干细胞移植的安全性文档格式.docx

1、从此，白血病不再是一种令人谈而生畏的绝症。目前，造血干细胞移植已经成为世界公认的治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病最有效的方法。人体造血干细胞的80%以上储存在骨髓中，所以人们把早期的造血干细胞移植叫做骨髓移植。虽然骨髓不是人体的精髓，也不是中枢神经的脊髓，抽取一定量的骨髓对人体不会有任何损害，但由于采集骨髓要在全麻或硬膜外麻醉下进行，抽取髓液时捐献者会有痛感，所以给捐献者造成一定的心理压力，这是导致许多人对捐献骨髓产生恐惧感的重要原因之一。五十年代末，科学家发现外周血中含有可以重建髓系造血的干细胞。随着科学的进步和医学的发展，到八十年代末，外周血干细胞移植技术逐渐

2、推广开来，在提高治疗有效率和缩短疗程方面优于常规治疗，且效果令人满意。随着临床医学的进步，造血干细胞移植的技术越来越成熟，外周血造血干细胞移植逐渐替代原来的骨髓移植，成为治疗急慢性白血病、重症再生障碍性贫血、重症免疫性缺陷症以及多种恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血与免疫系统功能障碍和晚期实体瘤等疾病的一种重要手段。解放军304医院曾采用异基因外周血造血干细胞移植成功治疗一例晚期肾转移癌患者的消息。接受治疗的是一位39岁的男性军官，去年4月患肾癌做右肾切除术，今年初，双肺多处转移，最大病灶达67cm，常规治疗无效，专家会诊认为最多有2个月的生存时间。304医院将患者妹妹的造血干细胞植入患者体内，3

3、个月后，患者左肺转移病灶完全消失，右肺转移病灶大部消失或明显缩小。同骨髓移植相比，外周血造血干细胞移植具有多方面的优点：一是采集方便，供者不需要麻醉，无多部位骨髓穿刺抽髓的痛苦和不便，患者易于接受;二是移植后受者造血和免疫功能恢复快，感染、出血等并发症低且轻，减少了抗生素和成分血的应用，降低了移植相关病死率，缩短了住院时间，节约了医疗费用;三是由于可以从外周血中采集造血干细胞，对那些肿瘤对骨髓已有浸润，或接受放疗照射后不能采集骨髓的供体也可施行;四是与骨髓相比，外周血中肿瘤细胞混入较少，移植后复发率低于骨髓移植。什么是造血干细胞移植？造血干细胞好比人体造血器官的种子，我们的血细胞（红细胞、白细

4、胞、血小板）都是由它分化、成熟而来的。造血干细胞移植是目前治疗白血病最为有效的方法，此外，许多恶性肿瘤和遗传性疾病，以及再生障碍性贫血也可通过此方法获得治愈。造血干细胞移植的本质和基本步骤是：1）移植前预处理，使用超大剂量的放疗或化疗，最大限度地消灭体内残存的肿瘤细胞，同时抑制患者免疫系统，使供者造血细胞能够顺利植入；2）根据供者造血干细胞来源的不同，可采集供者骨髓，或外周血干细胞，或脐带血干细胞作为移植的；3）将正常的造血干细胞通过患者静脉输入体内，造血干细胞能自动定居在患者骨髓内，利用造血干细胞具有不断自我复制和分化的能力来重建患者造血功能，通常需要12月的时间，免疫功能的恢复需长达6月1

5、年的时间脐血干细胞移植在鲁成功一位11岁男孩患急性淋巴肉瘤型白血病，济南军区总医院为他施行了非血缘关系的异基因脐血干细胞移植。治疗观察20多天后的检测结果显示，植入患者体内的脐血干细胞已经生长，开始重建骨髓造血功能。迄今为止，我国共开展异体造血干细胞移植700余例。“造血干细胞移植”按其干细胞的来源不同可分为3种移植：一是骨髓血造血干细胞移植，这是指把某人的造血干细胞输注入病人体内。上述700余例的大部分属这种类型的移植。二是外周血造血干细胞移植，正常人的外周血造血干细胞的数量极少，而在运用抗肿瘤化疗药物或细胞刺激因子后，其骨髓血中的造血干细胞可释放到外周血中，以致造血干细胞的浓度增加数倍至数

6、十倍，这时收集并浓缩这些造血细胞后移入病人体内。三是脐带血造血干细胞移植，这是指把胎盘脐带血中丰富的造血干细胞植于病人体内。不论是哪种“造血干细胞移植”，关键是要找到和病人白细胞配型相符的细胞供给者。为了向白血病患者提供高质量的脐带血造血干细胞，鲁能英大集团公司与山东医科大学附属医院联合创建了“山东脐血造血干细胞中心”，现已成功地从胎盘脐带血中采集、保存了2500多例造血干细胞。为那11岁男孩植入的脐血干细胞就是该中心提供的。在这次移植前，他已经过了常规化疗、放疗，但均未见效，其自体骨髓移植也未成功。济南军区总医院的医生从中心2500多例造血干细胞中，按照和该男孩的白细胞配型相符的要求，选取了

7、10例，又从这10例中选取了3例。在这3例中有两例与患儿组织配型相符的位点多，另一例虽然相符的位点少，但造血干细胞多，于是将这例移植入患儿体内。重症系统性红斑狼疮通过干细胞移植疗法获得缓解摘要：美国学者联合使用干细胞移植疗法和化疗成功地诱导了重症系统性红斑狼疮患者的缓解。（Lancet 2000;356:701-707）美国西北大学的Ann E. Traynor博士联合使用干细胞移植疗法和化疗成功地诱导了重症系统性红斑狼疮患者的缓解。患者在治疗后症状持续改善，没有使用免疫抑制剂，使用了小剂量的强的松。Ann E. Traynor博士认为本研究最重要的发现就是认识到原始的干细胞有替代病态细胞群的

8、能力。她与同事评价了9名接受环磷酰胺（cyclophosphamide）治疗的顽固性系统性红斑狼疮患者，拟进行干细胞治疗，但是，2名患者因为感染被剔除。研究者在8月26日的柳叶刀（ The Lancet）杂志报道了整个研究过程，共7名患者接受了干细胞输注和高剂量化疗。研究者发现该组患者的中性白细胞绝对数超过5亿/升的中位时间数为9天，获得非输注血小板超过200亿/升的中位时间数为11天。平均随访25（12-40）个月时，所有患者均无活动性红斑狼疮迹象。另外，肾脏、心脏、肺脏以及血清学的标志物正常化， T-细胞表型和细胞库也表现为正常。Traynor博士认为这一技术可能会抑制或消除由于异常或病态

9、细胞群所导致的疾病，令人激动的是，不仅患者的临床症状获得了控制，而且在治疗一年以后，可以根据免疫系统的多样性以及反应性鉴别免疫系统的恢复情况，从某种程度上讲，免疫系统恢复了正常。Traynor博士推测，随访3年以后，很大一部分病人永远不会复发了，但最终的结论要等到5年的时候再下。该研究小组正在准备III临床试验，并获得了相关的基金资助，预计同时开展系统性红斑狼疮和多发性硬化症的研究。对于多发性硬化症，Traynor博士指出，干细胞移植疗法可以阻止患者的病程，但是无法帮助患者恢复神经缺陷。 造血干细胞移植创佳绩治疗红斑狼疮又有进展.在曼谷召开的亚太地区骨髓移植会议上，郑州市第三人民医院赵晓武副主

10、任医师报告了“造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮”的研究进展，12例接受治疗的患者，全部达到完全缓解，引起与会专家的关注。系统性红斑狼疮是一种自然免疫复合物病，患者多为青年及中年妇女。据有关方面统计，我国患病率约为7510万。国外有人用5个“ D”来描述这一疾病，即痛苦、死亡、残疾、药物中毒、经济损失。郑州市第三人民医院血液科副主任医师赵晓武和主任医师侯天德等，自1998年开始进行“造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮”的临床研究。他们先为病人行环磷酰胺“冲击治疗”，然后经细胞因子动员后采集出正常的造血干细胞贮存；第二步摧毁患者病态免疫系统，将采集出来的造血干细胞像种子一样种植进患者体内，重建正常的

11、造血与免疫系统，从而使疾病得到控制。整个疗程约需23个月。造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮的关键技术是预处理，即彻底摧毁患者的病态免疫系统。郑州市三院在充分研究国外资料基础上，应用了国产的ALG以及全淋巴照射，在确保疗效的基础上，大大减低了医疗费用，每例患者可节省四五万元。目前接受移植的12例病人中，未出现严重的不良反应，且已甩掉了治疗剂量的激素，一半以上的病人在3个月左右彻底停用激素。患者的生活质量得到改善，部分病人已重新恢复了工作、学习。间充质干细胞移植疗法尽管骨髓中间充质干细胞含量相对较多，但仅占0.001%0.01%，难以满足细胞治疗的需要，故需要在体外分离纯化，培养扩增才能满足要求。

12、间充质干细胞移植，指的是将间充质干细胞从自身采集，然后进行培养、纯化，再回输进患者体内用以治疗硬皮病、皮肌炎、红斑狼疮、类风湿、运动神经元病等免疫性疾病的一种最前沿的治疗方法。不仅可以达到近期改善患者的临床症状的目的，更为重要的是可以提高远期临床疗效、减少病情反复的几率，甚至达到治愈的目的，为广大患者摆脱病痛的身心折磨，走向健康之路。治疗过程第一步：对患者的整体状况进行评估，如果没有禁忌症如：感染、肾危象、心包大量积液等的情况下，行细胞动员4-5天。第二步：MSCs的采集：我院采用SPECTER多功能细胞分离机分离MSCs细胞。第三步：MSCs的培养及扩增,大约20天左右。第四步：MSCs的移

13、植。移植途径:直接在皮损部位多靶点注射。静脉移植,将扩增的MSCs静脉输入,使之通过血液循环到达病变部位。干细胞移植治疗自身免疫病自90年代以来，国内外很多学者研究造血干细胞移植治疗自身免疫病。近五年来，全球大约有500例自身免疫病患者接受了自体干细胞移植治疗。其中多数为一些常规治疗无效的、难治性疾病。外周血干细胞移植的病例选择十分重要，主要适应症为难治性系统性红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎和重症类风湿关节炎。自体干细胞移植对部分患者有效，但有复发倾向及一定风险。其安全性及远期疗效仍需进一步研究。干细胞燃起人类健康新希望属细胞生物学领域的干细胞研究和产品开发所需的费用选择低于人类基因组工程。如果说由

14、于资金、设备和人才方面的欠缺，我国在人类基因组这项工程的竞争中最终可能只占有1%的份额，那么我国应在干细胞工程中全力以赴去竞争应有的份额，以带动我国其它生物技术的发展，避免将来出现中国人需花钱向外国企业购买中国人自己的干细胞来治病的尴尬局面。1999年12月，美国科学杂志公布了当年世界科学进展的评定结果，干细胞的研究成果列在举世瞩目耗资巨大的人类基因组工程之前，名列十大科学进展首位。干细胞研究何以引起如此重视？是因为它为人类的健康提供了新希望。研究干细胞的科学意义 干细胞的“干”译自英文“Stem”，意为“树”、“干”和“起源”。干细胞即起源细胞。按其功能，干细胞可分为全能干细胞和组织干细胞。

15、前者能发育分化形成完整的机体，后者是一种或几种组织的起源细胞。人胚胎干细胞可发育成人，因此是全能干细胞，克隆人或克隆动物便从胚胎干细胞着手。干细胞的用途很广，涉及医学多个领域。干细胞及其相关生物技术的迅速发展得益于对干细胞上述功能的认识。目前科学家已能在体外鉴别、分离纯化、扩增和培养人体胚胎干细胞、原始胚胎干细胞以及多种组织干细胞，并以干细胞为种子培育成功一些组织器官。干细胞及其衍生组织器官的临床广泛应用必将导致一次医学革命，产生一种全新的治疗技术，即再造正常的甚至年轻的组织器官。这种再造组织器官的新医疗技术将使任何人能用上自己或他人的干细胞和干细胞衍生的新组织器官，来替代病变或衰老的组织器官

16、。假如在年老时能使用上自己或他人婴幼儿或青年时期采集保存的干细胞及其衍生组织，那么人类长期追求的长生不老的幻想就有可能成为现实。实际上，移植造血干细胞取代病变的造血细胞，治疗白血病和一些遗传性血液病已有几十年的历史，挽救了许多人的生命。造血干细胞移植包括骨髓移植，脐血和外周血干细胞移植。造血干细胞移植是目前治愈难治性白血病和某些遗传性血液病的唯一希望，在肿瘤和难治性免疫疾病的治疗中也有其独特的作用。干细胞移植需要供者和受者的白细胞抗原匹配，才不产生排斥反应，使供者的干细胞能在受者体内长期生存。孪生兄弟姐妹间白细胞抗原型号完全匹配，是最理想的供体，但孪生兄弟姐妹很少，实际上临床应用不多。同胞姐妹

17、或兄弟之间的白细胞抗原型号匹配的可能性较大，是目前临床异基因造血干细胞移植的主要干细胞来源。然而临床上只有1/4的病人能获得同胞的干细胞。特别在我国，多数家庭只有一个孩子，能获得亲属干细胞的可能性就更低。非亲属之间造血干细胞的白细胞抗原型号完全匹配的可能性只有5万到10万分之一。因此，许多适合造血干细胞移植的患者因找不到所需的白细胞抗原配型相同的造血干细胞而失去治疗的机会。为解决干细胞来源缺乏的困难，许多国家的医疗机构或红十字会建立了骨髓库和脐血库，前者主要将志愿捐献骨髓者进行登记检查和白细胞抗原配型，一旦有患者需求，通知健康志愿者前来捐献骨髓。后者则采集储存可供移植的脐血干细胞，随时提供给白

18、细胞抗原配型基本相同的患者进行移植治疗。骨髓和脐血干细胞库的建立和完善必将使更多的患者能有机会接受到这一新的治疗方法。目前干细胞的研究已扩展到间叶系干细胞、神经干细胞和血管干细胞的移植以及多种组织的再造。可以预料其它组织干细胞的移植在不久的将来会广泛应用于临床。干细胞的广阔应用前景促使干细胞技术相关产业应运而生，成为生物技术领域最热点产业之一。以研制和生产供临床治疗和科研所需干细胞产品为目的的公司纷纷成立。目前尚难预料这些产业一定会取得很大的成功。综合造血干细胞移植治疗疾病的经验，健康干细胞的来源缺乏是一大难题，应用上也存在一些障碍，例如如何彻底去除患者病变组织细胞，净化移植用干细胞，以消除疾

19、病的复发；如何提高白细胞抗原配型的精确度以降低排斥反应，提高干细胞植活率；如何较大规模地分离纯化和扩增干细胞，特别是早期干细胞，使患者能在移植时得到足够的干细胞等等。另外，胚胎干细胞和一些组织干细胞的广泛应用在技术上还存在不少其它困难。但可以肯定在不久的将来，人们会听到更多的有关干细胞研究进展的消息和新闻报道。我国干细胞研究现状 我国是世界上人口最多的国家，需要干细胞移植治疗的疾病发病率与其它国家大致相似。由于我国早就实施了计划生育政策，目前的家庭结构以独生子女家庭为主体，能提供具相同或相关基因的干细胞的可能性较其它国家低，因此是干细胞及其衍生组织需求最大最迫切的国家。上述介绍使我们认识到干细

20、胞的重要性和我国需求的急迫性，摆在我们面前的问题是我国目前是否具备开展干细胞研究和应用的能力，能否研究开发出适合中国人需求的干细胞产品和相关医疗技术。对这个问题我们应有清晰的认识。实际上，我国的干细胞研究和应用已有一定的基础，其中研究和应用最多的是造血干细胞。早在60年代，我国就开始了骨髓移植的研究，到70年代末80年代初，临床骨髓移植治疗血液病在我国的主要城市陆续开展，90年代以来，除骨髓移植外，外周血和脐血干细胞移植也逐步普及应用治疗血液病和肿瘤。据不完全统计，到目前为止，我国各地共进行了近2000例造血干细胞移植，许多白血病和其它疾病患者接受了干细胞移植治疗已完全治愈。值得关注的是，美国

21、等发达国家除许多干细胞企业应运而生外，政府高度重视，不但给予高强度支持而且开始从宏观上着手组织这项可能导致医疗革命的高新技术，为此立法建章，鼓励开发但又不违背医学伦理。美国、法国、意大利和日本等国政府资助建立脐血干细胞库，变废为宝，治病救人。我国对干细胞的研究近年来虽然通过各种基金也进行了一些资助，但这些支持的强度远不够与先进国家竞争，需要进一步支持。脐血干细胞的基础研究脐血造血干/祖细胞。具有高度的自我更新能力或复制能力，能保持干细胞数量恒定，并能进一步分化为各系祖细胞及成熟细胞。目前，随着脐血干细胞的移植和分化方面研究的深入，发现脐血干细胞具有来源广泛、移植成活率高、移植物抗宿主病发生率低

22、等优点，弥补了骨髓干细胞来源少，匹配难等问题，因而脐血干细胞在临床上具有广泛应用的潜能。一、 脐血干细胞 脐血又称胎盘血或脐带血，是胎儿出生时脐带内和胎盘近胎儿一侧血管内的血液。在妊娠期内，胎儿的营养、气体交换和排泄都是通过脐血运输，由胎盘内绒毛完成的。其中，脐血干细胞是脐血中的一种具有分化潜能的原始细胞，具备自我更新和增殖的能力，并能在特定因素的影响或诱导下，向各种细胞或组织分化。目前的研究中，脐血中的造血干/祖细胞已经应用于临床治疗，而脐血中的非造血干细胞也具有临床应用的巨大潜能。1、 脐血造血干/祖细胞 脐血造血干/祖细胞。CD34抗原是分离纯化HSCs/HPCs的主要标志，脐血中的CD

23、34+细胞群在数量、质量和增殖能力方面均高于骨髓和外周血，说明脐血中的HSCs/HPCs具有更原始、更强的增殖分化能力。2、 脐血非造血干细胞 脐血中除含有造血干/祖细胞外，还含有其他多种非造血干细胞，如：间充质干细胞、内皮前体细胞和非限制性体干细胞等。脐血中的非造血干细胞具备自我扩增和多向分化性，这些细胞经诱导可分化为成骨细胞、脂肪细胞、神经细胞、内皮细胞等，具有应用到组织修复、基因治疗载体和造血干细胞共移植等方面的潜力。二、 脐血干细胞的保存1 、脐血干细胞的贮存 目前关于脐血干细胞的贮存常用的有两种方法，一种是快速冷却非晶态固化，即采用快速或超快速的冷却方法，使样品能在无毒的低浓度下实现

24、玻璃样化，玻璃化法超低温保存具有简单、快速、高效等优点。研究证实，脐血干细胞也可用玻璃化法冻存。另一种是慢速冷却法，是将采集的脐血置于含抗冻剂（通常为甘油或二甲亚砜）的冻存液中，程控降温至-80后，再将其置人液氮内，该方法相应的冷却速度较高，细胞内不易形成冰晶，从而对细胞内部的结构，特别是对细胞膜产生的损伤较小。通常脐血干细胞在-80的冰箱中做短期贮存，而在-196的液氮中可长期贮存，有研究表明，脐血干细胞于液氮冻存6个月、1年、2年，其细胞活性、回收率无显著变化。2、 脐血干细胞的复苏 通常从液氮中取出冻存的细胞，在40的水浴中进行快速解冻，离心后小心弃去上清液，加入含血清的培养基后可进行检

25、测或培养。脐血干细胞应用前景及展望一、前景1、 脐血造血干细胞的移植 脐血是一种非常有潜力的造血干细胞资源，脐血中含有丰富的造血干/祖细胞（HSCs/HPCs），具有高度的自我更新能力和分化能力。脐血造血干细胞比骨髓和动员的外周血来源的造血干细胞更原始、更具有自我更新、增殖分化和体外扩增潜能;而且脐带血中的淋巴细胞未接受外界抗原刺激，其免疫原性较弱。因此，与骨髓和外周血干细胞移植相比，脐带血干细胞移植具有来源丰富、再生能力强、即时性、HLA相容性要求低、成本低廉等优点。近年来，脐血造血干细胞移植飞速发展为一种高科技生物治疗手段，现已广泛应用于许多疾病的治疗，包括恶性血液疾病、恶性淋巴瘤、多发性

26、骨髓瘤、自身免疫性疾病、严重免疫缺陷症等，临床证明具有一定的疗效。目前脐血移植的供者已经从HLA相合的同胞过渡到HLA不相合的无关供者，移植对象从儿童过渡到成人。针对在移植过程中脐血干细胞采集量有限，所含的核细胞数量较少的问题，近来的研究主要关注在脐血干细胞的体外扩增、混合脐血移植、提高HSCs/HPCs的归巢能力等方面。2、 脐血非造血干细胞的多向分化 脐血非造血干细胞在体外能诱导分化为多种实体器官组织特异性细胞，该发现和研究为临床工程学潜在的广泛应用提供了一种新的细胞源。脐血细胞经过体外选择性培养后，具备与骨髓间质干细胞相同的多向分化潜能特性，能像骨髓间质干细胞一样分化为破骨细胞、脂肪细胞

27、、心肌细胞和神经细胞等组织细胞。已有文献证明了脐血干细胞具有向成骨细胞方向分化的潜能，有望应用于骨缺损修复过程中。由于骨髓间质干细胞数量有限、难以即时使用，而脐血干细胞具有来源广泛、移植成活率高、移植物抗宿主病低、易于建立干细胞库、便于即时使用的特点，因而脐血非造血干细胞将以其自身的特性和优势具有在临床上发挥重大的应用价值的潜能。二、展望目前，脐血的主要临床应用是脐血造血干细胞移植治疗各种疾病，并针对脐血干细胞的利用率进行了大量研究和临床试验。此外，脐血中的非造血干细胞在未来细胞治疗和再生医学中也具有广阔的应用前景。随着对脐血干细胞生物学特性研究的深入及干细胞组织工程技术的发展，将可能为脐血干

28、细胞移植和分化提供新的策略和方案，以利于更充分地开发和应用丰富的脐血干细胞资源间质干细胞移植治疗红斑狼疮张光峰综述张晓审阅 （广东省人民医院风湿免疫科，广州） 自身免疫性疾病可累及全身各系统并最终导致多器官、多系统功能衰竭，严重威胁患者生命，并以病因不明、治疗棘手著称。探索安全有效的治疗方法是医学领域不懈的追求。自从有人提出自身免疫病是一种造血干细胞疾病以来，干细胞移植疗法方兴未艾，并且随着近几年间充质干细胞新功能的发现，尤其是对间充质干细胞免疫功能的进一步阐释，更为干细胞移植治疗自身免疫性疾病的发展起到了推波助澜的作用。同时也因其理想的疗效而展现出广阔的应用前景。许多自身免疫性疾病以B淋巴细胞的过度激活和产生大量自身抗体为主要特征。有些以B细胞介导为主的自身免疫性疾病可以累及全身多个系统并最终导致多器官、多系统功能衰竭，严重威胁患者的生命。由于病因仍然不明确，使用药物治疗和其带来的副作用一样令人棘手，给临床治疗提出了艰巨的挑战。因此寻找更安全、更有效的治疗方法成了医务工作者义不容辞的责任。1998年，IkeharaY43; 在撰写的文章中提到：异体骨髓移植（allogeneic bone marrow transplantation， alloBM