第10章肠杆菌科Word下载.docx

1、形态杆状弧状、杆状球杆状鞭毛周鞭毛或无单鞭毛单、丛、周鞭毛或无无鞭毛注：*不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌除外（2）分类鉴别：用苯丙氨酸脱氨酶试验和葡萄糖酸盐试验可将肠杆菌科分为三大类（表10-2）。 表10-2 肠杆菌科初步分类苯丙氨酸脱氨酶葡萄糖酸盐菌属埃希菌属，志贺菌属，沙门菌属，枸橼酸菌属，爱德华菌属，耶尔森菌属变形杆菌属，普罗威登斯菌属，摩根菌属克雷伯菌属，肠杆菌属，沙雷菌属，哈夫尼亚菌属，耶尔森菌属（3）属、种、群、型的区分：根据不同菌属的生物学特性、血清学特性等可将已分类的肠杆菌科细菌鉴定到属、种、群、型、株。（二）埃希菌属本属以大肠埃希菌为代表种。1细菌特性大肠埃希菌为革兰阴性杆菌，

2、直杆状，周鞭毛，能运动，有菌毛。具有O抗原、H抗原、K抗原，其血清型别按OKH的顺序排列，以数字表示，如O111K58H2；O157H7等。兼性厌氧，营养要求不高，菌落为灰白色、圆形，在肠道选择培养基上能发酵乳糖产酸形成不同颜色的菌落。生化特征为：发酵多种糖类产酸产气，KIA：AA+-，脲酶-；IMViC+-。2临床意义大肠埃希菌是临床最常见的革兰阴性杆菌，也是医院感染常见病原菌，可引起各种肠道外感染和肠道内感染。引起肠道内感染的亦称为致腹泻大肠埃希菌，分为五组：（1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC） ETEC致病机制主要通过产生LT和ST肠毒素导致腹泻和中毒症状，是旅游者腹泻和婴幼儿腹泻的常见

3、病因，导致恶心、腹痛、低热和类似轻型霍乱的急性水样腹泻。（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC） 是婴儿腹泻的重要病原菌，可导致发热、呕吐、严重水泻和粘液便，常引起婴儿脱水性酸中毒。（3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC） 与志贺菌有共同抗原，可引起类似志贺菌肠炎的症状，如发热、腹痛、水泻或典型菌痢的里急后重症状，并出现脓血粘液便。（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC） 主要血清型为O157H7，引起出血性结肠炎（HC）。表现为腹痛、水泻、血性便。主要见于婴幼儿。以暴发流行为主。O157H7感染者中有少部分可发展成为溶血性尿毒综合征（HUS），出现溶血性贫血、血小板减少性紫癜和急性肾功能不全。（5）肠凝

4、聚性大肠埃希菌（EaggEC） 引起婴儿急性或慢性水样腹泻伴脱水，偶有腹痛、发热与血便。3微生物学检验（1）标本采集 无菌方法采集各类感染标本及时送检；粪便标本宜采集新鲜、有脓血、粘液的部分。（2）检验方法1）显微镜检查 为革兰阴性杆菌。2）分离培养 标本接种于BAP、SS、MAC/EMB培养基、或增菌培养基，置35孵育1824h，观察菌落。尿液培养须作菌落计数。3）鉴定与鉴别肠道外大肠埃希菌：本菌因发酵乳糖产酸在MAC上为红色菌落，在EMB上为紫黑色菌落。生化特性如符合即可鉴定为大肠埃希菌。肠道内大肠埃希菌：致腹泻大肠埃希菌的基本生物学特性与肠道外大肠埃希菌相似，但分别具有特殊的血清型、肠毒

5、素或毒力因子。因此，须通过不同的方式来鉴定种、型。ETEC：主要通过测定ST和LT肠毒素来鉴定。须用生物学方法（兔肠结扎试验，乳鼠灌胃试验、细胞培养等）、免疫学或分子生物学方法来检测。EPEC：用EPEC分型血清作OH分型。EIEC：用EIEC OH血清进行分型；毒力试验为豚鼠眼结膜试验。与志贺菌主要鉴别试验是醋酸钠、葡萄糖铵和黏质酸盐试验，EIEC均为阳性，而志贺菌均为阴性。EHEC：可用EHEC OH血清进行分型。美国CDC已建议将O157H7血清型列为常规检测项目。EaggEC：采用液体培养-凝集试验或DNA探针检测。4耐药性大肠埃希菌的耐药性主要表现在产生超广谱-内酰胺酶（ESBL）。

6、产ESBL细菌对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素及单环菌素耐药，仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂（克拉维酸）敏感。（三）沙门菌属沙门菌属有多种血清型，95%以上沙门菌都属于AF群。临床常见沙门菌为：伤寒、猪霍乱、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌，鼠伤寒和肠炎沙门菌等。沙门菌无芽胞，无荚膜，有周鞭毛。兼性厌氧，营养要求不高。在普通琼脂上为无色、半透明中等大小菌落。在肠道杆菌选择性培养基上为透明、半透明菌落，与志贺菌相似。大多数菌株能产生H2S，而在SS琼脂上形成黑色中心的菌落。O抗原是沙门菌分群的依据。H抗原为沙门菌分型的依据。表面抗原以Vi抗原为代表：常存在于伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌，Vi抗原能

7、阻断O抗原与相应抗体发生凝集，加热可将其破坏。生化特性KIA：KA+/-+/-；IMViC-+-/+，动力、赖氨酸脱羧酶均+，尿素酶-。沙门菌可引起以急性胃肠炎或食物中毒、菌血症（败血症）、伤寒、副伤寒。目前沙门菌已出现耐药现象，以鼠伤寒沙门菌为主，应注意耐药监测。疑为伤寒沙门菌感染可于第1周采血，第2、3周取粪便，第3周也可取尿液，全病程取骨髓做培养。将标本增菌或直接接种BAP、MAC、SS培养基。若SS、EMB或MAC培养基上生长出无色透明，或黑色中心菌落则进一步鉴定。常见沙门菌的主要生化反应（表10-3）。表10-3 常见沙门菌的主要生化反应试验非伤寒沙门菌伤寒副伤寒AKIAKA+KA-

8、+ WKA+-/W吲哚枸橼酸盐脲酶赖氨酸鸟氨酸动力K：产碱；A：产酸；：90%100%菌株阳性；：90%100%菌株阴性；W：弱阳性血清分型鉴定：首先用AF多价O血清初步鉴定，再用单价O因子血清鉴定到群（A、B、C、D、E、F），接着用H因子血清第一相（特异相）定型，最后用H因子血清第二相（非特异相）辅助定型。若细菌生化反应符合沙门菌，而AF多价O血清与细菌不产生凝集现象，应考虑是否有表面抗原（Vi）存在，应加热或传代去除Vi抗原后再进行AF多价O血清凝集试验。血清学诊断：常用肥达反应检测，判断标准如下：伤寒沙门菌O凝集效价180，H效价1160，副伤寒A、B、C的H效价80有诊断意义；单次检

9、测效价增高不能定论，应在病程中逐周动态复查，若效价递增或恢复期比初次效价4倍者有诊断意义；一般O、H均升高，伤寒可能性大；O不高而H高可能为预防接种的回忆反应；O高而H不高则可能为感染早期或与O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染，可于一周后复查，如H升高则可诊断为伤寒。（四）志贺菌属伯杰细菌鉴定手册将志贺菌属分为A、B、C、D 4群和44个血清型。A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。志贺菌是细菌性痢疾的病原体。志贺菌无芽胞，无荚膜，无鞭毛，多数有菌毛。兼性厌氧，营养要求不高，在肠道杆菌选择性培养基上呈无色菌落。志贺菌属典型生化反应模式为KIA：KA（宋内志贺菌个

10、别菌株可迟缓发酵乳糖）。IMViC/，脲酶，动力。标本采集应在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、粘液部分，床边接种或立即送检，昏迷不能排便病人可用肛拭取样。将标本接种于肠道鉴别培养基MAC/EMB，选择培养基SS，如有无色半透明菌落生长，取可疑菌落进行鉴定。符合典型生化反应模式可进行血清学鉴定。血清学鉴定首先用志贺菌属4种多价血清作玻片凝集试验，如凝集再用A群、B群、C群、D群单价血清鉴定到种、型。实验中应注意K抗原的阻断作用，并应考虑是否为EIEC。志贺菌属各群间的鉴别，见表10-4。志贺菌与EIEC鉴别可用葡萄糖铵、醋酸盐、黏质酸盐试验，前者均为阴性，后者均为阳性。志贺菌属与类志贺邻单胞菌

11、鉴别可用氧化酶、动力试验，志贺菌为阴性，后者均为阳性。志贺菌属与伤寒沙门菌鉴别可用动力、H2S试验和O9抗原检测，前者均为阴性，后者均为阳性。表10-4 志贺菌属各群间生化反应鉴别生化反应A群B群C群D群-半乳糖苷酶鸟氨酸脱羧酶甘露醇/（五）克雷伯菌属克雷伯菌属有5个种，即肺炎克雷伯菌、产酸（催娩）克雷伯菌、解鸟氨酸克雷伯菌、植生克雷伯菌和土生克雷伯菌。其中肺炎克雷伯菌又可分为3个亚种：肺炎克雷伯菌肺炎亚种、臭鼻亚种、鼻硬结亚种。克雷伯菌属中肺炎克雷伯菌是重要的条件致病菌之一，可引起典型的原发性肺炎，也可引起各种肺外感染。肺炎克雷伯菌有荚膜，有菌毛，无芽胞，无鞭毛。兼性厌氧，在麦康凯平板上形成

12、红色粘稠菌落。克雷伯菌属生化特性为：KIA：AA+-，IMViC/，脲酶多，动力-。种间鉴别见表10-5。表10-5克雷伯菌属种间鉴别（阳性）肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌解鸟氨酸克雷伯菌植生克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌土生克雷伯菌9910020甲基红10969860V-P953040903丙二酸盐93黏质酸盐25葡萄糖产气97乳糖（六）肠杆菌属肠杆菌属包括11个种，即产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、日勾维肠杆菌、阪崎肠杆菌、中间型肠杆菌、泰洛肠杆菌、河生肠杆菌、阿氏肠杆菌、致癌肠杆菌、溶解肠杆菌、超压肠杆菌。肠杆菌属是常见的环境菌群，也是重要的条件致病菌，可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染及败血

13、症。本属细菌有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，在麦康凯平板上形成红色较大的菌落。肠杆菌属生化特性为：AA，IMViC，鸟氨酸、精氨酸双水解酶均，赖氨酸脱羧酶，动力，脲酶不同种间各有差异。常见菌种间鉴别见表10-6。表10-6 肠杆菌属常见菌种间鉴别（阳性）产气肠杆菌阴沟肠杆菌日勾维肠杆菌阪崎肠杆菌52651精氨酸9155蔗糖卫矛醇15山梨醇棉子糖蜜二糖肌醇75（七）枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属包括3个菌种，即弗劳地枸橼酸杆菌、异型枸橼酸杆菌、无丙二酸盐枸橼酸杆菌及其丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物1群。枸橼酸杆菌属为人和动物肠道正常菌群，为条件致病菌，能引起腹泻和败血症、脑膜炎、脑脓肿等肠道外感染。兼性

14、厌氧，在营养琼脂和血琼脂生长良好，在MAC、EMB、SS琼脂平板上呈乳糖发酵型菌落。弗劳地枸橼酸杆菌可产生H2S，在SS和HE琼脂上形成有黑色中心的菌落。枸橼酸杆菌属的生化特性为：A/KA，动力，脲酶/，IMViC/，精氨酸脱羧酶，赖氨酸脱羧酶。种间鉴别见表10-7。表10-7 枸橼酸杆菌属种间鉴别弗劳地枸橼酸杆菌异型无丙二酸盐无丙生物群dH2S（）KCN中生长丙二酸盐利用（）侧金盏花醇发酵棉子糖发酵蜜二糖发酵90以上菌株阳性；90以上菌株阴性；（）：7689阳性；（）：7689阴性；d：2675阳性（八）沙雷菌属沙雷菌属包括8个种，即粘质沙雷菌、沙雷菌液化群、臭味沙雷菌、普城沙雷菌、深红沙雷

15、菌、无花果沙雷菌、嗜虫沙雷菌、居泉沙雷菌。其中的粘质沙雷菌是重要条件致病菌。本属代表种粘质沙雷菌有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌氧，室温下可产生粉色或红色。粘质沙雷菌生化特性为：KA，IMViC，动力，鸟氨酸与赖氨酸脱羧酶、明胶酶、脂酶、DNA酶均。DNA酶阳性为本菌与其他相似菌鉴别的重要项目。常见菌种间鉴别见表10-8。表10-8 沙雷菌属常见菌种间鉴别（阳性）粘质沙雷菌粘质沙雷菌生物群液化沙雷菌深红沙雷菌DAN酶8285脂酶明胶酶（22）L阿拉伯糖D阿拉伯醇D山梨醇92红色色素有无（九）多源菌属、哈夫尼亚菌属多源菌属包括2个种，即聚团多源菌和弥散多源菌。多源菌属有动力，无芽胞，无荚膜。兼性厌

16、氧，营养要求不高，在血平板上形成较大、黄色、不溶血的菌落。多源菌属主要生化特性为KIA：AA，甘露醇，阿东醇，动力，鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶均。聚团多源菌和弥散多源菌间可用水杨苷试验鉴别，前者为，后者为。哈夫尼亚菌属分为蜂房哈夫尼亚菌及蜂房哈夫尼亚菌生物群。蜂房哈夫尼亚菌有动力，无芽胞，无荚膜。哈夫尼亚菌属KIA：AA，甲基红试验35时，25时，V-P试验35时，25时，鸟氨酸与赖氨酸脱羧酶，吲哚、脲酶、DNA酶均为。蜂房哈夫尼亚菌和蜂房哈夫尼亚菌群可通过发酵麦芽糖、木糖试验鉴别，前者均为，后者均为。（十）变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属变形杆菌属包括4个种，即普通变形杆

17、菌、奇异变形杆菌、产粘变形杆菌和潘氏变形杆菌。本菌属呈多形性，有周身鞭毛，运动活泼，无芽胞，无荚膜。在普通营养琼脂和血琼脂平板上，普通变形杆菌和奇异变形杆菌多可迁徙生长。在肠道选择鉴别培养基上可形成圆形、扁平、无色透明、乳糖不发酵的菌落，产硫化氢的菌株在SS培养基上菌落中心可呈黑色。抗原种类多样，变形杆菌某些X菌株的OX19、OX2、OXk抗原与立克次体有共同抗原。临床上用这些X菌株代替立克次体抗原与患者血清做定量凝集试验，辅助诊断立克次体病，称外斐试验。变形杆菌属的生化特性为KIA：KA，苯丙氨酸脱氨酶，能迅速分解尿素，IMViC/。本属代表种普通变形杆菌和奇异变形杆菌的区别为前者吲哚、鸟氨

18、酸，后者则相反。菌种间的具体鉴别见表10-9。变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属共同特征为苯丙氨酸脱氨酶阳性，不发酵乳糖，其鉴别见表10-10。表10-9 变形杆菌属种间鉴别奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌普通变形杆菌生物2群生物3群七叶苷水解麦芽糖发酵木糖发酵水杨苷水解氯霉素敏感性SRVS：敏感；R：耐药；V：不定表10-10 变形杆菌属与相似菌属的鉴别变形杆菌属普罗威登斯菌属摩根菌属迁徙生长明胶液化西蒙枸橼酸盐2575阳性普罗威登斯菌属包括5个种：产碱普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌、雷氏普罗威登斯菌、海氏普罗威登斯菌和拉氏普罗威登斯菌。普罗威登斯菌属形态染色、培养、生化反应特征与变形

19、杆菌属相似，但无迁徙现象，脲酶（雷氏除外），H2S。在血平板上形成中等大小、湿润、灰白菌落；在MAC上为无色透明菌落。本属菌与摩根菌属的区别在于枸橼酸盐、鸟氨酸脱羧酶，而后者结果相反。其种间鉴别见表10-11。普罗威登斯菌属与相似菌属的鉴别见表10-10。表10-11 普罗威登斯菌属的种间鉴别产碱普罗威登斯菌拉氏普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌D侧金盏花醇阿拉伯糖海藻糖半乳糖摩根菌属只有摩根摩根菌1个种。摩根摩根菌的形态染色和生化反应特征与变形杆菌相似，但无迁徙现象，H2S-。摩根摩根菌与尿路感染、伤口感染及腹泻有关，为医院感染主要病原菌之一。摩根菌属与相似菌属的鉴别见表10-10

20、。（十一）耶尔森菌属耶尔森菌属有11个菌种，其中与人类疾病密切相关的有3个菌种，即鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌，他们都是人兽共患病原菌。1鼠疫耶尔森菌鼠疫耶尔森菌是甲类烈性传染病鼠疫的病原菌，俗称鼠疫杆菌。鼠疫耶尔森菌为革兰阴性球杆菌，两极浓染，有荚膜，无芽胞，无鞭毛。兼性厌氧，最适温度为2730，在普通培养基上可生长。在血琼脂上形成柔软、粘稠的粗糙菌落。在肉汤培养基中48h后逐渐形成菌膜，稍加摇动后菌膜呈钟乳石状下垂。鼠疫耶尔森菌的生物学特征为分解葡萄糖产酸不产气，对大多数糖不分解；IMViC；动力、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、苯丙氨酸脱氨酶、脲酶、硫化氢均为；不液化明胶

21、，当穿刺培养时，培养物表面呈膜状，细菌沿穿刺线呈纵树状发育。与其他种间的鉴别见表10-12。鼠疫耶尔森菌小肠结肠耶尔森菌假结核耶尔森菌25动力鼠李糖纤维二糖2675阳性；ND：无资料表10-12 耶尔森菌属种间鉴别因鼠疫为法定甲类烈性传染病，标本采集时应严格按操作规程进行，疑似标本须送指定部门进行鉴定，并报告本地区疾病控制中心。2小肠结肠炎耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌可寄居在多种动物体内，人类经粪-口途径或因直接接触而感染，多表现为小肠炎和结肠炎，症状与菌痢和阑尾炎相似。小肠结肠炎耶尔森菌中某些血清型引起的肠道感染有上升趋势。小肠结肠炎耶尔森菌为革兰阴性球杆菌，无芽胞，无荚膜，有周鞭毛。兼性厌氧，440均能生长，最适温度为2028。在普通营养琼脂上生长良好，在肠道培养基（如MAC）和新耶尔森菌选择性琼脂（NYE）上呈无色、半透明、扁平较小的菌落。小肠结肠炎耶尔森菌生化反应特征为：嗜冷性，在4增菌3周可分离纯化；2225时有动力，37时无动力；脲酶，VP试验2225时，3537时，鸟氨酸脱羧酶。人生中最幸福的就是身体健康