中药对抗再生障碍性贫血骨髓细胞凋亡的研究现状Word文档下载推荐.docx

1、凋亡的发生是基因的表达、蛋白质的合成和细胞内Ca2+浓度的增高等多种自主性生物行为,有不同的信号传导系统介导和参与,是由很多膜受体及胞浆蛋白参加的一系列分子事件致使的一种细胞主动自杀进程。大致进程是细胞整合各类胞内外凋亡信号,通过细胞凋亡信号与其受体形成的复合物经胞浆信号蛋白传递至一组细胞凋亡的执行者caspases,在由激活的caspases对其特异性底物进行降解,最终致使细胞凋亡。在整个细胞凋亡进程中,信号传递、中央调控和结构改变是其发生和进展的三大时期,其中信号传递是凋亡发生的关键。它是指内源或外源信号经胞膜、胞浆传至胞核引发基因及蛋白转变的进程。细胞凋亡信号传导途径大致有3条：通过Fa

2、s（CD95）及其配体（FasL）启动上游再活化下游致使细胞凋亡；通过线粒体途径。致凋亡因素作用于线粒体,使其膜电位改变,从而功能发生转变致使细胞凋亡；既有Fas/FasL又有线粒体一起参与,二者在多个位点上彼此交织、互为结果,使凋亡效应实现自我放大6。可见,在凋亡的细胞传导进程中Fas/FasL系统起着超级重要的作用。 再障患者T淋巴细胞处于激活状态,同时分泌功能失调,产生过量的造血负调控因子,从而表现出明显的造血抑制活性。正常情形下,激活的T淋巴细胞可在多种情形下发生凋亡,但有一种特殊的凋亡形式,称为激活诱导的细胞死亡（activation induced cell death,AICD）

3、,即当T淋巴细胞的表面分子TCR/CD3被激活后,假设其再次受到刺激时,即可发生AICD。AICD要紧通过Fas抗原与其配体FasL参与免疫反映进程中淋巴细胞数量的调控7,淋巴细胞被抗原激活后也开始表达FasL,而Fas在成熟T淋巴细胞中就有基础表达,在激活的T淋巴细胞中表达增加。Fas和FasL的同时表达使激活的T淋巴细胞在其发挥功能后当即凋亡,从而幸免对机体的损伤。但是,再障患者处于激活的T淋巴细胞Fas表达明显下降,致使激活后的T淋巴细胞不能当即凋亡,致使对机体正常造血细胞的损伤。同时研究亦证明,再障患者骨髓CD 34细胞表面Fas表达过度,与再障患者活化的T淋巴细胞中高表达的FasL结

4、合,从而启动CD 34细胞凋亡,引发造血衰竭。2 实验研究 甘草酸 甘草酸是甘草的要紧成份, 分子结构中含1分子甘草次酸和2分子葡萄糖醛酸。由于甘草酸在结构上与糖皮质激素相似,在体内可延缓皮质激素的代谢,且对下丘脑-垂体-肾上腺轴无明显阻碍,故作为皮质激素的替代医治,目前已用于自身免疫疾病的医治。体外研究说明, 甘草酸可显著抑制抗原对T细胞的过度激活作用及由TNF-介导的细胞毒作用, 从而调剂免疫反映；调剂T细胞释放细胞因子,使Th1/Th2维持平稳。 研究说明,甘草酸可阻止Fas抗体介导的细胞凋亡,而再障的发病机制与Fas介导的造血干细胞凋亡有关8-13。因此,为甘草酸应用于再障的实验研究提

5、供了思路。任氏等14通过免疫诱导小鼠产生再障模型,再采纳不同剂量甘草酸医治,观看甘草酸对免疫诱导再障小鼠骨髓造血功能的阻碍,结果说明,甘草酸可增进免疫诱导再障小鼠骨髓造血功能恢复,且具有剂量-效应关系。 三七皂苷 三七皂苷是中药三七的要紧活性成份,能够刺激人骨髓红系、粒系造血祖细胞增殖和分化15,改善再生障碍性贫血小鼠的骨髓抑制并增进造血细胞增殖等16。王氏等17报导,在体外通过诱导红系、粒系分泌造血调剂因子,间接地增进血细胞生成；邹氏等18报导,可明显地对抗Co射线照射小鼠的实验性骨髓抑制。三七皂苷不但增进CD34+造血干细胞增殖,使CFU-Mix集落形成增加,而且能够诱导CD34+细胞向粒

6、系细胞定向分化19。盖氏等20报导,还能够改善免疫介导性再障小鼠骨髓的抑制,升高外周血白细胞。 陈氏等21用三七皂苷处置粒系HL-60、红系K56二、巨核系CHRF-288和Meg-01共4种细胞株后,提取胞浆蛋白和核蛋白,观看Daxx、Fas、NF-kb和c-Rel蛋白的表达水平,结果发觉,三七皂苷某种程度上能够通过抑制Daxx、Fas蛋白表达,而相应减少细胞凋亡；同时也能通过增加NF-B和c-Rel蛋白表达增进细胞增殖,并阻止半胱天冬酶连锁链的活化而抑制造血细胞凋亡,为应用于临床医治凋亡过度的疾病（如再障）提供了可能性。 中药复方 何氏等22研究扶正养营颗粒对免疫介导再障小鼠的作用机制,检

7、测各组小鼠造血细胞凋亡和相关调控蛋白Fas与Caspase-3的表达。研究说明,扶正养营颗粒能下调造血细胞表面基因蛋白Fas,并可抑制细胞凋亡进程中激活的关键激酶Caspase-3的活性,从而减少骨髓造血细胞凋亡的发生,改善骨髓造血功能,起到医治慢性再障的作用。 刘氏等23观看炙甘草汤对再障模型小鼠骨髓造血细胞Caspease-3和人抗增殖细胞核抗原Ki-67的阻碍。结果发觉,经炙甘草汤医治的再障小鼠比模型组的再障小鼠Caspease-3明显降低,Ki-67表达明显升高,但各项指标在阳性对照药物康力龙的医治组中无明显不同。说明炙甘草汤对再障小鼠造血细胞具有明显的爱惜和修复作用,对抑制细胞凋亡和

8、增进细胞增生也有必然的作用。3 临床研究 毕氏等24用补肾活血通络为主的愈障口服液医治儿童慢性再障,观看临床疗效及医治前后骨髓CD34+细胞原位凋亡情形。研究结果说明,医治组骨髓CD34+细胞的凋亡率较医治前明显降低,与对照组医治后比较,不同有超级显著性意义（P<。其作用机制可能是通过调剂机体免疫功能,改善骨髓微环境或直接作用于骨髓CD34+细胞,抑制促凋亡因素或增加抗凋亡因素,以达到对儿童CAA骨髓CD34+细胞的调剂、操纵,从而使CAA患儿的骨髓造血功能重建。 刘氏等25以补肾活血通络法医治再障,检测医治前后再障患者T淋巴细胞亚群及血浆sFas、sFasL水平。结果说明,医治前2组患

9、者CD8细胞明显高于正常值,CD4/CD8比值明显低于正常值,医治后医治组CD8的下降程度和CD4/CD8的比值升高程度均较对照组显著（P&；医治前2组患者血浆sFas水平比健康组明显减低（P&,经补肾活血通络法医治后,医治组sFas水平较医治前及对照组均明显增高（P&据此推测,补肾活血通络法医治CAA的作用机制可能是通过调整机体免疫功能,升高sFas水平,进而与Fas分子竞争结合FasL,阻断Fas介导的细胞凋亡。 孙氏等26用补髓生血颗粒医治再障并检测医治前后骨髓造血细胞凋亡阳性指数及Bax基因表达阳性指数,结果说明,慢性再障患者骨髓细胞凋亡阳性指数及Bax基因表达阳性指数明显高于正常组,

10、说明慢性再障患者骨髓造血细胞确实存在过度凋亡现象。经补髓生血颗粒医治2个疗程后,肾阳虚型和肾阴虚型的细胞凋亡阳性指数和Bax基因表达阳性指数均较疗前明显下降,其中肾阳虚型患者细胞凋亡阳性指数趋于正常,但Bax基因表达水平仍高于正常组；肾阴虚型患者细胞凋亡阳性指数仍高于正常组,Bax水平亦高于正常。补髓生血颗粒对慢性再障患者有抑制造血细胞凋亡和下调Bax基因表达水平的作用,但这两种作用并非平行,说明降低Bax基因表达水平只是其抑制造血细胞过度凋亡的机制之一,Bax基因表达水平在医治后仍难以降至正常,这可能是慢性再障难以根治的缘故之一。 唐氏等27用参麦注射液联合SSL方案医治CCA总有效率为%,

11、较对照组明显提高（P&CCA患者血清TNF-浓度、骨髓CD34+细胞凋亡率明显较健康人高（P&经参麦注射液联合SSL方案医治后,CAA患者血清TNF-浓度、骨髓CD34+细胞凋亡率明显降低,与对照组比较有显著不同（P&本研究说明,参麦注射液可能通过调剂CAA患者免疫功能,抑制骨髓CD34+细胞凋亡来改善患者骨髓的造血功能,达到医治慢性再障的作用。4 小结 慢性再障属中医学“虚劳”、“血证”等范围。1989年6月（大连）,全国中西医结合血液病专业委员会第三届第二次学术会议拟定的肾阳虚、肾阴虚和肾阴阳两虚三型辨证标准,使再障的诊治水平产生飞跃,以补肾为主的方药医治慢性再障已取得了较好的疗效28-3

12、0。中药医治再障因其多靶点、多途径愈来愈受到学者们的关注。目前研究证明,中药能够改善骨髓造血微环境,增进骨髓造血,有改善再障患者免疫机制、对抗骨髓细胞凋亡等作用,同时能够减少西药的不良反映,提高患者整体状况。但是,研究多以补肾为主,中药复方为多,中药单体研究较之为少,多停留于检测骨髓CD34+细胞凋亡率,或某种相关凋亡基因水平,中药对抗骨髓细胞凋亡的机制还尚不十分明确。从中药领域寻觅医治再障的特异性药物还需要一按时刻,从临床医治再障经常使用药物提取中药单体,以细胞凋亡途径为切入点,深切研究其作用机理,是尔后研究的重点方向。【参考文献】 1 Young and its treatment in

13、aplastic anemiJ. Ann Intern Med,1997,126：166168.2 Young NS,Barrett treatment of severe acquired aplastic anemiaJ.Blood,1995,86：33673377.3 Tong J,Bacigalupo A,Piaggio G,et aplastic anemia （SAA）：response to cyclosporine A（CyA） in vivo and invitroJ.Eur J Haematol,1991,46：212216.4 Tisdale JF, Dunn DE,Ma

14、ciejewski J. Cyclophosphamide and other new agents for the treatment of severe aplastic anemiaJ.Semin Hematol,2000,37（1）：102109.5 成 军.程序性细胞死亡与疾病M.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,42.6 Farrow SN, White JH, Martinou I, et of a bcl-2 homologue by interaction with adenovirus E1B 19KJ.Nature, 1995,374：731733.7 Ge

15、nestier L, Paillot R, Bonnefoy-Berard N, et al. Fas indepen- dependent apoptosis of activated T cells induced by antibodies to HLA class I domainJ.Blood,1997,90：36293639.8 Okamoto protective effect of glycyrrhizin on anti-Fas antibody-induced hepatitis in miceJ.Eur J Pharmacol,2000, 387（2）：229232.9

16、Callera,Falcao apoptoic cells in bone marrow biopsies from patients with aplastic anemia J.Br J Haematol, 1997,98（1）：1820.10 Maciejewski JP, Selleri C, Sato T, et al. Increased expression of Fas antigen on bone marrow CD34+ cells of patients with aplastic anemiaJ.Br J Haematol,1995,91：245252.11 Maci

17、ejewski JP, Selleri C, Anderson S, et al. Fas antigen expression on CD34+ human marrow cells is induced by interferon gamma and tumor necrosis factor alpha and potentiates hematopoietic suppression in vitroJ.Blood,1995,85：3183.12 Liles WC, Kiener PA, Ledbetter JA, et al. Differential expression of F

18、as（CD95） and Fas ligand on normal human phagocytes：Implications for the regulation of apoptosis in neutrophilsJ.J Exp Med,1996,184：49.13 任翠爱,张茂宏,徐从高,等.环孢菌素A医治对再生障碍性贫血骨髓细胞凋亡的阻碍J.中华血液学杂志,2001,22（44）：189192.14 任翠爱.甘草酸对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能的阻碍J.山东大学学报（医学版）,2006,44（1）：1014.15 郑茵红,高瑞兰,朱大元,等.三七总皂苷及其单体对人骨髓造血祖

19、细胞增殖作用的研究J.中国中西医结合急救杂志,2003,10（3）：135137.16 钱煦岱,高瑞兰,马 珂,等.三七皂苷对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的增殖分化作用J.中国实验血液学杂志,2003,11（2）：120123.17 王亚平,牛 宏,姜 蓉,等.三七总皂苷对红系祖细胞增殖调控机理的研究J.解剖学杂志,1996,19（2）：138142.18 邹 丹,乔海灵,全宏勋,等.三七皂苷对辐射所致小鼠骨髓抑制的对抗作用J.中华放射医学与防护杂志,2000,20（6）：413415.19 陈小红,高瑞兰,徐卫红,等.人参皂甙对红系、粒单系、巨核系细胞株的增殖及转录因子的诱导作用J.中国中

20、西医结合杂志,2001,21 （1）：4042.20 盖 云,高瑞兰,牛泱平,等.三七总皂苷对免疫介导性再生障碍性贫血小鼠造血祖细胞的增殖作用J.中国中西医结合杂志,2003,23（9）：680683.21 陈小红.三七皂苷对人骨髓造血细胞凋亡相关蛋白表达的阻碍J.中国实验血液学杂志,2006,14（2）：343346.22 何明大.扶正养营颗粒对免疫介导再障小鼠造血细胞凋亡和相关调控蛋白表达的阻碍J.中国医学工程,2004,12（5）：1517.23 刘 艳,林齐鸣.炙甘草汤对再障模型小鼠骨髓造血组织阻碍的实验研究J.河南中医,2005,25（1）：3234.24 毕玲玲.补肾活血通络法对儿

21、童慢性再生障碍性贫血骨髓CD34+细胞凋亡阻碍的临床研究J.2005,37（1）：2829.25 刘 捷,王树庆.补肾活血通络法为主医治慢性再生障碍性贫血的临床研究J.潍坊医学院学报,2003,25（1）：1215.26 孙巍巍,孙伟正.补髓生血颗粒对慢性再障患者细胞凋亡及Bax基因的阻碍J.中医药信息,2004,21（6）：4143.27 唐 庆.参麦注射液对慢性再生障碍性贫血患者血清肿瘤坏死因子及骨髓CD34+细胞凋亡的阻碍J.中国中药杂志,2005,30（16）：12961298.28 张肖慧,梁慧珍.补肾活血法医治慢性再生障碍性贫血疗效的临床评判J.中国临床药理学与医治学,2004,9（4）：423425.29 张小钦,乔作现.中药医治再生障碍性贫血65例疗效观看J.光明中医,2004,19（5）：6061.30 金 彦,杨 冰,梁淑莲.中药加味参芪仙补汤为主医治小儿慢性再生障碍性贫血的研究J.现代中西医结合杂志,2004,13（19）：25262528.