医学免疫学与病原微生物学.docx

1、医学免疫学与病原微生物学医学免疫学与病原微生物学绪论 细菌的形态与结构一、微生物1、概念：一群个体微小、结构简单、肉眼不能直接看到、必须借助光学显微镜或电子显微镜放大后才能看到的微小生物的总称。2、特点: 独立生活的单细胞 新陈代谢旺盛 适应力强，易变异 种类多、分布广、数量大3种类：真核细胞型微生物：真菌原核细胞型微生物：细菌、放线菌、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体非细胞型微生物： 病毒4作用：普通微生物（对人类有利） 工业上：发酵 酿造 制革农业上：固氮 杀虫环保上：分解污染物基因工程：载体 工具酶病原微生物（对人类不利 ）引起疾病二、医学微生物学发展简史一、经验时期：酿酒、制醋、盐腌、

2、糖渍、烟熏、风干 保存食物、喝开水不腹泻二、实验时期：荷兰人列文.虎克（Antony van leeuwenhoek）1676年自制成首台能放大266倍原始显微镜形态学时代法国科学家巴斯德（Louis Pasteur）证明有机物发酵与腐败是由微生物引起，创造巴斯德消毒法生理学时代英国外科医生李斯德（Joseph Lister）开创无菌外科手术医学消毒灭菌德国学者郭霍（Robert Koch）创立平板分离法，提出郭霍法则（Koch postulate）特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康者则不存在；此特殊病原菌能被分离培养而得纯种；此培养物接种易感动物，能发生同样病症；自人工感染的实验动物体

3、内能重新获得该病原菌纯培养。Fleming发现青霉素 1929年 Fleming 发现青霉菌产生的青霉素（penicillin）能抑制金黄色葡萄球菌的生长，开创了临床抗生素治疗的新时代其他有贡献学者：俄国学者伊凡诺夫斯基（Iwanovski）发现烟草花叶病毒我国汤飞凡教授 首先分离培养出沙眼衣原体 1955年首先分离培养出沙眼衣原体，是世界上发现重要病原体的第一个中国人，也是迄今为止唯一的一个中国人美国青年医生立克次（Howard Taylor Ricketts）对立克次体研究的贡献与献身。三、新病原体的发现 1973年以来新发现的病原微生物：丙、丁、戊、庚、输血传播肝炎病毒。6，7，8型人疱

4、疹病毒、汉坦病毒、轮状病毒、人类免疫缺陷病毒、幽门螺杆菌、大肠埃希菌O157:H7、军团菌、朊粒、SARS病毒朊粒发现过程：1982年，从感染羊瘙痒病（scrapie）的鼠脑分离出一种称为朊粒（Prion）的传染性蛋白因子。它只含蛋白质，不含和核酸。引起羊瘙痒病、牛疯牛病与人库鲁（kuru）病、克-雅病（Creutzfeldt-Jakob disease，CJD）等慢性进行性致死性中枢神经系统疾病。三、细菌1、概念：细菌是一类具有细胞壁的单细胞原核细胞型微生物。2、大小、形态：大小：个体微小，微米（m）为测量单位，大多数细菌宽为0.22 m，长28 m。 形态：3种基本形态球形、杆形、螺形（1

5、）球菌： 双球菌 八叠球菌链球菌葡萄球菌四联球菌（2）杆菌：球杆菌链杆菌双杆菌单杆菌（3）螺形菌螺菌弧菌细菌形态检查方法不染色检查观察细菌的动力、大小、形态、繁殖方式常用方法：压滴法、悬滴法、暗视野法染色检查正染色法 （positive stain）：菌体着色背景不现色 单染法：观察细菌大小、形态、排列 复染法：观察细菌染色性1.革兰染色法（Gram stain）2.抗酸染色法（fast-acid stain ） 特殊染色法负染色法 （nagetive stain）：菌体不现色背景现色 革兰染色法（Gram stain）1884年丹麦科学家Hans christian Gram创建原理G+菌

6、G-菌等电点PI 23 带负电荷多 PI 45带负电荷少通透性低 肽聚糖多，脂质少 酒精不易进入 高肽聚糖少，脂质多酒精易进入化学成分核糖核酸镁盐与染料结合牢固不易被酒精脱色 较少镁盐易被酒精脱色方法初染 fist-stain 结晶紫 1min 水洗媒染 mordant 碘 液 1min 水洗脱色decolorization 95%酒精 30s 水洗复染 counter-stain 复 红 30s 水洗，烘干镜检:（油镜）紫色 gram positive红色 gram negative意义鉴别细菌：分成G+菌和G菌选择药物：G+菌和G菌对抗菌药物 敏 感性不一样。与致病性有关：G+菌产生外毒素

7、， G菌产生内毒素3、结构：基本结构 细胞壁（cell wall）细胞膜（membrane）细胞浆（cytoplasm）核质（nucleoid） 特殊结构 荚膜（capsule）鞭毛（flagellum）芽孢（endospore）菌毛（fimbriae or pilus）1包被于细胞膜外的坚韧而富有弹性的复杂结构。主要成分是肽聚糖。1.肽聚糖构成骨架聚糖骨架 N-乙酰胞壁酸 聚糖链 N-乙酰葡萄糖胺 肽 聚 糖 (peptidoglycan) 四肽侧链 肽 链 五肽交联桥（G菌无） 革兰阳性菌与阴性菌肽聚糖结构的差异G+菌G-菌肽聚糖50层12层四肽侧链丙-谷-赖-丙丙-谷-DAP-丙甘氨酸5

8、肽+-连接方式交联桥三维结构二维结构溶菌酶+-青霉素+- 2.特殊成分革兰阳性菌-磷壁酸磷壁酸（teichoic acid)：膜磷壁酸（脂磷壁酸LTA）、壁磷壁酸作用：a.G+菌表面抗原，与血清型分类有关；b.有黏附作用，与细菌的致病有关；c.与Mg2+等双价离子结合，有助于G+菌离子平衡。d.与某些酶的活性有关革兰阴性菌外膜层（内外）-脂蛋白、脂质双层（外膜）、脂多糖：细菌内毒素脂多糖（内毒素）（LPS） 特异多糖：种特异性（菌体抗原，O抗原)多糖 核心多糖：属特异性脂质A:毒性部分 3.功能：维持外形；抵抗低渗；物质交换；决定抗原性；致病有关细胞壁缺陷细菌L型细菌的细胞壁在人工诱导（药物作

9、用）或自然情况下被破坏，这种细胞壁缺陷型细菌称为L-型细菌（L-form）革兰阳性菌失去细胞壁称原生质体（protoplast）革兰阴性菌失去细胞壁称原生质球（spheroplast）或圆球体生物学特性多形态、革兰染色阴性、滤过型细菌难培养（含血清的高渗低琼脂培养基）、“油煎蛋”样小菌落、液体中絮状沉淀生化反应与抗原性改变细胞壁作用抗生素无效L-型可被诱导和回复慢性反复感染，治疗难度大2位于细胞壁内侧紧包在细胞质外面的一层富有弹性、具有半渗透性的生物膜。主要成份是脂质双层、蛋白质。1.功能：选择通透性、物质交换；参与呼吸、能量代谢；生物合成；形成中介体中介体：部分细胞膜内陷折叠形成的囊状物，多

10、见于革兰阳性细菌 功能：类似纺锤体；类似线粒体3由细胞膜包裹着的透明胶状物。内含核糖体、质粒、胞质颗粒等，是新陈代谢的主要场所。1.核糖体(Ribosomes)：蛋白质合成的场所动物核糖体80S 细菌核糖体70S大60S 大50S 红霉素小40S 小30S 链霉素2.质粒(plasmid):染色体外遗传物质，环状双链DNA，具有独立复制能力，编码特定遗传信息，如耐药因子。3.胞质颗粒：营养储存物；异染颗粒4细菌的染色体，无核膜，无组蛋白，双股DNA组成的单一环状，反复回旋卷曲盘绕而成的松散网状结构。决定细菌的遗传性状，是细菌遗传变异的物质基础。5某些细菌在细胞壁外包绕的一层较厚的粘液性物质。特

11、点：1.多数由多糖组成，少数由多肽组成，具抗原性2.在动物体内、营养培养基上形成3.不易着色、要用特殊染色法 意义：1. 具有特异的抗原性，可对细菌进行鉴别分型。2. 荚膜有保护细菌、抗吞噬、抗体内杀菌物质作用。3. 可保护细菌抗干燥。 菌体上附着的细长丝状物，由肌动蛋白组成，具抗原性（H抗原）。数量位置不同（单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌），可鉴别细菌。运动器官，与细菌的动力有关。有些菌的鞭毛与致病有关，如霍乱弧菌 菌体表面细而短的丝状物。由蛋白质组成。普通菌毛黏附功能，每个细菌有数百根黏附到上皮细胞表面，与细菌的致病有关，如淋球菌。性菌毛接合功能，每个细菌14根，能使F菌与F-菌连接沟通，

12、与细菌的遗传变异有关。 细菌在不利条件下细胞质脱水浓缩形成的卵圆形小体，是细菌的休眠体。在适宜条件下发芽繁殖体。特点：1.抵抗力强a.含水量少：耐热。b.膜厚：屏障作用，阻止化学消毒剂进入，抗干燥。c.吡啶二羧酸（dipicolinic acid，DPA）维持芽胞脱水状态，提高酶对热的抵抗力。d.休眠状态，受外界影响小2.消毒灭菌有关，以杀灭芽胞为标准（121，20min）不同菌芽孢形成部位也不同，有助于对产芽孢细菌的形态学鉴别第一章 细菌的生长繁殖与培养一、化学组成 细菌和其他生物细胞相似，具有多种化学成分，包括水、无机盐、蛋白质、糖类、脂质和核酸等。细菌还含有一些原核细胞型微生物所特有的化

13、学组成：肽聚糖、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸等。二、营养物质水 细菌所需的营养物质必须先溶于水，营养的吸收和代谢均需有水才能进行溶剂、参与代谢、调节温度。碳源 病原菌主要从糖类中获得碳，以合成自身物质，同时为细菌代谢提供能量。氮源 病原菌主要从氨基酸、蛋白胨中获取氮，用于合成菌体的某些部分，不提供能量。无机盐 细菌需要各种无机盐来提供细菌生长所需的各种元素构成菌体、调节渗透压、促进酶活性、参与能量的储存与转运、致病作用。生长因子 某些细菌生长必须，而自身不能合成的物质。包括维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等。三、环境酸碱度 病原菌：大多适宜 pH7.27.6，少数嗜碱pH8.89.0(霍乱弧

14、菌)温度 分嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌三类，病原菌为嗜温菌，1540，通常37气体 细菌生长繁殖需要的气体主要是氧和二氧化碳。渗透压 一般培养基的盐浓度和渗透压对大多数菌是适宜的，少数菌如嗜盐菌需要在高浓度（3）的氯化钠环境中生长良好。四、对O2的需求专性需氧菌（obligate aerobe）：仅能在有氧的环境中生长的细菌。微需氧菌（microearophilic bacterium）：在低氧浓度（5%-6%）下生长良好，氧浓度10%，则对其生长有抑制作用。兼性厌氧菌（facultative anarobe）：有需氧呼吸和发酵两种功能，在有氧无氧环境下均能生长，但在有氧环境下生长较好，大多数病原菌属于兼性厌氧菌。专性厌氧菌（obligate aerobe）：只能在无氧的环境下进行发酵。有分子氧存在时不仅不能利用，受到毒害，甚至死亡。原因：缺少细胞色素和细胞色素氧化酶；缺少分解有毒氧基团的酶：触酶、超氧化物岐化酶五、繁殖方式、速度 繁殖方式：二分裂法（binary fission）速度：20min/代，结核杆菌1820h/代六、生长曲线 将一定数量的菌种接种于适宜的液体中培养，连续定时取样检测活菌数，可发现其生长规律。以培养时间为横坐标，活菌数的对数为纵坐标，可