生物化学上册作业讲课教案文档格式.docx

1、活力单位数1.2.3.4.5.6.粗分离盐析等电点分离离子交换亲和层析分子筛层析20,0005,0004,00020050454,000,0003,000,0001,000,000900,000750,000675,000回答下列问题:（1）.在这六步分离纯化过程中,哪一步分离效果最好?哪一步最差?（2）.该酶是否已经纯化?还可以用什么方法确定其是否纯化?11. 在阳离子交换层析中,下列各组氨基酸,用pH=7.0的缓冲液洗脱.哪一个氨基酸先洗脱下来?（1）.Asp-Lys. （2）.Arg-Met. （3）.Glu-Val. （4）.Gly-Leu. （5）.Ser-Ala.12. 测定酶活力

2、的时候为啥采用初速度？13. 蛋白质，核酸发生变性的共同特点是什么？14.试解释酶为什么具有立体特异性。15.蛋白质因变性发生沉淀作用和盐析发生沉淀作用，两者本质上有何差别？如何区分？16. 在给定的pH下，下述蛋白质在电场中向哪个方向移动，即向正极、负极还是不动？（1） 卵清蛋白（pI=4.6），在pH5.8；（2）-乳球蛋白（pI=5.2），在pH4.6和pH7.1；（3）胰凝乳蛋白酶原（pI=9.1），在pH5.6和pH9.1和pH11。17. 有二个DNA样品，分别来自两种未确认的细菌，两种DNA样品中的腺嘌呤碱基含量分别占它们DNA总碱基的32和17。这两个DNA样品的腺嘌呤，鸟嘌呤

3、，胞嘧啶和胸腺嘧啶的相对比例是多少？其中哪一种DNA是取自温泉（64）环境下的细菌，哪一种DNA是取自嗜热菌？答案的依据是什么？18. 下列变化对肌红蛋白和血红蛋白的氧亲和性有什么影响？（1）血液中的pH由7.4下降到7.2。（2）肺部CO2分压由6kPa（屏息）减少到2kPa（正常）。（3）BPG水平由5mM（平原）增加到8mM（高原）。19. 假设某蛋白质含有10个羧基和10个氨基（平均羧基PK值为2.5,氨基PK值为8.5）,并假设在一定条件下氨基和羧基间都有可能生成盐键.请按下表所示不同PH条件下,填上可能生成盐键的数目. 溶液的PH值 1.0 2.5 5.5 8.5 10.0生成盐键

4、的数目20. 画写具有米氏行为酶的下列各动力学曲线示意图.A.反应速度（v）对底物浓度s作图.B.当sE时,反应速度（v）对酶浓度E作图.C.反应速度（v）对温度（T）作图.D.1/v对1/s作图.E.产物浓度p对时间（t）作图.21. 100毫升，pH1.72，0.1M的甘氨酸溶液用2M NaOH滴定。记录pH并绘制滴定曲线如下图。滴定曲线上有到五个重要的点。为下面的每段话从中选择一个合适的点。并加以说明。（1） 甘氨酸主要以H3N-CH2-COOH的形式存在。（2） 甘氨酸的净电荷是+。（3） 一半的氨基是离子化的。（4） 此时的pH等于羧基的pKa值。（5） 此时的pH等于氨基的pKa值

5、。（6） 甘氨酸具有最大的缓冲能力。（7） 甘氨酸的净电荷是零。（8） 羧基完全被滴定。（9） 甘氨酸完全被滴定。（10） 甘氨酸主要以H3N+-CH2-COO-的形式存在。（11） 甘氨酸的净电荷是+1。（12） 甘氨酸以50：50比例的H3N+-CH2-COOH和H3N+-CH2-COO-形式存在。（13） 等电点。（14） 最差的pH缓冲点。（15） 滴定的终点。22. 在纯化的酶的过程中，研究者意外地发现，在进行完某一步纯化步骤后，酶的总活力单位比酶的粗提取物还高。请解释酶的总活力单位怎么可能会增加？23. 过氧甲酸裂解胱氨酸二硫键，巯基氧化为磺酸基团，然后不能再形成二硫键。分析以下实

6、验：怀疑一个包含三个半胱氨酸残基的蛋白质中有一个单一的二硫键。用胰蛋白酶降解样品，水解的混合物进行单向电泳。采用过氧甲酸处理后，旋转90度后进行双向电泳，然后用茚三酮染色。如果样品中不包含任何二硫键，实验结果如何？如果包含一个二硫键，实验结果又如何？设计一个实验，来确定哪些半胱氨酸残基形成二硫键。24. 在蛋白质进化中甘氨酸是一个高度保守的氨基酸残基。为什么？25. 蛋白质是相当稳定的。肽键在水溶液的寿命接近1000年。然而，肽键的水解自由能却是负的，而且相当大。你如何解释虽然肽键水解能释放出很多的能量但是肽键却非常稳定？26.磷酸吡哆醛（PLP）是鸟氨酸转氨酶的辅酶。鸟氨酸转氨酶分别从培养基

7、缺乏PLP的细胞和含有PLP的细胞中分离纯化。将酶都保温在37，测定酶的稳定性。实验结果如下所示：（1）、为什么酶活力随保温时间增加而下降？（2）、为什么没有PLP的酶活性下降的更快？27下图表示血红蛋白的氧解离曲线。假设曲线3表示PH 7.0时，CO2和2,3BPG的生理浓度下，血红蛋白的氧饱和曲线。哪一条曲线代表下列条件变化时的曲线？（1）.CO2浓度下降； （2）. 2,3-BPG浓度增加；（3）. PH升高； （4）. 血红蛋白失去四级结构282,3-二磷酸甘油酸（2,3-BPG）位于血红蛋白四级结构的中央空穴内，稳定血红蛋白的T型结构。如果血红蛋白发生突变2,3-BPG结合在血红蛋白

8、的表面，将出现什么情况？29. 在多肽晶体的x-射线研究中，鲍林和克里发现，肽键的长度（1.32 ）介于C-N单键（1.49 ）和C=N双键（1.27）之间。他们还发现，肽键具有平面性（所有四个原子连接的C-N小组在同一平面上），而且两个C处于反式：（1）、根据肽键的键长推测肽键的键能。（2）、依据鲍林和克里的观测结果预测肽键旋转情况。30. 丙氨酸的滴定曲线显示其有两个可解离基团羧基和氨基，其pKa值分别为2.34和9.69。二聚，三聚和多聚丙氨酸的滴定曲线也显示它们有两个可解离基团，它们的pKa值如下表所示：（1）写出Ala-Ala-Ala的结构式，并标明其pKa值。（2）解释为啥pK1的

9、数值随着丙氨酸的聚合度的增加而增加？（3） 解释为啥pK2的数值随着丙氨酸的聚合度的增加而下降？二、是非题1.所有单糖都具有还原性。2.具有相同氨基酸正常的蛋白质并不一定具有相同的构象。3.脂类物质是酯类物质的通称。4.天然蛋白质和肽类中的所有氨基酸都是L-构型。5.疏水蛋白的折叠伴随着多肽的熵增，因此在溶液中蛋白质可自发折叠。6.蛋白质是两性电解质，核酸不是两性电解质。7.辅基是酶的组成部分，总是参与酶的活性部位。8.天然核苷酸中碱基与糖连接的糖苷键既有C-C键，又有C-N键。9.由于DNA的两条链互补，所以两条链的（G+C）%含量是相同的。10.酶原激活是酶蛋白构象发生变化的结果。11.环状DNA的复性速度是与同样长度的线性DNA相同的。12.Km值是所有酶的特征常数，不随酶的浓度和底物浓度的变化而变化。13.酶分子的活性部位中只有可解离的氨基酸残基直接参与酶的催化作用。14.某些酶的Km值可能由于结构上与底物无关的代谢物的存在而改变。15.当同一种酶对几种底物都有作用时，Km最小的底物为最适底物。