1、端向3端B.PCR技术中所需要的DNA聚合酶来自微生物的提取或人工合成C.不同微生物能生产的代谢产物不同的根本原因是基因选择性表达的结果D.纤维素分解形成的纤维二糖是一分子葡萄糖和一分子果糖组成PCR技术中链的延伸方向是5端,A正确。PCR技术中所需要的DNA聚合酶是从耐高温的细菌Taq中分离得到的,B错误。不同微生物能生产的代谢产物不同的根本原因是遗传物质不同,C错误。纤维二糖分解产物为葡萄糖,故纤维二糖应该由两分子葡萄糖组成,D错误。本题考查PCR技术和微生物代谢的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络结构的能力。4PCR利用了DNA热变性的原理,PC
2、R仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对PCR过程中“温度的控制”的说法中错误的是( )A.酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链B.延伸的温度必须大于退火温度,而小于变性温度C.DNA聚合酶不具热变性,要用耐高温的聚合酶D.DNA解旋酶不具热变性,为了确保模板是单链【解析】PCR是一种体外DNA扩增技术。DNA双链的解开不需要解旋酶,靠高温使其变性,双链螺旋结构解体,双链分开,退火前,在耐高温的DNA聚合酶作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA,因此延伸的温度要大于退火温度小于变性温度。5关于DNA的粗提取与鉴定实验的表述哪项是错误的( )A离心沉淀的血细胞中加水是为了提取DNAB氯
3、化钠溶液的物质的量浓度为2mol/L时,DNA溶解C向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水是漂洗DNAD离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质【答案】CDNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠浓度的变化而变化的当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/L时DNA的溶解度最低利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNADNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂解:A、离心沉淀的血细胞中加水是为了使血细胞破裂释放DNA,从而提取DNA,A正确;B、氯化钠溶液的物质的量
4、浓度为2mol/L时,DNA溶解,B正确;C、向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水是为了降低氯化钠溶液的浓度,从而是DNA析出,C错误;D、离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质,D正确故选:CDNA的粗提取和鉴定6下列与生物技术实践有关的说法,正确的是A纤维素被CX和C1水解成葡萄糖B泡菜的制作中清水与盐的比列与玫瑰精油的提取中清水与玫瑰花瓣比例都为4:1CMS培养基都需要添加植物激素DDNA的粗提取实验中需使用NaCl溶液,DNA的鉴定实验中不需使用NaCl溶液【答案】BA纤维素被CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶水解成葡萄糖,A错误;CMS培养基常常需要添加植物激素,C错误;DDNA的粗提取实验中需使用
5、NaCl溶液,DNA的鉴定实验中也需使用NaCl溶液溶解后进行鉴定,D错误。本题主要考查微生物的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解,把握知识间的内在联系的能力。7如图表示细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增两个过程,两反应过程的条件中相同的是( ) A.模板 B.原料 C.酶 D.能量供应【解析】本题主要考查细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增的知识,意在考查考生对细胞内外DNA复制条件的理解。选项A模板不同,胞内DNA复制以整个DNA分子作为模板,PCR扩增却以一段目的DNA作为模板。选项B原料相同,均以4种脱氧核苷酸为原料。选项C酶不相同,胞内DNA解旋需要解旋酶,延伸需要DNA聚合酶等;
6、胞外PCR扩增通过高温解旋而不需要解旋酶,延伸只需热稳定的Taq酶。选项D能量供应不同,胞内DNA复制过程由ATP提供能量,而PCR扩增主要由外界供能。8下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,有关说法错误的是AAB过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料,并加入一种引物BAB过程利用了DNA复制原理,需要使用耐高温的DNA聚合酶CBC为转基因绵羊的培育过程,常选用的受体细胞是卵母细胞DBD为转基因植物的培育过程,其中过程常用的方法是农杆菌转化法【答案】ACAB过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料,并加入2种引物,A错;AB过程利用了DNA复制原理,需要使用耐高温的DNA聚合酶,B正确;BC为转基
7、因绵羊的培育过程,常选用的受体细胞是受精卵,C错;BD为转基因植物的培育过程,其中过程常用的方法是农杆菌转化法,D正确。本题考查PCR技术、基因工程,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构。9下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是( )A洗涤剂能瓦解细胞膜,同时也能控制DNA在NaCl溶液中的溶解度B在探究洗涤剂对植物细胞DNA提取的影响实验中,需控制的变量是洗涤剂和植物细胞C常温下,DNA遇二苯胺被染成蓝色D将滤液放在6075的恒温水浴箱中保温1015分钟能去除滤液中的部分杂质,其原理是利用了DNA和蛋白质对高温耐受性的不同A、洗涤剂能瓦解细胞膜,但不能
8、控制DNA在NaCl溶液中的溶解度,A错误;B、在探究洗涤剂对植物细胞DNA提取的影响实验中,需控制的变量是洗涤剂,植物细胞是无关变量,B错误;C、沸水浴条件下,DNA遇二苯胺被染成蓝色,C错误;D、将滤液放在6075的恒温水浴箱中保温1015分钟能去除滤液中的部分杂质,其原理是利用了DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,D正确。本题主要考查考查DNA的粗提取和提纯相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。10下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是A新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取B植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破CDNA不溶于95
9、%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液D溶有DNA的NaCl溶液中加人二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色【答案】CD新鲜猪血中大量成熟红细胞内无DNA,所以不适宜用着提取DNA的材料,A错误;植物材料需先用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁再吸水胀破,B错误;DNA不溶于95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液,溶有DNA的NaCl溶液中加人二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色,C,D都正确。本题考查“DNA粗提取与鉴定”实验的有关内容,意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和
10、技能进行综合运用。11PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )目的基因 引物四种脱氧核苷酸 DNA聚合酶等mRNA 核糖体A、 B、 C、 D、进行PCR扩散需要有引物、模板(即目的基因),原料四种脱氧核苷酸,耐高温的DNA聚合酶,但不需mRNA和核糖体,这是翻译的条件,故A正确,B、C、D错误。本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的识记掌握程度。12图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作示意图,下列有关叙述正确的是A. 图1、2中加入蒸馏水的目的相同B. 图1、2中完成过滤之后都保留滤液C. 图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.014mol/LD. 在图1滤液中加入少许嫩
11、肉粉有助于去除杂质【解析】析图1:图1表示加入蒸馏水让鸡血细胞吸水胀破,释放DNA;分析图2:图2表示加水稀释,使DNA逐渐析出。由以上分析可知,图1、2中加入蒸馏水的目的不相同,A错误;图1中完成过滤之后要保留滤液,而图2中加水后DNA逐渐析出,因此过滤后要去除滤液,B错误;图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.14mol/L(此时DNA的溶解度最低),C错误;嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解去除蛋白质,因此在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质,D正确。【点睛】本题结合模式图,考查DNA的粗提取和鉴定,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验采用的方法、实验现象等,需要考生在平时的学
12、习过程中注意积累。13使用凝胶色谱法分离蛋白质时,洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中,分别使用下列哪些试剂( )蒸馏水 生理盐水 20 mmol/L的磷酸缓冲液 清水 柠檬酸钠A B C D洗涤红细胞需使用生理盐水,释放血红蛋白时用到蒸馏水,透析时则需用20 mmol/L的磷酸缓冲液,D正确。本题考查蛋白质的分离等相关知识。14DNA粗提取实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解。相关操作正确的是( )A以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸馏水,使DNA快速析出C将丝状物溶解到2 molL-1NaCl溶液中后,加水析出D向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同
13、一方向缓慢搅拌【解析】以菜花为材料进行研磨时,可以加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,A项错误;为避免DNA断裂,加入蒸馏水要缓慢,B项错误;将丝状物溶解到2 molL-1NaCl溶液中后,加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为95%的酒精溶液,静置23min,以析出含杂质较少的DNA,C项错误;为避免DNA断裂和降解,要向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌,D项正确。【考点定位】DNA的粗提取与鉴定【名师点睛】DNA的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”加蒸馏水2次加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水涨破;加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使Na
14、Cl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/L,使DNA析出用纱布过滤3次过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液用NaCl溶液4次加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质;用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定DNA15(2015秋天水校级期末)下列4项实验中,需保持细胞生理活性的有( )观察叶绿体和线粒体;观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布探究酵母
15、菌的呼吸方式;红细胞中血红蛋白的提取和分离A B C D观察叶绿体和线粒体实验中,需要细胞保持活性,正确;观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布实验中,经过盐酸水解后,细胞已经死亡,错误;探究酵母菌的呼吸方式实验中,需要保持酵母菌的活性才能进行细胞呼吸,正确;红细胞中血红蛋白的提取和分离实验中,需要将红细胞破裂才能提取到血红蛋白,因此细胞已经死亡,错误B探究酵母菌的呼吸方式;DNA、RNA在细胞中的分布实验;观察线粒体和叶绿体;蛋白质的提取和分离16DNA粗提取实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解,相关操作正确的是()A. 以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解B. 向DNA溶液
16、中迅速加入蒸馏水,使DNA快速析出C. 将丝状物溶解到2molL-1NaCl溶液中后,加水析出D. 向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌DNA耐高温,因此适当加热不会促进DNA溶解,A错误;在0.14mol/LNaCl溶液中,DNA的溶解度最低,因此用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,滤去滤液,B错误;DNA丝状物溶解在2 mol/LNaCl溶液中,加95%的冷酒精析出,C错误;DNA不溶于酒精,因此可用体积分数为95%冷酒精并沿同一方向缓慢搅拌析出DNA,D正确。【考点定位】DNA的粗提取和鉴定【名师点睛】DNA的粗提取和鉴定的原理是:(1)DNA和蛋白质等其他成分
17、在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。(2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶液酒精。(3)DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。(4)DNA的鉴定:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。17A. 绿叶中色素的提取和分离 B. 花生子叶中脂肪的鉴定C. 菜花中DNA的提取和鉴定 D. 生豆浆中蛋白质的鉴定【解析】试题分析:用无水酒精提取色素,纸层析法分析色素,无需显微镜,A错。花生子叶中脂肪分子染色后需要显微镜观察,B正确。DNA的提取用盐溶液,鉴定用二苯胺溶液,都不需要显微镜,C错。蛋白质与双缩脲试剂反应呈紫色,不需要显微镜,D错。本题考查实验相关知识,意在考
18、查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用能力。18下列关于PCR的描述中,正确的是( )PCR是一种酶促反应引物决定了扩增的特异性扩增DNA利用了热变性的原理扩增的对象是氨基酸序列A B C DPCR技术的概念是PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术,原理是DNA复制,前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物,条件还包括模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶),具体过程有高温变性:DNA解旋过程;低温复性
19、:引物结合到互补链DNA上;中温延伸:合成子链PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开。本题主要考查PCR的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解,把握知识间的内在联系的能力。19下列实验材料、试剂等,不必放入冰箱的是A. 层析光合色素后的滤纸 B. 长期保存得到的菌种C. 用于粗提取DNA的酒精 D. 保存PCR所需的Taq酶【解析】A. 层析光合色素后的滤纸不必放入冰箱,A符合题意;B. 长期保存得到的菌种需要放在低温条件下保持,B不符合题意;C. 用于粗提取DNA的酒精是冷却的,C不符合题意;D. 保存PCR所需的Taq酶,酶的保存需要低温条件,D不符合题意。故选
20、A。20关于DNA的实验,叙述正确的是A用兔的成熟红细胞可提取DNABPCR的每个循环一般依次经过变性-延伸-复性三步CDNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物D用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色兔的成熟红细胞无细胞核及细胞器,故不能用于提取DNA,A错误;PCR的每个循环一般依次经过变性-复性-延伸三步,B错误;DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物,C正确;用甲基绿吡罗红试剂对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色,D错误。DNA的粗提取和鉴定;PCR技术的基本操作和应用二、综合题21.泡菜的制作方法是:新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻
21、底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处,最适环境温度为2830(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是 。(2)加入“陈泡菜水”的作用是 。(3)制作泡菜的过程中,亚硝酸盐含量的变化是 ,检测亚硝酸盐的方法是 。.请回答下列有关DNA粗提取及鉴定的相关问题。(1)在提取DNA实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液,其作用分别是:2 mol/L NaCl溶液: ;0.14 mol/L NaCl溶液: 。(2)用鸡血提取DNA的整个操作过程中,每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠的作用是:(3)鉴定DNA所用的试剂:【答案】. (1)消毒(2)提供乳酸
22、菌菌种 (3)先增多后减少 比色法. (1)溶解DNA分子,过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质使DNA分子析出,过滤并除去溶于NaCl溶液中的杂质(2)防止出现凝血 (3)二苯胺、(1)白酒有杀菌的作用,用白酒擦拭泡菜坛可起消毒作用。(2)“陈泡菜水”中含有乳酸菌菌种,向坛中加一些“陈泡菜水” 可提供乳酸菌菌种。(3)可用比色法检测亚硝酸盐。制作泡菜的过程中,亚硝酸盐含量的变化是先增多后减少。.(1)在提取DNA实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液,2mol/LNaCl溶液可溶解DNA,过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质。而0.14mol/LNaCl溶液析出DNA,过滤并除去溶于NaCl溶液中
23、的杂质。(2)加入柠檬酸钠可防止出现凝血。(3)用二苯胺鉴定DNA,在沸水浴条件下,呈现蓝色。本题考查泡菜的制作与DNA粗提取与鉴定的实验的知识。意在考查能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。22生物选修1:生物技术实践如图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤,请据图分析回答:(1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这是因为_,从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是向鸡血中加入_,并_。如果选用植物细胞,需要选用洗涤剂_。(2)图a表示
24、释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取_进行下一步实验。(3)图b表示的相关操作过程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是_。(4)图c表示在滤液中加入冷却的_,进一步提取含杂质更少的DNA。(5)实验室提取高纯度的DNA时,通常采用_、SDS、吐温等化学试剂。【答案】(1)鸡血细胞易吸水胀破,核DNA含量丰富 蒸馏水 揽拌 溶解细胞膜(2)滤液(1分)(3)溶解DNA分子(4)95%的酒精 (5)CTAB (十六烷基三甲基溴化胺)(1)根据DNA粗提取实验中材料选择的原则,鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得(以及鸣血细胞极易吸水胀破),因此鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料。要从鸡血细胞中
25、释放出核物质,需要向鸡血细胞中加入蒸馏水,让红细胞吸水胀破,并搅拌加速红细胞的破裂。如果选用植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。(2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程,此时DNA溶解在氯化钠溶液中,因此过滤后取滤液进行下一步实验。(3)(3)图b表示的相关操作过程中,加人2 mol/LNaCl溶液的作用是溶解DNA分子。图c表示在滤液中加人冷却的95%的酒精,由于DNA不溶于酒精,而其他杂质可以溶于酒精,因此可以提取含杂质更少的DNA(或去除脂溶性杂质)。(5)实验室提取高纯度的DNA时,通常釆用CTAB、SDS、吐温等化学试剂。【考点定位】DNA粗提取与鉴定实验【名师点睛】DNA的粗提取与
26、鉴定的实验原理:提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。1、DNA的溶解性(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同(014mol/L溶解度最低),利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。(2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080的高温,而DNA在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。23(6分)请根据下列有关实验及结果,回答问题:在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,为得到含DNA的黏稠物,某同学进行了如下操作,最后所得含DNA的黏稠物极少,导致下一步实验无法进行,请指出该同学实验操作中的三处错误并改正。在新鲜的家鸽血中加入适量的柠檬酸钠,经离心后,除去血浆,留下血细胞备用。取510 mL血细胞放入
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