药典培训纯化水医疗器械法规.docx

1、药典培训纯化水医疗器械法规 问答1、 供试品传入无菌，对表面进行消毒。用75%无菌酒精浸泡表面是否可行？可用如何方法。（等紫外照射1h+酒精喷射，是否可行？注：无缓冲间的情况。从一般区直接进入传递窗）答： 用75%无菌酒精浸泡表面应该可行，但酒精易燃。 可用普通消毒剂如新洁尔灭等消毒。2、 无菌实验供试品在传入无菌传递窗前能否泡消毒液？ 答：视包装而定。如：玻璃安瓿，可以；西林瓶，不可以。3、 检验针剂时，安瓿表面消毒可否用碘液浸泡作为消毒，如果可以，它会杀死样品本身的微生物吗？答： 我们没有碘液浸泡消毒的经验。 就浸泡方式而言，视包装而定，如：玻璃安瓿，可以；西林瓶，不可以。4、 微生物检查

2、样品传递消毒处理，需作验证吗?如何确定其消毒效果？ 答：验证当然最好，但也应结合常识、经验等，尽量减低工作量。5、 药典要求只要供试品的特性允许优先考虑薄膜过滤法。对于小剂量无抑菌作用的注射剂，是直接接种法好还是薄膜过滤法好？答：优先考虑薄膜过滤法，可视样品包装情况而定。6、无菌检查验证，2010年版方法改变，变换了大肠埃希杆菌，请问从前经过验证的无菌检查方法，实施2010年药典时是否必须从新的验证方法进行验证？验证后从能进行无菌检查？ 答：应重新验证。8、无菌制剂的处方与工艺都没有改变，10版药典出版是否还需重新验证？ 答：10版用大肠埃希替代铜绿假单胞，应重新验证。9、05版我们已经做了方

3、法验证，10版还要再做方法验证吗？答：如前所述。10、做阳性对照，为什么同是做5批检样，到最后只是两到三批长菌？原因出在哪？滤膜吗？（我们是做抗菌素的产品） 答：原因是多方面的。请考虑方法的耐用性；此外，操作前后是否一致（比如：供试品溶液溶解是否彻底、供试品溶液的浓度是否一致、对滤膜滤筒的湿润、每次过滤对滤筒的荡洗、抽干、抽干是否过久等等）等等都有可能是影响因素。11、清洁无菌室所用消毒液如何做到无菌拖把、拖桶如何做到无菌？答：消毒液可采用过滤的方法。无菌拖把、拖桶可采用浸泡、高温灭菌的方法。12、微生物的操作记录，可否直接用电子版进行记录。也就是将操作结果及过程记录在电子系统内？如细菌培养时

4、间为72小时，在操作规程上可否写成为722小时。生产企业可否将有菌种的检查项目，如方法学验证、培养基适用性检查委托有资格的单位检验？ 答：可直接用电子版进行记录。 细菌培养时间为72小时，建议在操作规程上写成为72小时。 生产企业应该可将有菌种的检查项目，如方法学验证、培养基适用性检查委托有资质的单位检验。13、高压消毒炉的培训一般在哪里有举行？答：广州：特种设备培训机构锅炉所 14、化妆品微控的容器洗涤一般用什么洗涤较好？ 答：表面活性剂15、贵所日常所用的消毒液是哪些？ 答：新洁尔灭、消毒粉、75%酒精、来苏儿。16、消毒液本来就是用来消毒杀菌的，又怎么会存在消毒液是否无菌这一说法？ 答：

5、消毒液不是万能的，对绝大对数菌有效，不排除对有些微生物无效。 有些消毒剂质量难保证，如果有效成分浓度过低甚至无，则达不到灭菌效果。17、能否直接用电磁炉煮培养基（加热）？最佳加热方法是？ 答：电磁炉不能加热玻璃瓶。我们所：水浴（100），微波炉。 18、硫乙醇酸盐流体培养基培养后会有点浑浊（排除是菌生长），是否可以在灭菌之前过滤培养基? 答：找出培养基混浊的原因，若是培养基与样品发生作用导致的混浊，灭菌之前过滤培养基也是没用的。硫乙醇酸盐流体培养基含琼脂，如果用滤膜，一般很难过滤；如果用纱布、棉花、滤纸等，则须考虑滤材对不同成分的吸附程度不同，可能造成培养基成分比例的改变。19、方法验证时：对

6、照加的菌液是最后才加吗？ 答：按药典，在最后一次冲洗液中加入。20、培养基适用性检查无菌性检查中“每批培养基随机取不少于5支（瓶）中”中“每批”指脱水商品培养基的生产批次，还是指制备的批次？ 答：指制备批次的培养基。21、微生物检验用的各种试剂除了化学纯，能否使用分析纯？答：可以。22、生物安全柜，净化操作台每年是否需要检定？ 答：是的，我所是每年检定一次。并定期检测洁净度，频次自己制订。23、无菌操作时，对显微镜硬件条件的需求是怎样？ 答：显微镜：至少1000X，也就说要有油镜。24、生产原料药的公司，其微生物检测方法采用限度检查法，请问洁净室的划分中还需要建立“无菌检查室”吗？ 答：只要满

7、足药典规定的万级背景下的局部百级即可。25、阳性接种室，有没有硬性要求在万级区域局部百级区域？答：无硬性要求。但应使用生物安全柜，并按生物安全柜的要求设置外围空间。26、 阳性操作间的空调系统是否应与微生物限度检查的空调系统完全分开，若未分开，是否可以采取直排的方式？（不利用阳性间的空调回风） 答：应分开。直排不等于分开。27、微生物限度实验室和阳性对照室的洁净系统要分别独立，如用同一套的HVAC，但都是全排，是否能接受？ 答：应分开。直排不等于分开。28、微生物与无菌洁净系统也一定分别设置吗？ 答：有条件最好将微生物限度检查与无菌检查洁净系统分开。29、洁净区监控中，某些设备不宜采用冲淋法和

8、接触碟法取样，而擦拭法中棉签释放率很低（普通棉签释放率只有20%左右）。请问如何设计采样方法才能真实反映设备表面微生物情况？ 答：有些国外生产微生物检验仪器的大公司，有专用的小拭子，可能更有效。30、用洁净服材质做成袋子来代替牛皮纸的包扎灭菌是否可行？答：我们所目前采用此法。31、环境监测用平皿预培养温度和时间?答：30-35，时间不少于48h 32、灵敏度检测如何确定接种菌数量？ 答：菌液在接种至灵敏度检测用培养基的同时用微生物限度检查法的平皿法测定每1ml菌液的cfu。33、如何验证消毒剂消毒效果？ 答：目前没有统一的方法，自行设计。34、消毒剂消毒效果如何验证？如何设定SAL接受标准？

9、答：目前没有统一的方法，自行设计。35、验证试验中，若供试品需加入-内酰胺酶，那么阳性对照管是否应该加入等量-内酰胺酶？ 答：验证试验时，不加，因为对照管是用于比较试验菌生长情况的。 检验时的阳性对照则加。 36、全封闭式无菌验证中，用0.9%Nacl溶液溶解后，抽入集菌器中，样品溶液是否要停留几秒钟？让样品与滤膜充分接触或者停留后溶液造成抗生素残角？如何停留几秒钟？应在100ml试停留还是50ml时停留合适？ 答：不应停留，应让样品尽快通过，避免抑菌成分被吸附。薄膜过滤法的目的是仅让微生物截留在滤膜上。37、每张滤膜每次冲洗量一般100ml，总冲洗量不得超过1000ml，若供试品容量较大，总

10、供试品样品量按标准规定超过1000ml，那这种情况应如何看待呢？ 答：中国药典未规定供试品溶液的体积，设计检验方法时，兼顾供试品溶液的浓度和体积，尽量采用较小的体积。38、装消毒剂的容器是否要求灭菌？例如用可灭菌的不锈钢材质，因为塑料的容器不能灭菌问题。 答：应该灭菌39、配制用水最长可以放置多久？ 答：视放置条件，经验证，自己设定。40、对灭菌效果进行验证，多久进行一次？ 答：根据自己工作情况，自己制订。 41、微生物限度检查时所用吸管是否均需计量？ 答：无规定。42、无菌，微生物限度实验，样品与阳性对照可以共用一个培养箱吗？答：有2种意见：其一，条件许可，分开，以免污染；其二，共用一个培养

11、箱，使其在相同条件下培养。 我们：分开。43、在无菌检查项下，供试品检验时，阳性对照是否必须每批都需做？是否供试品无菌试验跟阳性对照必须同步操作？答：ChP要，同步。44、 生产企业一次生产80mg/瓶的冻干粉36000瓶，企业取20瓶做无菌检验，是否应另增加10瓶做阳性试验？（方法：薄膜过滤法，滤膜三分法，一份阳性，另两份置两种不同培养基中。答：是，总共需30瓶。45、 培养基灵敏度试验所用的菌种有6种，为什么没有大肠？答：有专家解释：因铜绿与大肠均为革兰氏阴性杆菌，而铜绿在医院及自然界中更广泛存在，致病性更强。46、 如果产品经无菌验证后，是以大肠为对照菌时，可行吗？答：如果验证6种菌均可

12、行，建议按药典阳性对照章节的要求，设定阳性对照菌。如果验证结果样品是抗革兰阴性菌的，则阳性菌应用大肠埃希菌。47、 灵敏度试验可要加入大肠？ 答：否。 48、 薄膜过滤法中，菌悬液的加入，在最后一次的冲洗液中加入小于100cfu的试验菌，过滤，这个说法用封闭式过滤器（）要如何做？如果做法是加入培养基后，再从管子里加1ml的100cfu的菌，可行吗？ 答：在最后一次冲洗液中，经封闭式过滤器顶部的透气孔加入1ml的少于100cfu的菌液，抽干，再加培养基。48、全封闭式无菌检验中，每张滤膜每次冲洗量一般为100ml，我们验证的是50ml*3+100ml*3，总冲洗量不超1000ml,可行吗？答：可

13、行。49、中国药典无菌检查方法验证中“菌种加在最后一次冲洗液中，过滤”，如果某供试品无菌检查方法无需进行冲洗，那么菌悬液应该加在哪合适？ 答：药典无规定，可在过滤完样品后直接加菌液，然后加入培养基。50、无菌验证后，试验菌数经测定，若加入菌数大于100cfu,该情况如何处理？是否需要判断其试验无效，重新验证 答：重新验证。51、南方天气湿度大，易发霉，毛巾或者衣服上可能有黑色的霉点洗不干净，请问有没有好的方法去除霉点？ 答：漂白、消毒。52、粉针注射剂，同一个品种有不同规格的产品，在建立方法学验证时是否每个规格都需要进行验证？ 答：理论上，以最大规格建立的方法应适用于其他较小规格。 但这样做可

14、能会提高成本，因小规格的冲洗量、灭活剂等用量可能可以更少，难以一概而论。53、无菌检查方法中阴性对照，每瓶溶剂，稀释液，冲洗液都需要收集，是不是每做一批试验，都需同时操作两台集菌仪？阴性对照能否每一批溶剂，稀释液，冲洗液抽一、两瓶做阴性对照？ 答：不一定每做一批试验，都需同时操作两台集菌仪。 阴性对照不应该仅仅每一批溶剂，稀释液，冲洗液抽一、两瓶做阴性对照，应尽可能将所用到的每瓶都留少量做阴性。54、每一张膜总冲洗量不得超过1000ml,这个总冲洗量包括样品溶液吗？ 答：不包括。55、无菌性检查，培养基是直接拿去培养，还是按照说明书灭菌处理后再拿去培养？ 答：成品培养基直接培养；脱水培养基或自

15、己配制的培养基灭菌后拿去培养。56、液体硫乙醇酸盐培养基（中检所）极易被氧化，药检所做实验时是将管装量定在多高？答：我们所用的是全封闭一次性滤筒，装量100ml，高度约6.5cm。57、如果培养过程氧化层高度已超过药典中要求的1/2高度，并发现其中长菌，结果如何判定？若未长菌，结果判定认为无菌是否成立？此类问题应该如何衡量？ 答：如果培养过程氧化层高度已超过药典中要求的1/2高度，并发现其中长菌，可判断为不合格； 若未长菌，按药典，结果判定认为无菌应不成立； 此类问题应该照药典执行，培养后不超过1/2高度。58、“无菌性检查中每批培养基随机取不少于5支（瓶）”,这句话中的“5支（瓶）”是5支或

16、5瓶，还是5支和5瓶？” 答：或59、洁净区与阳性实验室空调系统应如何分别设置？送风分离，回风分离，或两者均分离？即2套空调系统？答：2套系统互不相干。60、十四烷酸异丙酯若经验证后，不影响阳性菌生长，可否湿热灭菌？答：湿热灭菌的水蒸气可能会影响十四烷酸异丙酯的性能，建议按药典。61、冲洗液的滤清，加入不浑浊，是否可不用过滤？ 答：可62、无菌检查时，阳性对照的接种与培养是否也必须和供试品培养同一天进行？ 答：应同步操作。63、使用的消毒剂应无菌，比如购买的新洁而灭要用无菌的4.5微米滤膜过滤再用吗？ 答：如用在关键地方，建议过滤。64、产品稳定性考察，有无菌检查项目，请问留样产品的无菌检查的

17、数量和常规检查的数量要一样吗？如果是，留样量就会相当大，有的药品比较贵重，这样会造成企业较大的损失. 答：无菌检查的数量和常规检查的数量应一样。 按药典稳定性试验指导原则附表，该做就应做，但若情况特殊，或许可减低检验频次，但如此一来，可能一些药品注册审评专家或GMP检查员会有不同意见。稳定性试验的无菌检查很大程度是在考察包装。65、 做培养基适用性与方法验证时，若加菌量为100120cfu100cfu，是否需要重新做验证？ 答：要。66、 药典只是提供了化药中干扰物的中和剂方法，能否提供一些中成药的除菌方法？ 答：无67、洁净区污染霉菌怎么处理？ 答：可尝试甲醛熏蒸68、洁净区有霉菌生长，要怎

18、么净化环境？注：我们用75%的乙醇抹洗全部空间，然后开臭氧半小时，但是检测后还是发现有霉菌，老师是不是还有更好的方法？答：可尝试甲醛熏蒸69、老师说的酒精棉过一段时间会生长细菌，请问酒精棉保存期多久？ 答：未考察，我们使用期一般不超过一周。70、酒精棉怎样取样进行微生物检查？ 答：请自行设计71、酒精棉有规定超过多少的菌数不能再用？ 答：无规定。72、广州环凯有冻干菌粉卖，是否可以在其单位购买？答：建议向中检所购买。73、请问药典说“当产品的组分或原检验条件发生改变时，应对检验方法重新验证”，如何理解“原检验条件发生改变”答：比如，将冲洗量500ml改为300ml，等等。74、灵敏度检查：改良

19、马丁和硫乙醇酸性流体培养基都要做6种菌株吗？ 答：硫乙醇：4种，为金葡、铜绿、枯草、生孢； 马丁：2种，为百念、黑曲。75、清洁后的洁具需用微生物纯化水洗涤？ 答：清洁后的洁具需用纯化水洗涤。76、无菌：阳性对照培养4872小时就可以灭活了吗？不用跟供试品培养14天吗？答：是的77、供试品处理时，需加入适量的聚山梨酯80，聚山梨酯80需要灭菌吗？方法如何？ 答：需灭菌，可采用湿热灭菌。78、含0.05%（vv）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液如何配制？答：可直接用聚山梨酯80配制，或先配制聚山梨酯80的浓溶液，然后取浓溶液作进一步配制。79、如何证明“表面活性剂，中和剂或灭活剂使用应有效性

20、及对微生物无毒性”？答：自行设计80、抗生素效价室放在洁净室里面是否合适？ 答：应与洁净区分开。81、最后灭菌产品的原辅料是否需要做微生物限度检查？ 答；一般情况应做。82、薄膜过滤法若试验冲洗量1000ml阳性用量多少？答：也1000ml。83、无菌用培养基是否不用对照培养基？答：是84、无菌检查法从开始制样到加入培养基也不能超过1h吗？ 答：一般情况应该如此。85、薄膜过滤法滤膜若50mm，冲洗量是否需调整？如何调整？ 答：建议按药典规定，选用直径约50mm的滤膜。如要调整，即重新验证。86、阳性菌接种使用生物安全柜后，那接种室的空调系统能否与微生物限度检查室共用？如果现在共用了，有什么方

21、法能避免交叉污染？答：请掌握原则，净化系统应分开。 87、怎么消毒在试验中要用的无菌温度计？ 答：我们没有这方面的经验。88、发酵分装容器要预先灭菌，请问分装时是否有要求在无菌的环境下进行，分装后再进行灭菌，程序是否复杂化？答：我们不明白该问题，一般而言，既然容器要预先灭菌，分装也应无菌操作。89、无菌检查用的菌悬液是否必须用新鲜培养制备？用于制备菌悬液的培养物可否在25条件下连续使用一周？答：请按药典10版要求，否则，自己验证。90、灭菌锅压力表检定时，只检定了灭菌锅的温度是否可以？若只检压力呢?答：请咨询检定机构。91、薄膜过滤法检水验证？答：不明白问什么。92、洁净室的无菌采样区域是否相当预处理操作？答：不明白问什么。93、饮用水检测中GB标准中“总大肠菌群检出应进一步检验大肠埃希菌或耐热大肠菌群”，是否可以只做大肠埃希菌？答：我们目前尚未开展水质检验。