4000.

13、4012100.3脱氢乙酸0.1000.095395.30.2000.192296.195.90.4000.384896.2表3样品测定结果(n=6T ab.3Determination results of samples样品编号样品名称测定值w(gkg安赛蜜本法传统方法苯甲酸本法传统方法山梨酸本法传统方法糖精钠本法传统方法脱氢乙酸本法传统方法1槟榔 1.02 1.010.160.17 2.17 2.15 4.37 4.38 1.23 1.25 2话梅 2.05 2.020.110.110.630.62 1.08 1.08 1.53 1.53 3蜜金桔 2.43 2.400.270.260.

14、530.54 1.69 1.700.690.70 4白糖杨梅 1.75 1.750.100.10 1.73 1.73 1.22 1.210.500.52 5苹果脯 2.33 2.310.350.34 2.88 2.860.350.35 1.66 1.69 6柠檬李 2.37 2.350.130.120.540.550.990.980.350.35 7山楂糕 3.2123.170.320.33 1.02 1.030.430.440.99 1.01参考文献1沙纪辉,陈松青,薛洪弟等.海峡预防医学杂志,2006,13(2:562王萍.环境与健康杂志,1997,14(4:1713聂西度,谢华林,彭书萍

15、等.分析化学学报,2005,21(2:2314Suresh Chandra Rastogi,Claus Z achariae,Jeanne DJohansen et al.J Chromatogr A,2004,1031:3155A M Y Jaber,H A Al Sherife,M M Al Omari et al.JPharmaceut and Biomed Anal,2004,36:3416J Dv oraka,R Hajkova,L Matys ova et al.J Pharmaceutand Biomed Anal,2004,36:6257M G onzalez,M G alle

16、g o,M Valcarcel.J Chromatogr A,1998,823:3218庞楠楠,迪丽努尔马力克,牛蓓.分析试验室,2005,24(3:489陈青川,于文莲,王静.色谱,2001,19(2:10610中国食品添加剂生产应用工业协会.食品添加剂分析检验手册.北京:中国轻工业出版社,1999.317Simultaneous determination of five familiar food additives in succade by high perform ance liquid chrom atographyWANG Hui,C AO Xiao2yan3,CHEN Li2

17、guo and HUANG Xiu2ming(Changsha Center of Supervision&Inspection on F ood Quality Safety,Changsha410013,Fenxi Shiyanshi,2007,26(11:119122Abstract:Establishing a high performance liquid chromatographic method with photodiode array detector for determining the contents of S A,AK,BA,S OA and DH A in su

18、ccade,which was used for detecting succade production,im proving time2efficiency and safeguarding the health of consumers.The linear were112100gm L (r=019997for S A,012100gm L(r=019999for AK,112100gm L(r=019996for BA,612140gm L(r=019998for S OA and217100gm L(r=019993for DH A,respectively.Detection l

19、imits of S A, AK,BA,S OA and DH A were15,1.2,18,50and20ng respectively.The average recoveries of these com ponents were above95%and the precision was less than218%.The method was sim ple,rapid,sensitive,accurate and the disposal of sam ples are sim ple,convenient and feasible,which was suitable for the determination of S A,AK,BA, S OA and DH A in succade.K eyw ords:High2performance liquid chromatography;Succade;F ood additive;S weetener;Preservative