糖化血红蛋白论述.ppt

1、HbAHbA1c1c检测及标准化检测及标准化 HbA1c 与糖尿病与糖尿病糖尿病诊疗指南糖尿病诊疗指南HbA1c检测检测HbA1c检测标准化进程检测标准化进程我国我国HbA1c检测现状及标准化检测现状及标准化结结内容：糖尿病的流行病学据国际糖尿病联盟（IDF）统计，2000年全球DM为1.51亿，2011年达2.85亿，预计2030年达5亿。中华医学会糖尿病学分会（CDS）调查显示：20岁以上人群中糖尿病患病率为9.7%，糖尿病前期更高达15.5%（1/4高血糖状态）。我国60.7%糖尿病患者未被诊断而无法及早治疗。中国中国2型糖尿病防治指南（型糖尿病防治指南（2010年版）年版）糖尿病的危害

2、*肾衰*致盲心血管疾病发生风险增加2-4倍预期寿命减少5-10年糖糖 尿尿 病病*截肢第3位致死原因60%-70%的患者存在神经损害糖化血红蛋白糖化血红蛋白葡萄糖葡萄糖G-6-P果糖果糖血红血红蛋白蛋白血红血红蛋白蛋白糖糖糖化血红蛋白和HbA1c糖化血红蛋白（糖化血红蛋白（GHb）：）：血红蛋白氨基酸残基与糖的氨基化合而血红蛋白氨基酸残基与糖的氨基化合而成成的的产物产物。HbA1c：血红蛋白两条：血红蛋白两条链链N端的缬氨酸残基与葡端的缬氨酸残基与葡萄糖的氨基化合而成萄糖的氨基化合而成的的产物产物。HbA1c糖糖糖糖血红蛋白及糖化血红蛋白的种类糖糖糖化HbAHbA两条两条链链两条两条链链+1,

3、6 二磷酸果糖二磷酸果糖+6 磷酸果糖磷酸果糖+丙酮酸丙酮酸+葡萄糖葡萄糖HbA1a1HbA1a2HbA1bHbA1cHbA0在在HbA1中主要的成分是中主要的成分是HbA1c，约占，约占60%糖化血红蛋白的术语应为糖化血红蛋白的术语应为HbA1c，可缩写为可缩写为A1CHbA1HbA1c的形成过程Amadori 缓慢的缓慢的非酶促的非酶促的不可逆的不可逆的n2 2糖化血红蛋白比例高低的决定因素：糖化血红蛋白比例高低的决定因素：血糖浓度血糖浓度 血糖与血红蛋白的接触时间血糖与血红蛋白的接触时间 红细胞的存活时间红细胞的存活时间HbA1c形成的影响因素 HbA1c 与糖尿病（Diabetes C

4、ontrol and Complications Trial）试验简介：试验简介：在美国和加拿大以1441名1型糖尿病 患者为对象（29家医疗机构），分为2组治疗，一组是传统治疗法，一组为强化胰岛素疗法，进行了9年的跟踪调查。结结 论：论：进行严格的血糖管理，可以有效地控制糖尿病并发症的发生和发展。DCCT研究研究（1984-1993）当当HbA1c测定值降低测定值降低1%：1.1.使糖尿病相关并发症发生的风险降低使糖尿病相关并发症发生的风险降低21%21%，2.2.相关死亡降低相关死亡降低25%25%，3.3.患者总死亡率降低患者总死亡率降低17%17%；4.4.患者心肌梗死的风险降低患者心

5、肌梗死的风险降低18%18%，5.5.脑卒中风险降低脑卒中风险降低15%15%，6.6.眼和肾继发性疾病的风险降低眼和肾继发性疾病的风险降低35%35%。血糖血糖糖化血红蛋白糖化血红蛋白采血时的血糖值采血时的血糖值血红蛋白的寿命血红蛋白的寿命120天天2-3个月的平均血糖值个月的平均血糖值反映血糖期间反映血糖期间现在现在过去过去HbA1c在糖尿病中的作用在糖尿病中的作用监测监测23个月血糖控制的总体水平个月血糖控制的总体水平平均血糖估计值平均血糖估计值=30=30.9HbA9HbA1c1c值值-60.6-60.6DCCTDCCT：临床意义临床意义：ADA建议建议HbA1c 控制目标是控制目标是

6、0.5%,临床有意义的变化 指导临床医生药物的选择指导临床医生药物的选择不同的不同的HbA1c水平水平,空腹和餐后血糖对空腹和餐后血糖对HbA1c影响不同。影响不同。餐后血糖餐后血糖空腹血糖空腹血糖HbA1c糖尿病与糖尿病与HbA1c糖尿病诊疗指南糖尿病诊疗指南HbA1c检测检测HbA1c检测标准化进程检测标准化进程我国我国HbA1c检测现状及标准化检测现状及标准化小结小结内容ADA、EASD、IDF专家委员会2008共识共识糖尿病的诊断标准20082010年ADA糖尿病诊治指南增加糖化血红蛋白（增加糖化血红蛋白（HbA1c)6.5%作作为糖尿病的诊断标准为糖尿病的诊断标准source：www

7、.care.diabetesjournals.org2011年-WHO同意将HbA1c作为糖尿病辅助诊断指标HbA1c从治疗监控转型为诊断指标从治疗监控转型为诊断指标中国糖尿病诊治指南采用采用WHO（1999）诊断标准诊断标准因HbA1c 6.5 的切点是否适合我国人群尚未在我国人群中验证，且我国HbA1c检测方法的标准化程度不够，测定的仪器和质量控制尚不能符合目前糖尿病诊断标准的要求，因此目前暂不推荐应用HbA1c诊断糖尿病 -中国血糖监测临床应用指南（年版）中国血糖监测临床应用指南-2011中国成人中国成人2型糖尿病型糖尿病HbA1c控制目标的专家共识控制目标的专家共识（2010年）年）虽

8、然目前虽然目前HbA1c尚未纳入尚未纳入中国糖尿病中国糖尿病诊疗指南诊疗指南中，但中，但HbA1c在治疗中的重在治疗中的重要性日益彰显。要性日益彰显。糖尿病与糖尿病与HbA1c糖尿病诊疗指南糖尿病诊疗指南HbA1c检测检测HbA1c检测标准化进程检测标准化进程我国我国HbA1c检测现状及标准化检测现状及标准化小结小结内容HbA1c的检测方法的检测方法HbA1c的检测方法的检测方法方法学方法学原原 理理检测物质检测物质厂家厂家亲和层析法所有糖化血红蛋白与硼酸结合而非糖化的即被洗脱GHbPrimus(普莱默斯）离子交换色谱法HbA1c与HbA所带电荷不同HbA1a,HbA1b,HbA1cBio-R

9、ad(伯乐）Tosoh(东曹）Arkray(爱科来）酶 法酶 法HbA1c积水科华免疫法免疫比浊法HbA1cRoche(罗氏)电泳法HbA1C与HbA所带电荷不同HbA1a,HbA1b,HbA1c离子交换离子交换HPLCHPLC法法-ADA-ADA推荐参考方法推荐参考方法厂家厂家仪器仪器/试剂试剂最快检测速度最快检测速度Bio-Rad（伯乐）（伯乐）D-10Variant IIVariant II TURBO20/h17/h37/hSysmex/Tosoh（东曹）（东曹）G7G847/h55/hArkray（爱科来）（爱科来）ADAMS HA-8160ADAMS HA-818040/h74/h

10、 非糖化血红蛋白非糖化血红蛋白（HbA0)链链N-端带正电端带正电荷荷 当被糖基化当被糖基化(HbA1c），），正电荷减少正电荷减少Val His Leu ThrGlucVal His Leu Thr+HbA1HbA0离子交换离子交换 HPLC 洗脱原理：按照电荷差异性离子交换离子交换 HPLCHPLC 洗脱原理洗脱原理：按照电荷差异性：按照电荷差异性HisLeuThrValHbA1B-chain?ValHisLeuThrValHisLeuThrHbA1A1-chainHbA1A2-chainFruG6ValHisLeuThrHbA0-chainValHisLeuThrGlucHbA1C-ch

11、ainHbF慢快亲和层析法亲和层析法厂家厂家仪器仪器/试剂试剂最快检测速度最快检测速度Primus（普莱默斯）PDQ PDQ plus25/hUltra225/hVal His LeuThrGlucNHBOHOHOHOO 亲和层析法检测的是总糖化血红蛋白（GHb),包括HbA1c和在其他位点被糖基化的血红蛋白。Val His Leu Thr固相(苯基硼酸柱)亲和层析图谱亲和层析图谱 亲和层析法检测原理亲和层析法检测原理检测总糖化血红蛋白（GHb）酶法酶法厂家厂家仪器仪器/试剂试剂积水医疗积水医疗科华科华全自动生化分析仪使用酶法检测原理（积水医疗）酶法检测原理（积水医疗）蛋白酶酶切 ValHis

12、LeuThrProGluGluLys SerGlucose第一步：第一步：Hb 浓度测定浓度测定第二步：第二步：HbA1c 浓度测定浓度测定果糖基肽氧化酶（FPOX）H2O2过氧化氢酶（POD)显色剂显显 色色需要采集血球标本再进行溶血处理需要采集血球标本再进行溶血处理半自动操作，速度慢半自动操作，速度慢全血直接检测全血直接检测比色法检测比色法检测Hb免疫竞争抑制法检测免疫竞争抑制法检测HbA1c检测的高特异性和精确性，检测检测的高特异性和精确性，检测IFCC参考系统定义的真正的参考系统定义的真正的HbA1c.HbAHbA1c1c-peptide-peptideGlcValHisLeuThrP

13、roGlu抗体识别抗体识别 免疫法免疫法反应原理ReactionkineticsofthetwintestmodeonINTEGRAandcobascsystemswithTina-quantHbA1creagents“双胞试验双胞试验”，同一比色杯同，同一比色杯同时检测时检测Hb和HbA1c，计算或转计算或转换为换为NGSP或或IFCC数值提高精密度优化通量免疫法原理免疫法原理检测技术电泳法电泳法原理原理 各种蛋白质都有其等电点，蛋白质在一定条件下带有不同电荷，在电场中泳动不同 优点优点：干扰少不足不足：1.需成批进行，无法进行实时检测，速度比较慢2.自动化程度低，急诊插入、自动维护等功能比

14、较欠缺。3.商品化产品少，用于科研。商品化产品少，用于科研。HbA0 HbA1c cHbA1a HbA1b b+-影响影响HbA1c测定结果的因素测定结果的因素40HbA1c的测定结果取决于血糖水平的测定结果取决于血糖水平Tahara Y et al.Diabetes Care,1993,16(9):1313-1314.Fitzgibbons,et al.J Clin Invest,1976,41:820-824.41数学模型预测和体内研究证实：近期血糖对糖化血红蛋白值的影响最大50%75%3266311时间（天）HbA1c变化比例（%）等共10个符号代表10个患者糖化血红蛋白水平反映的是在检

15、测前120天内的平均血糖水平，HbA1c的测定结果取决于血糖水平HbA1c与空腹血糖及餐后血糖有很好线性相关与空腹血糖及餐后血糖有很好线性相关Ito C,et al.Diabetes Research and Clinical Practice,2000,50:225-230.42OGTT研究中HbA1c与FPG的相关性（60岁以下年龄组）OGTT研究中HbA1c与2h-PG的相关性（60岁以下年龄组）HbA1c随年龄而变化随年龄而变化目前目前HbA1c未因年龄差异制定不同的控制目标未因年龄差异制定不同的控制目标Pani LN，et al.Diabetes Care，2008，31：1991-

16、1996.43：所有个体：女性：男性 年龄（岁）年龄每增加1岁，HbA1c将增加0.012%FOS非糖尿病人群P0.0001年龄（岁）NHANES非糖尿病人群年龄每增加1岁，HbA1c将增加0.010%P0.0001年龄（岁）FOS中NGT人群P 2.15;女性 2.07)；对照组：Quintile 1（低HbA1c）社会经济状况和心理状态社会经济状况和心理状态自我控制能力低、合作能力差、社会支持少的人自我控制能力低、合作能力差、社会支持少的人HbA1c水平较高水平较高Daniel M，et al.Prev Med，1999，29（5）：405-413.Feldman PJ，Steptoe A.Health Psychol，2003，22（4）：398-405.48男性女性高层中层基层HbA1c（%）Pamela等研究：纳入等研究：纳入234名英国公务员，研究名英国公务员，研究社会经济地位和社会心理因素对社会经济地位和社会心理因素对HbA1c的影响的影响职业级别土著非土著非糖尿病土著 非土著土著 非土著糖耐量受损糖尿病Daniel等多元分层分析：研究社会变化、较低等多元分层分析：研究社