微生物学检验知识点整理第一部分Word文档格式.docx

1、B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后，使A亚单位穿越细胞膜与腺苷环化酶作用，令胞ATP转变为cAMP。胞质cAMP水平增高后，导致肠粘膜细胞的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致可持续几天的腹泻。LT-与霍乱肠毒素两者间的氨基酸的同源性达75%，他们的抗原高度交叉。 什么是O157：H7大肠杆菌？其致病物质和所致疾病是什么？O157：H7为肠出血性大肠杆菌的一个血清型，为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。其致病物质是其表达的志贺毒素。 如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达试验的结果？若O、H凝集效价均超过正常值，则肠热症的可能性大，若两者均低，肠热

2、症的可能性小，若O不高H高，可能预防接种或非特异性回忆反应，若O高H不高，则可能感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。 对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么？ 答:根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。肠热症第1、2周取外周血，第2、3周取粪便、尿液，全程可取骨髓分离培养细菌。 简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及快速方法。常规鉴定：初步鉴定最后鉴别鉴别试验血清学鉴定非典型菌株可用传代法及毒力试验进行鉴定。快速诊断：直接凝集免疫荧光菌球法协同凝集试验乳胶凝集试验分子生物学方法 幽门螺杆菌与空肠弯曲菌的异同？1.尿素酶试验 2.产生大量尿素酶 3.婴幼儿腹泻

3、霍乱患者为什么会出现剧烈腹泻及严重脱水的症状？霍乱弧菌可产生致泻性极强的霍乱肠毒素，该毒素由1个A亚单位和5个相同的B亚单位组成，B亚单位使毒素分子与真核细胞上的受体结合，A亚单位具有酶活性功能。A亚单位进入细胞后，激活腺苷环化酶，令胞cAMP水平增高，导致肠粘膜细胞的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致严重的腹泻和呕吐。 假单胞菌属的代表菌种是何菌？其生物学性状有何特点？v答：铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。其生物学特性主要有4不生长，而42生长。在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落，在普通培养基上可产生多种色素。 非发酵菌鉴定原则及初步分群试验分群依据

4、：氧化酶试验葡萄糖氧化发酵动力麦康凯培养基上生长情况。 假单胞菌的概念及其共同特点假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性菌，氧化酶试验阳性，多为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。其共同特点是：革兰阴性、直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞、有荚膜，多数有鞭毛，专性需氧，生长温度围广，最适生长温度35，少数能在4或42生长。生长中可产生各种水溶性色素。 简述铜绿假单胞菌的检验方法标本的采集：按疾病和检查目的，采取不同的标本。标本直接检查：直接显微镜检查；抗原检测；核酸检测。分离培养和鉴定。 简述白喉棒状杆菌的致病过程。白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜，有时

5、皮肤、结膜等部位也可见到。传染源为患者及带菌者，细菌多随飞沫或污染的物品传播，感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素，引起局部炎症和全身中毒症状。白喉杆菌在侵犯局部增殖，产生外毒素致病。 简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。琼脂平板毒力试验。将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中，每只平皿10ml，50冷却，在凝固之前，将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂，制成平板（Elek平板）。在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种，划线宽度约6-7mm，两端与皿壁连接。同时，与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株，作为阳性对照。37培养24-48小时，若菌苔两侧出现斜

6、向外延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。SPA协同凝集试验：将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上，再加入待检菌培养物上清液。若有白喉外毒素，则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。对流电泳：将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中，电泳30min后，若两孔之间出现白色沉淀线，表明待检菌为产毒株。 临床上对疑似的炭疽患者怎样鉴定病原。若从标本中检出革兰阳性大杆菌，两端平截、呈竹节状排列，并有明显荚膜，在人工培养基上生长可产生芽孢，呈卵圆形，小于菌体，位于菌体中央；在普通琼脂平板上形成灰白色、扁平、干燥、无光泽的菌落；动力阴性，牛乳凝固试验、噬菌体裂解试

7、验、串珠试验和青霉素抑菌试验均为阳性，则可报告：“检出炭疽芽胞杆菌”。有条件者可应用DNA探针，其敏感性高，特异性强。其他鉴定试验作为参考指标，可根据具体情况酌情选做。同时应注意与其它芽胞杆菌相鉴别。 简述结核菌素试验的原理、方法及结果分析和实际应用。（1）原理：结核菌素试验属于迟发型超敏反应，用结核菌素试剂作皮肤试验，感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者，一般都出现阳性反应。（2）方法：取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌侧皮下，经4872h检查反应情况。应特别注意局部有无硬结，不能单独以红晕为标准。（3）结果分析：阳性 注射部位硬结、红肿直径0515cm之间。这表明机体曾感染过结核，出现

8、超敏反应，但不表示正患结核病；强阳性 硬结直径超过15cm以上，表明可能有活动性结核，应进一步检查；阴性 注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于05cm，说明无结核感染，但应考虑下述情况：如受试者处于原发感染的早期，或正患有其他传染病（如荨麻疹等）、霍奇金病、结节病、艾滋病。（4）应用：选择BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG；结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用；可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查；可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。 结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高，这一特点有何意义？结核分枝杆菌胞壁含脂质多，与其染色性、抵抗力、生长速

9、度及致病性等特性有密切关系，脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性；细胞壁含大量脂质，可防止菌体水分的丢失，故对干燥的抵抗力特别强；同时影响营养物质的吸收，故生长缓慢，且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。 简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。1显微镜检查 （1）直接涂片染色镜检：是一种临床常用的简易快速的检查方法。直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀（3000rmin，20min）的尿沉淀物23接种环涂片，涂片要厚。经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色，或作金胺“o”荧光染色。前法用油镜检查，后法用荧光显微镜高倍镜检查。镜检时应仔细查遍整个涂片或观察

10、至少100个视野。结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，其它细菌和细胞为蓝色。经荧光染色的结核分枝杆菌，在黑色背景中呈亮黄色。涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌或“未找到抗酸性杆菌”，而不能报告“找到结核分枝杆菌”。 （2）浓缩集菌涂片检查法：如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌，应采用浓缩集菌涂片检查法，以提高结核杆菌的检出率。所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心，取沉淀涂片，或是采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取34个接种环，涂抹面积大约直径在15mm即可，干燥固定后染色镜检。2核酸检测 用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增，然后用结核分

11、枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。PCR技术的特异性与敏感性均大于95。3抗PPDIgG的检测 用ELlSA法检测患者血清中抗PPDIgG，可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。肺结核病人的血清阳性率为8090。 简述抗酸染色的步骤及结果，并举出两种抗酸菌。初染：石炭酸复红加温染5min脱色：3%的盐酸酒精脱色1min复染：美兰染1min结果：抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌 一患者怀疑患有肺结核，如何进行微生物学检查？（包括标本采集至报告结果的全过程，检查方法应有传统方法和快速检查方法。）1）标本采集：根据感染部位不同，采集不同的标本。

12、2）标本直接检查：显微镜检查核酸检测抗PPDIgG的检测。 3）分离培养与鉴定 4）药物敏感性试验 5）免疫学诊断6）动物接种 临床常见的致病性厌氧芽胞梭菌有哪些？其致病条件是什么？临床常见的致病性厌氧菌主要有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌与艰难梭菌。其致病条件是大面积创伤、局部供血不足。 简述破伤风梭菌的形态及培养特性。形态：菌体细长，由周鞭毛，能运动。无荚膜。芽胞正圆形，比菌体大，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。培养特性：专性厌氧菌普通培养基不易生长。在血平板上37培养48小时始见薄膜状爬行生长，伴溶血。 简要列出破伤风的防治措施。采用注射破伤风类毒素的 主动免疫法，作为特异性预防。迅速

13、对伤口进行清创扩创，防止形成厌氧微环境，是十分重要的防治措施。特异性治疗使用抗毒素。 产气荚膜梭菌的形态结构及培养特性。革兰阳性粗大杆菌，芽胞位于次极端，呈椭圆形，无鞭毛。在菌体可形成明显的荚膜。厌氧，但不如破伤风梭菌厌氧严格。最适生长温度45时，繁殖周期仅为8min，在血平板上，多数菌株有双层溶血环。在蛋黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈。在牛奶培养基能分解乳糖产酸产生“汹涌发酵”现象。 肉毒梭菌的致病机理及防治原则其致病物质是肉毒毒素，肉毒毒素是已知最剧烈的神经毒素。肉毒毒素经胃肠道吸收入血后，作用于中枢神经系统的脑神经核和外周神经-肌肉接头处，阻碍乙酰胆碱的释放，引起运动神经末梢功能

14、失调，导致肌肉麻痹。 试举出四种由产气荚膜梭菌引起的疾病名称。气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎、深部脓肿。 为什么所有的脆弱类杆菌对青霉素具有耐药性？治疗应选用哪些抗生素。因脆弱类杆菌是革兰阴性菌，青霉素的作用位点是五肽交联桥，革兰阴性菌无五肽交联桥，所以对青霉素耐药。治疗应选用氯霉素、氨苄青霉素、甲硝唑等。 布鲁菌的主要致病特点是什么？怎样协助临床检验诊断？布鲁菌主要致病特点：羊、猪、牛是布鲁杆菌的自然宿主，人通过接触感染动物或感染胎畜、羊水和乳汁等分泌物而感染。细菌通过完整的皮肤黏膜进入宿主体，被吞噬细胞吞噬后可在吞噬细胞增殖并扩散到局部淋巴结形成原发感染灶；在淋巴结增殖到一定程度后可侵入血

15、流并进一步扩散到肝、脾、骨髓等其它组织中繁殖，再释放入血。如此反复多次造成间歇性菌血症和多脏器感染。菌血症时由于毒素的作用可使病人表现为发热等中毒症状，故临床表现为反复发热，也称波浪热。该菌在宿主体可顽强增殖和扩散，主要与荚膜的抗吞噬和透明质酸酶的扩散作用有关。微生物学检查：1）查细菌：取标本（主要是血液）分离培养；2）查抗体：急性期用玻片凝集试验测IgM抗体，其效价以1：200以上为阳性；慢性期作补体结合试验测IgG抗体，结果以1：10为阳性；3）查细胞免疫：布鲁菌属试验阳性可诊断为慢性或曾患过布鲁病。 我国流行的布氏杆菌有哪些生物种？最常见的是哪个种？怎样鉴别之？我国流行的布氏杆菌主要有羊

16、、牛、猪三个生物种，最常见的是羊布氏杆菌。各型主要依靠H2S的产生及对碱性染料的抵抗作用鉴别。羊布氏杆菌不产生H2S，可在含硫堇和碱性复红的培养基中生长。 简述流感嗜血杆菌的生物学特点.革兰阴性短小球杆菌，无芽胞、无鞭毛、不能运动，多数菌有荚膜。需氧或兼性厌氧最适生长温度35，最佳培养基是巧克力琼脂。 简述钩端螺旋体病的传播方式和钩端螺旋体的致病过程。钩端螺旋体的主要储存宿主是鼠类和猪。动物感染钩端螺旋体后，大多呈隐性感染，少数家畜感染后，可引起流产。钩端螺旋体在感染动物的肾脏中长期存在，持续随尿排出，污染水源和土壤。人类与污染的水或土壤接触而被感染。钩端螺旋体能穿透完整的皮肤和粘膜或从其破损

17、处侵入人体，在局部迅速繁殖，并经淋巴系统或直接进入血循环引起钩端螺旋体血症。 简述梅毒螺旋体的致病性与免疫性特点。梅毒螺旋体有很强的侵袭力，在自然情况下，只感染人类，可分为先天性和后天性两种前者通过胎盘传染给胎儿，后者通过性接触传染。后天梅毒分为三期，表现为反复、潜伏和再发现象。先天梅毒是梅毒孕妇患者的梅毒螺旋体通过胎盘进入胎儿血流，并扩散至肝、脾、肾上腺等脏量繁殖引起胎儿全身性感染，导致流产、早产或死胎；或出生活的梅毒儿，表现锯齿牙、间质性角膜炎、先天性耳聋。梅毒的免疫是传染性免疫，即由梅毒螺旋体感染时才有免疫力。 简述莱姆病螺旋体的致病特点。其致病机制尚无定论。当人被疫蜱叮咬后，伯氏疏螺旋

18、体在局部繁殖。经3-30天潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑。开始为红色斑疹或丘疹，后逐渐扩大形成一片大的圆形皮损。皮损逐渐扩大，但一般经2-3周，可自行消退。 比较支原体与细菌L型的主要区别。（表格自制） 【生物学性状与致病性 -细菌L型 -支原体】-培养特性-需要高渗-需要胆固醇 菌落-油煎蛋状，0.5-1mm-油煎蛋状，0.1-0.3mm形态-高度多形态性-高度多形态性大小-大小为0.6-1.0m-大小为0.2-0.3m细胞膜-不含固醇-含高浓度固醇细胞-缺乏或无-无细胞壁缺失的原因-青霉素、溶菌酶和胆汁等作用所致，去除条件可恢复-遗传通过滤器-能通过滤器-能通过滤器 对青

19、霉素的作用-抵抗-抵抗液体培养-有一定混浊度，可附壁-混浊度极低致病性-引起慢性感染，如骨髓炎、尿路感染和心膜炎等-原发性非典型性肺炎，泌尿生殖道感染和条件致病 肺炎支原体与解脲脲原体各引起什么疾病？肺炎支原体支原体肺炎，解脲脲原体是引起性传播疾病的病原体之一。 简述引起我国三种主要立克次体病的病原体其传播媒介及所致疾病。普氏立克次体传播媒介是人虱，所致疾病为流行性斑疹伤寒 莫氏立克次体传播媒介是鼠蚤和鼠虱，所致疾病是地方性斑疹伤寒 恙虫病立克次体传播媒介是恙螨，所致疾病为恙虫病。 立克次体有哪些共同特征？体积：小于细菌，大于病毒，形态以球杆或杆状为主，革兰染色阴性；细胞寄生；以节肢动物为寄生

20、宿主、储存宿主和传播媒介；为人畜共患病的病原体；对多数抗生素敏感，而磺胺可刺激其增殖。 简述外斐反应的原理及意义。立克次体的脂多糖成分与变形杆菌的菌体抗原有共同成分，可引起交叉反应。根据这一原理用易于制备的变形杆菌O抗原代替立克次体抗原建立一种非特异性直接凝集实验，为外斐反应。利用此反应可检测患者体是否有抗立克次体的抗体，从而辅助诊断斑疹伤寒、斑点热和恙虫病。 简述衣原体独特的发育周期。沙眼衣原体严格寄生在细胞，有独特的发育周期，在其繁殖发育的周期，可见两种形态，原体及始体。原体具有感染性，通过表面受体吸附于易感细胞并被细胞吞噬进体。原体在吞噬体体积增大进入增殖状态，形成始体。始体在吞噬体以二

21、分裂的形式进行分裂，繁殖出子代并成熟为原体，从易感细胞中释放出来，再感染新的易感细胞。 沙眼的病原体及其传播方式。沙眼的病原体是沙眼衣原体，传播方式主要通过眼-眼或眼-手-眼传播 衣原体有哪些重要特点？形态多为球型，革兰染色阴性原体小，介于细菌和病毒之间，始体大，大小与细菌相似。代，缺乏能量来源，故严格的细胞寄生有独特的发育周期有DNA和RNA两种核酸由肽聚糖组成的细胞壁，对多种抗生素敏感。 衣原体引起哪些重要疾病？能引起人类的沙眼、泌尿生殖道的感染和呼吸系统等疾病。 简述真菌的培养特性。营养要求不高，在一般的细菌培养基上能生长，最适温度22-28，但深部感染真菌最适温度为37。多数病原性真菌

22、生长缓慢需培养1-4周。酵母型真菌生长较快，一般经24-48小时可形成肉眼可见的菌落。 简述白色念珠菌感染的微生物检查方法及结果分析。直接镜检可见革兰阳性、圆形或卵圆形芽生孢子及假菌丝分离培养在沙氏培养基上形成乳白色或淡黄色类酵母菌落，镜检可见假菌丝及成群的卵圆形芽生孢子血清学实验可检测多种假丝酵母菌的抗体，应用ELISA或胶乳凝集实验可检出白假丝酵母菌细胞壁甘露聚糖。动物实验将白假丝酵母菌悬液1ml经尾静脉或腹腔注入小鼠或耳静脉注入兔体，5-7天后动物死亡，解剖发现肾、肝等有脓肿。 简述病毒衣壳的结构、功能，并举例说明之。 1.衣壳是包围在核酸外面的蛋白质外壳，由一定数量的壳粒组成。根据壳粒

23、数目和排列方式不同分为：螺旋对称型，如正粘病毒、副粘病毒；20面体对称型，大多数球状病毒；复合对称型，如噬菌体。功能：保护、介导、抗原性 简述病毒侵入宿主细胞进行复制的周期或过程。 吸附，穿入，脱壳，生物合成，组装、成熟和释放。 简述病毒成功繁殖需要哪些条件. 允许病毒颗粒在缺乏宿主细胞时为一种稳定生存形式；侵入宿主细胞的机制；病毒成分在细胞复制所需的遗传信息以及病毒成分在细胞包装、成熟、释放的辅助信息。 试述灭活病毒和保存病毒的主要方法?灭病毒活：物理因素，化学因素；保存病毒：-70，在冻存液中加入甘油或二甲基亚砜 简述采集病毒感染标本时应注意的事项. 标本采集应注意：采样时间，采集部位，采

24、集方法 培养病毒的方法有哪几种？ 组织培养，鸡胚培养，动物接种。 简述病毒的分类原则 核酸类型与结构 病毒的大小与形态 病毒结构 对脂溶剂的敏感性 抗原性 培养特性 病毒对理化因素的敏感性 宿主种类传播方式和媒介等。 简述流行性感冒病毒的形态结构及其主要结构成分的功能。 流感病毒呈球形或丝状流感病毒的部结构 核衣壳：病毒分片段的RNA，结合有核蛋白NP以及与复制和转录有关的三种依赖RNA的RNA多聚酶蛋白。呈螺旋对称。基质蛋白（M蛋白）：覆盖在核衣壳外面，M蛋白抗原性稳定，也具有型特异性。外膜：来自宿主细胞的脂质双层膜。 流感病毒的辅助结构 血凝素（HA）：HA（病毒吸附）保护性抗原，血凝抑制

25、抗体（保护性抗体） 神经氨酸酶（NA） （核衣壳释放）与病毒释放有关。 简述分离与鉴定流感病毒常用的实验室检验方法有哪些。 .主要包括病毒分离培养、血清学诊断和快速诊断方法 甲型流感病毒为何容易引起大流行？ 流感病毒RNA分节段，甲型和乙型由8个节段，丙型由7个节段构成。甲型流感病毒根据其表面HA和NA抗原性的不同，可分为若干亚型。 简述流感病毒的抗原变异。 抗原漂移（antigenic drift）因HA或NA的点突变造成，变异幅度小，属量变，引起局部中、小型流行。抗原转换（antigenic shift）因HA或NA的大幅度变异造成，属质变，导致新亚型的出现，引起世界性的暴发流行。 呼吸道

26、病毒中，对胎儿危害较大的病毒是哪种？其致病性有何特点？ 风疹病毒。主要通过呼吸道感染引起风疹，成人多引起隐性感染，孕妇感染时易发生垂直感染，造成胎儿流产或畸形。 总结肠道病毒的共同特性。 共同特征： 病毒体呈球形 ，衣壳为20面体对称结构，无包膜；基因组为单股正链RNA 在宿主细胞浆进行增殖，迅速引起细胞病变。耐乙醚，耐酸，对紫外线、干燥敏感。 主要经粪口途径传播。 肠道病毒的致病性有何特点？ 特征是：病毒在肠道中增殖却很少引起肠道疾病；不同肠道病毒可引起相同的临床综合征，同一种病毒可引起几种不同的临床疾病。 肠道病毒可引起哪些疾病？ 主要疾病有：脊髓灰质炎，无菌性脑膜炎、脑炎和轻瘫 疱疹性咽

27、峡炎 手足口病 流行性胸痛 心肌炎和心包炎 眼病 简要介绍脊髓灰质炎病毒的检验方法。 标本采集与处理 抗原与核酸的检测 病毒分离与鉴定 抗体检测 简述柯萨奇与ECHO病毒的微生物特性 形态结构 基因培养抵抗力 简述轮状病毒的微生物检验方法 标本采集与处理 标本直接检查 电镜和免疫电镜检查抗原检测病毒RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳分析核酸检测病毒分离培养 简述乙型肝炎病毒的形态结构。 球形,双层衣壳。外衣壳=包膜（脂质双层+蛋白质） HBsAg等 衣壳： HBcAg、HBeAg 部： DNA- 环状双链、DNA多聚酶 简述乙型肝炎病毒的基因组及其功能。 不完全双链环状DNA，含4个ORF,编码7个蛋白S：HBsAg,Pre-s1,Pre-s2 C：HBcAg，HBeAg P：polymerase多聚酶X：HBxAg基因 简述乙型肝炎病毒的抗原组成及其意义。 HBV 抗原组成、HBsAg表面抗原：是机体受HBV感染的主要标志之一。具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗HBs 。、HBcAg核心抗原：HBcAg主要定位于感染细胞核，不易从患者血清中检出。但HBcAg也可在肝细胞膜表面表达，宿主CTL作用的主要靶抗原。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。检出高效价抗HBc，特别是抗HBc IgM则表