临床检验科操作SOPWord下载.docx

1、1、各专业实验室根据省临检中心的有关规定，开展实验室内的质量控制，并制定有关措施。对室 內质控应每日有记录，对失控情况有纠正方法，有预防性措施，对于目前尚无完整的室内质控体系的实验室，应积极创造条件，建立室内质量控制体系。2、各专业实验室必须参加部、省的各次室间质控活动，对每次质控评价应有记录。3、计量仪器（包括分析天平，天平、分光光度计等）应定期校正，每年一次。4、大型分析仪器必须专人负责，有使用维修记录。5、商品化的试剂盒的申购由各专业室的组长负责申报，每月一次报科主任审批，不得使用过期，无批准文号的劣质试剂，进货统一由科室管理，自配试剂须严格校正后方可使用。6、各专业实验室必须建立完整的

2、操作程序，并应严格按程序执行。7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发出。8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时，应逐步建立全面质量控制体系，对标本的采集，运送，保存等纳入严格的管理之中。每日送检的标本应签收。9、急诊检验应严格按照急诊制度执行。（三）安全制度1、菌种、毒种、剧毒品及贵重仪器物品指定专人保管、有防盗措施，建立帐册，记录进出数量，定期检查制度。剧毒药品专人保管，由科室主任，主管试剂的同志负责，放保险柜，领用时须有主管同志在场，作好领用登记。2、易燃物品专柜存放，普通试剂按常规分类存放，并由科室主任和主管试剂同志负责，注意用电安全，特别是电炉子、

3、大烤箱、火焰光度计，由各科使用同志负责安全，严防火灾。3、对工作中可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺伤、烧伤、不慎中毒、传染性标本的污染，各实验室应有应急处理的方法，有关人员均应熟悉。4、用电设备、电源线路、CO2气体、给排水系统的安全性符合使用要求，不能带电检修仪器。5、使用强酸碱腐蚀品时，应在适当的环境下正确操作，防止腐蚀、灼伤、中毒、火灾和爆炸等事件发生。6、注意安全，随手随时关门，下班时要做好水，电，门的安全保卫工作，防火防盗防水。7、科室安全保卫负责：郑军（四） 试剂管理制度1、各专业实验室应根据各自的工作需要，按月向科主任申报所购试剂，并应做到及时盘存清点，入库做到心中有数。2

4、、所有试剂的申请，进货一律由科室统一管理，严格按市卫生局招标要求执行，做到三证齐全。无三无产品。3、各专业实验室应对试剂库存定期检查，不使用过期变质的试剂。4、自配试剂须以严格校正后方可使用。5、试剂的保存应严格按照要求，以保证有效期内能有效地使用，杜绝浪费现象。6、试剂外借一律须经科主任同意方可执行。7、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存，放保险箱内，使用时应有两人在场，并做好登记。8、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和电源。9、供应商所送的试剂必须先经药库清点才能接受，检验科人员清点后必须在货单上签字，有出入者必须向科主任或试剂管理员、组长报告，再将货单交给试剂管理员，以便月

5、底结帐。10、科室试剂管理员：钟梁。（五）实习生管理制度1、科室按实习大纲安排实习时间表，如遇特殊情况科室统一安排。2、实习生必须服从实习单位和科室的直接管理，遵守实习单位的规章制度，参加实习单位的政治、业务学习和有关活动、会议。3、实习生必须加强医德医风修养，文明行医，礼貌待人，主动热情为病人服务。4、实习生应在指导老师指导下进行实习和工作，一切实验结果均须指导老师签名后方能发出报告。不得擅自签名发出报告，指导老师应严格把关逐步培养学生独立工作能力。5、严格请假制度，学生一般情况下不得请事假，节假日按国家法定给与准假，请假一律写报告，一天内经指导老师同意，科主任批准，报告交俞北伟老师登记，三

6、天内经医教科批准，三天以上经学校批准。6、实习生必须准时上班，不迟到早退，要有严格的实习作风，不得离岗，为了培养学生的应急处理能力，实习生必须每天晚上轮流跟班（6.00-9.00）7、实习生必须严格保护实验仪器和公物，科室贵重仪器必须在指导老师具体指导下进行操作。（六）标本管理制度一、标本采集1、按每个项目要求，告诉病人、病房护士或本室采血人员最佳采血时间、采血前空腹或饮食注意、用药情况、活动情况、体位等。2、明确抗凝剂种类、抗凝剂与血的比例、抽血时注意事项。3、体液、分泌物、细菌培养标本按要求留足量、及时送检。二、标本运送1、运送过程中，原则上带盖（不能用棉花等吸水物品），以防倒翻和溢出或雨

7、淋。凡含传染源的标本必须带盖，外套尼龙袋，以防溢出而污染环境。2、不能剧烈振荡，以防标本溶血和有形成分破坏。3、必须及时送检。三、标本接收1、必须认真核对标本上病人姓名、病区、床号、联号与申请单符合。2、必须观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块、细菌培养标本是否符合无菌要求。是否有明显溶血或脂浊。3、不符要求的标本，必须及时填写退回理由单，及时反馈临床。四、标本检测1、在检测每一过程中，都应复核标本接收过程中的每一步骤。2、在标本足够的情况下，不能浪费、随意丢弃或损坏标本。五、标本储存1、当天不能完成的标本，必须分离血清，按要求储存在2-8或-20。2、当天检测完成的标本，血常规储存在2

8、-83天以上，生化免疫储在2-87天以上，脑脊液、胸腹水等重要标本储存在2-87天以上。3、特殊标本按要求保存。六、标本处理检验标本先用含2-3g/L有效氯消毒灵浸泡半小时，再煮沸清洗试管，烘干备用。用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医用垃圾处统一处理。并做好登记。 .七 外单位标本 外单位送检的样本,一律由服务台同志登记后,再转交各实验室检测。实验室保留原始申请单。八、多张检验单标本凡有两张以上的检验申请单（ 包括其他实验室或外送兄弟医院）原则上要分装各管, 随检验申请单一起分别放置各样本盒 ,对采样困难者要主动跟踪样本,并作详细记录以免漏检,分清责任。附录：检验科

9、检测项目标准操作规程A、检室A1、血常规检验（1）标本用EDTA-K20.2ul抗凝静脉血1ml,门诊病人在CD-1700仪器上做三分类测定,住院病人在COULTER HMX仪器上做五分类测定。（2）试剂及仪器COULTER HMX五分类血球分析仪及配套试剂，质控用COULTER 4C PLUS全血质控品，COULTER HMX五分类血分析仪及配套试剂，质控用COULTER 5C 全血质控品。（血液细胞自动化分析仪介绍）（3）操作1）门诊：a）收到血常规标本后，查看核对检验项目，立即编号，放混匀器上混匀3分钟。b）如有血型立即用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。c）血标本在ABBOT CD-1

10、700上检测，结果入库。d）对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类，对于血小板等图形不好或结果异常较大的应手工复查。e）结果核对后，在半小时内报告。2）病房：a）采集血常规标本后，立即编号，试管加盖后放于专用试管架上放入HMX上自动混匀，b）如有血型用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。c）血标本在COULTER HMX上机检测，结果入库。d）对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类，对于血小板等结果图形不好或结果异常较大的应手工复查。（复查条件）e）结果核对后，签发报告单。如果急诊则电话报告，有血型的话，通知病房来拿报告单。（血液项目）（4）项目代号中文名单位WBC白细胞计数109/LLY

11、%（LY）淋巴细胞分类%MO%单核细胞分类NE%（GR）中性细胞分类LY#淋巴细胞计数MO#单核细胞计数NE#中性细胞计数RBC红细胞计数1012/LHGB血红蛋白g/LHCT红细胞压积MCV平均红细胞体积flMCH平均红细胞血红蛋白含量pgMCHC平均红细胞血红蛋白浓度RDW红细胞分布宽度PLT血小板计数MPV平均血小板体积PCT血小板比积PDW血小板分布宽度EO%嗜酸性细胞分类BO%嗜碱性细胞分类EO#嗜酸性细胞计数BO#嗜碱性细胞计数（5）特殊规定在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必作登记,复查和及时报告,以备查询。1.血红蛋白低于100g/L.2.白

12、细胞低于3000/ul.3.血小板低于8万/ul.4.发现白细胞分类异常图形时.5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.（6）临床意义（61）WBC计数参考范围4-10 109/L1、增加 （l）生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。（2）病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。2减少病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。（62）白细胞分类计数（6.2.1）染色液1.

13、瑞氏姬姆萨复合染色液I液取瑞氏染粉 lg、姬姆萨染粉1g，加入甲醇（分析纯），充分振摇，第二天加甘油10ml,混匀即能使用。液pH6468磷酸盐缓冲液（或用H2O替代缓冲液）磷酸二氢钾（无水）6648磷酸氢二钠（无水）256g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整 pH，加水至1000ml。染色置玻片于染色架上，滴加染液35滴，使其迅速盖满血膜，约1min后，滴加缓冲液5一10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5一10min后用水冲去染液，待干。或染色液盖满血片后半分钟即可水洗镜检。2快速染色液I液:磷酸二氢钾 6648磷酸氢二钠 256g水溶性伊红 Y 4g（或伊红 B25g）蒸馏水

14、1000ml石炭酸 40ml煮沸，待冷备用。亚甲蓝 4g蒸馏水 1000m1高锰酸钾 248g把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s，水洗，再浸入液30s，水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。随着染液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。330s快速单一染色液贮存液瑞氏染粉 20g姬姆萨染粉 068天青 E 06g甘油 100ml聚乙烯D比咯烷酮（PVP） 200g甲醇 1000mI磷酸盐缓冲液（pH6.2-68）磷酸氢二钠 0268石炭酸 40ml蒸馏水加至 1000mI应用液l液、2液按3：1比例混合放置14天后备用。将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30

15、s后用自来水冲洗。加表面活性剂 PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青 E可缩短染色时间。（6.2.2）参考范围LY: 187-47LY#：（1033）109LMO: 35-79MO#：（0207）GR: 460一765GR#：（1864）1增多（l）中性粒细胞：急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。（2）嗜酸性粒细胞：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液病、手术后、烧伤等。（3）嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。（4）淋巴细胞：百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核

16、、传染性肝炎等。（5）单核细胞：结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。（3）淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。（6.3）常见的异常白细胞形态的变化在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的异常变化。（6.3.1）中性粒细胞1核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约占1：13。（1）核左移：是指杆状核细胞增多，常见

17、于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。 伴白细胞总数增高的核左移：称再生性左移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。（2）核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶（正常时多分3叶），这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，表示预后不良。2.毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时，中性粒细胞可出现形态变异。（l

18、）细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。（2）毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小不等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。（3）空泡：可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。（4）Dohle体：脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。（5）核棘突：胞核有各种形态的芽状突出， 临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。3.退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。（6.3.2）淋巴细

19、胞淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症最为常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴细胞。传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则型和幼稚型。（6.4） 血红蛋白 参考值男:120-160g/L女:110-150g/L（6.5）红细胞分布宽度RDW为反映红细胞体积异质性的参数，常以所测得红细胞体积大小的变异系数（CV）来表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、准确。 RDW增大时有临床意义。（l）用于缺铁性贫血（IDA）的诊断与疗效观察：缺铁性贫血时 RDW增大，尤其是MCV尚处于参考值范围时（缺铁性贫血

20、时MCV应下降）RDW增大更是早期缺铁的指征；MCV减小时，RDW增大更为显著，当给予铁剂治疗有效时， RDW将比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。产生这种现象的原因，主要是因补铁后产生网织红细胞，及正常红细胞生成并释放人血与给药前的小红细胞并存，故 RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少， RDW便逐渐降至参考范围。（2）用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断：IDA和轻型地中海性贫血时，MCV均可减小。但 IDA时 RDW增大，而轻型地中海性贫血时 RDW正常。（3）用于贫血的分类（Bessman分类法）：MCV只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质性，对红细胞体

21、积大小的评价，过去靠血涂片上红细胞形态的观察，这种观察常受血涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大，而且不能定量，RDW能较好地反映红细胞体积的异质性，把 MCV和 RDW结合用于对贫血的分类将更为完善（表 ll2）。表 l-1-2 Bessman MCVRDW贫血分类类 别正 常缺铁性贫血巨幼细胞性贫血溶血性贫血铁粒幼细胞贫血再生障碍性贫血单纯小细胞性贫血无变化;增大;减少（6.6） 平均血小板体积MPV的临床意义要结合 PLT变化才有价值。（1）鉴别血小板减少的原因： 当骨髓造血功能损伤致血小板减少时， MPV减少； 当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少， MPV增大； 血小板分

22、布异常致血小板减少时，MPV正常。（2） MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时，MPV与 PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，功能恢复时，MPV增大常先于 PI。T升高。 MPV越小；当造血（3）其他方面应用： MPV增大：见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰（ITP）、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。 MPV减小：见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。（6.7）.血小板比积（plateletcrit，PCT）男 0108 -0272女 0114一0282PCT与 PLT和 MPV正相关，所以PLT、MPV的增减均

23、可使 PCT发生变化。增高：见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。减低：见于再障、化疗后、血小板减少症等。（6.8）血小板体积分布宽度（platelet volume distribution width，PDW ）0155-0181（155-181）（以血小板体积变异系数 CV表示）PDW是反映血小板体积大小的异质性参数。增大：急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。（6.9）血细胞体积分布直方图的应用（l）红细胞体积分布直方图：将 MCV和RDW配合直方图分析，可直接观察红细胞体积的分布情况。 只现一个峰：见于正常人、缺铁性贫血（峰左移）、巨幼细胞性贫血（峰右

24、移）。 可现两个峰：缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时，可出现一个小红细胞峰和另一个正红细胞（或网织红细胞）峰。巨幼（红）细胞性贫血给予叶酸、维生素 Bl2治疗有效时亦可见两个峰。（2）白细胞体积分布直方图：静脉血比毛细管血白细胞数量略低。中档的血细胞分析仪一般为三分群，它是根据加入溶血剂后，白细胞膜通透性改变而发生皱缩，不同类型的白细胞皱缩后体积有明显差别，每个皱缩白细胞通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号经放大、甄别后，微机处理数据得到其体积分布直方图。淋巴细胞群为3590 fI大小中间细胞群为90一160 fl大小粒细胞群为160450 fI大小三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数正

25、常人白细胞体积分布直方图，可见两个明显分离的峰，左峰为小细胞群（淋巴细胞），右峰为大细胞群（粒细胞），两峰之间为中间细胞群的分布。急性白血病时，由于异常的原始、幼稚细胞增多，可见中间细胞明显增高，这时直方图上见一个峰，峰值常在90一160 fl之间。这时必须推片染色镜检。（3）血小板体积分布直方图：正常人血小板体积主要分布在220 fl之间，2130 fI之间有少量大血小板，一般仪器以30 fI为最大的分析界标。血小板体积增大时，直方图会出现明显拖尾现象。有小红细胞或红细胞碎片干扰时，直方图尾部会抬高。（6.10）三种红细胞参数平均值的计算1、原理根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积，计算红细胞平均容量、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度，用作贫血的形态学分类。2、计算方法（1）平均红细胞体积（mean corpuscularvolume， MCV）：是指每个红细胞的平均体积，以飞升（fI）为单位。每L血液中红细胞体积（L）1015MCV