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1、 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱（linkage map），它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。（利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合 作用而进行分离的一种层

2、析技术。） 22.蛋白质的部分水解: 不完全水解得到的水解产物使各种大小不等的肽段和单个氨基酸。 23.T aqDNA聚合酶: 存在于水生嗜热菌（Thermus aquaticus）的嗜热DNA聚合酶，可在74复制DNA，在95仍具有酶活力。该酶可在离体条件下，以DNA为模板，延伸引物，合成双链DNA。这个酶只有53DNA聚合酶活性和53的外切酶活性，缺少35的外切酶活性。 24.探针: 在分子杂交中用来检测互补序列的带有标记的单链DNA或RNA片段。 25.引物: 在多聚酶链式反应中，用于引导脱氧核糖核酸合成的一段核苷酸序列。 26.包含体: 包埋病毒粒子具一定形状和大小的蛋白结晶体，在相差

3、显微镜下呈现强的折光性，由单一多肽构成。 27.转基因动物: 通过基因转移技术获得的整合有外源基因的动物个体。 28.序列标签：基因组中任何单拷贝的长度在100500bp之间的DNA序列，与核酸内切酶识别序列相关联。 29.基峰: 质谱图中表现为最高丰度离子的峰。 30.短通滤片:是一种能让短波方向的光透过,长波方向的截止的滤光片. 31.凝胶过滤: 利用凝胶的网状结构根据被分离物质分子大小进行分离的一种方法。 32.蛋白质的完全水解: 彻底水解得到的水解产物为各种氨基酸的混合物 33.末端脱氧核苷酸转移酶: 不需要模板，以dNTP为底物催化脱氧核糖核苷酸依次加到 DNA链（片段）3-OH端的

4、酶。 34.切口平移: 制备标记DNA的一种方法。先用DNA酶使DNA双链上形成不对称的切口，再利用DNA聚合酶的53外切酶活性将切口处的5-P-核苷酸逐个切除，同时其DNA聚合酶活性又不断将新的含标记的核苷酸按碱基配对原则加入形成新链，这样就使缺口不断向3端移动，同时标记了DNA。 35.退火: 两条单链多核苷酸通过互补碱基之间的氢键形成双链分子的过程。可发生在同一来源或不同来源核酸链之间，可以形成双链DNA分子、双链RNA或DNA-RNA杂交分子。 36.瞬间表达：转染的DNA不与宿主染色体整合，不能随宿主基因组的复制而扩增，只是临时在一个相对短的时间内大量扩增，只能在细胞内维持两三天。

5、37.嵌合体：一种含有两种以上基因型组织的机体，可能是基因突变、染色体异常分离或移植的结果。 38.序列图谱：以某一染色体DNA上所含的全部碱基序列绘制图谱，包括：转录序列和非转录序列 39.分子离子：有机质谱分析中，化合物分子失去一个电子形成的离子 40.长通滤片: 是一种能让长波方向的光透过,短波方向的截止的滤光片. 41.基因敲入：利用基因同源重组，将外源有功能基因（基因组原先不存在、或已失活的基因），转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组，插入到基因组中，在细胞内获得表达的技术。 42.缺口平移: 缺口翻译法或切口平移法是实验室最常用的一种脱氧核糖核酸探针标记法。利用E.coli D

6、NA多聚酶I的多种酶促活性将标记的dNTP掺入到新合成的DNA链中从而形成高比活性的均匀标记的DNA探针。线状、超螺旋及带缺口的环状双链DNA 均可作为缺口平移法的模版。 43.随机合成终止法 44.化学断裂法：化学断裂法化学断裂法是采用特殊的化学试剂，将DNA片段分别从特定碱基部分裂解，得到从同一标记端开始，以特定碱基结尾的一系列长短不一的DNA片段（Maxam、Gilbert，1977）。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳使它们按大小分离，根据放射自显影条带的相对位置和裂解专一性读出DNA序列。 45.有效成分：指一种混合物中，对生物体代谢或者化学反应起作用的成分。 46.杂质：物质分离过程中除所要的

7、目的产物外的物质总称为杂质。 47.盐析: 在高盐浓度下，蛋白质溶解度随盐浓度的升高而降低的过程这种现象称为盐析。 48.盐溶：酶蛋白可溶于水，而且在低浓度的盐存在的条件下，酶在水中的溶解度随盐浓度的升高而增加 49.塔板理论：塔板理论是色谱学的基础理论，塔板理论将色谱柱看作一个分馏塔，待分离组分在分馏塔的塔板间移动，在每一个塔板内组分分子在固定相和流动相之间形成平衡，随着流动相的流动，组分分子不断从一个塔板移动到下一个塔板，并不断形成新的平衡。一个色谱柱的塔板数越多，则其分离效果就越好。 时，不同物质在两相中的分布会不同。 50.启动子：在DNA分子中，RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序

8、列。 55.报告基因（reporter gene）：是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。 61.转基因动物：是指基因组中整合有外源基因、外源基因能够表达并按孟德尔定律遗传 的一类动物。 62.转基因（transgene）：将外源基因整合入动物基因组中的操作。 63转染：指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染（永久转染）两大类。 64

9、.基因诊断：针对DNA和或mRNA的分子诊断，通过分析这些遗传信息分子的序列， 从而在分子水平上确定疾病的病因，具高度特异性。 65.基因治疗：利用现代分子生物学技术，将正常的基因导入患者靶细胞使其发挥作用以 纠正或补偿基因缺陷或将患者靶细胞异常表达的基因敲除或封闭以达到 对疾病进行治疗的方法。 66.自杀基因：某些基因表达的特异性酶可以催化对真核细胞无毒或低毒的药物前体，转 变为具有抑制核酸合成效应的抗代谢药物，进而选择性地将转染了该基因 的肿瘤细胞“自杀”。这些基因也相应地被称为“自杀基因”。 67.旁观者效应:“自杀基因”治疗不仅使转导了“自杀基因”的肿瘤细胞在用药后被杀 死，而且与其相

10、邻的未转导“自杀基因”的肿瘤细胞也被杀死。 68. CASPASE：是近年来发现的一组存在于胞质溶胶中的结构上相关的半胱氨酸蛋白酶， 它们的一个重要共同点是特异地断开天冬氨酸残基C端的肽键。Caspase 在凋亡过程中是起着必不可少的作用，细胞凋亡的过程实际上是Caspase 不可逆有限水解底物的级联放大反应过程。 69.蛋白质组：一个基因组、一个细胞或组织或一种生物体所表达的全部蛋白质。 蛋白质组学：是蛋白质组概念的延伸，是在整体水平上研究细胞内蛋白质组及其活动规律的科学。 70.差异表达：基因表达调控的一种方式。指在对信号或诱导物做出应答时，选择表达不 同的基因，或使基因的表达水平有所不同

11、。 71.显微注射：直接用显微注射器将重组DNA注射到哺乳动物细胞的细胞质或细胞核中 的方法。是转基因动物技术中将基因导入哺乳动物细胞的主要方法之一。 72.干细胞：具有无限制自我更新能力、同时也可分化成特定组织的细胞，在细胞发育过 程中处于较原始阶段。 73.酶的比活性：酶纯度的度量标志，是指在特定特定条件下，单位质量蛋白质或RNA 所具有的酶活力单位数。 74.提纯倍数：反应纯化方法的效率，纯化倍数=纯化后的比活/纯化前的比活。 75.分子杂交：一条DNA单链或RNA单链与另一条单链通过碱基互补形成双链分子的过程。 76.基因组：一个生物体的基因组是指包含在该生物的DNA（部分病毒是RNA

12、）中的全部遗传信息，又称基因体（genome）。基因组包括基因和非编码DNA。 76.DNA序列标签：STS是基因组中任何单拷贝的长度在100500bp之间的DNA序列，与核酸内切酶识别序列相关联。 77.SNP: 单核苷酸多态性, 是指在基因组上单个核苷酸的变异，形成的遗传标记，其数 很多，多态性丰富。指在基因组上单个核苷酸的变异,包括置换、颠换、缺失和 插入。 79.等电聚焦电泳：用特殊的一种缓冲液（两性电解质）在凝胶（常用聚丙烯酰胺凝胶）内制造一个pH梯度，电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点（pI）的pH处（此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷），形成一个很窄的区带。 80.变性凝胶电

13、泳：:在DNA、RNA或蛋白质等生物大分子发生变性（如使用十二烷基硫酸钠、尿素、乙二醛等变性剂）的条件下进行的凝胶电泳。 81.粘性末端: 当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时，就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片断，即5突出。这些片断可以通过重叠的5末端形成的氢键相连，或者通过分子内反应环化。因此称这些片断具有粘性，叫做粘性末端。82.质粒的不相容性: 细菌质粒分类的一种标准，指在无选择压力的条件下，亲缘关系密 切的不同质粒或同一不相容群的质粒不能稳定共存于同一宿主细胞，在细胞增殖过程中将有一种被排斥的现象。 83.稳定表达: 转染的DNA与宿主染色体整合，能随宿主基因组的

14、复制转录和翻译，并被稳定遗传。 84.多克隆位点: 是包含多个（最多20个）限制性酶切位点的一段很短的DNA序列。也称为多位点切头，是基因工程中藏用到的载体质粒的标准配置序列。在多克隆位点中，每个限制性酶切位点通常是唯一的，即他们在一个特定的载体质粒中只出现一次 85.基因打靶：是利用DNA同源重组原理，在基因组中的某一特定部位进行定点的基因 重组，是研究基因的功能的有效手段。包括基因敲除（gene knock out）和基因敲入（gene knock in）。 86.慢病毒：属于逆转录病毒科。慢病毒核蛋白质前整合复合物具有噬核特性，病毒基因 组运输至细胞核，从而使慢病毒可以感染和在非有丝分裂

15、细胞中复制。 这一特性使慢病毒成为基因治疗的转移载体。 87.短串联重复序列：是第二代遗传标志，染色体上的一种串联重复序列，重复单位是2-6 个核苷酸，具有高度多态性，又可以利用技术进行自动化 操作，因而为完成人类基因组计划中遗传图采用的主要遗传标志。 88.限制性酶切片段多态性：是第一代遗传标志一位置上由于核苷酸序列的差别而造成的 限制性内切酶酶切位点丢失而体现。 89. .荧光原位杂交：是一种物理图谱绘制方法，使用荧光素标记探针，以检测探针和分 裂中期的染色体活分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。 荧光原位杂交图谱：用不同颜色标记的各种DNA序列（探针），与染色体上的互补序列杂交而不

16、破坏染色体的整体形态，显微镜下观察、辨认荧光标记在染色体上 的定位而绘制的图谱。 90.连续克隆系（图）：是最重要的一种图谱，以序列标签为标志。 91.固相杂交: 是核酸分子杂交的一种，指液相中的核酸探针与固定在固相支持物的上的待测核酸片段进行杂交的过程，分为原位杂交和印记杂交两种。 92.液相杂交：是核酸分子杂交的一种，指待测核酸样品与探针在液相中发生杂交。 93.酶保护分析：主要用来检测染色质结构与功能状态的方法。当染色质结构致密，DNA 被组蛋白压缩很紧时，基因是不表达的，同时也对DNA酶不敏感。反之，结构蓬松、活跃进行基因表达的染色质，则易遭DNA酶的降解。 94.对角线电泳：用于分析

17、混合物中某一组分对某些化学处理或光处理后变化的双向电泳技术。样品加样后先从一个方向进行电泳分离，经化学或光处理后，再以与第一次电泳垂直方向进行第二次电泳分离，则经过处理未被修饰的组分皆位于电泳图谱的对角线上。不在对角线处出现的多肽含有由于二硫键氧化而形成的半胱氨酸残基，由此可分析多肽中二硫键位置。 95.分光光度法：通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。 96.Ti质粒：是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的环状双链DNA分子。它控制根瘤的形成，可作为基因工程的载体。 97.Klenow片段：E.coli DNA聚合酶经胰蛋白酶或

18、枯草杆菌蛋白酶部分水解生成的，保存了5-3聚合酶和3-5外切酶活性，但缺少5-3外切酶活性。 98.分子离子：有机质谱分析中，化合物分子通过某种电离方式失去一个外层电价电子形成的带正电荷的离子，常用M.+表示。 99.碎片离子： 100.基峰：质谱图中表现为最高丰度离子的峰。计算各峰相对值时常以基峰为100. 二、填空 1.在生物大分子提取时，材料的选择原则是（含有效成分丰富、稳定性好）、（来源丰富，保持新鲜）（适合加工提取）和（有经济利用价值）。 2.YAC的三个主要功能成份分别是（端粒）、（着丝粒）和（ARS元件）。 3.从功能上可将Caspase分为（ICE亚类）、（凋亡启动亚类）和（凋

19、亡效应亚类）三大类。 4.限制酶切割DNA后产生的切口有（平末端）、（3粘性末端）和（5粘性末端）三种形式。 5.印迹技术常用的固相支持物分别是（尼龙膜）和（硝酸纤维素膜）。 6.进行生物活性物质提取时，动物性来源主要有（）、（）、（）和（）。 7.Kozak规则表明在起始密码子上游的（-3 ）、（-6 ）和（-9 ）位置最好是G。 8.流式细胞仪用滤片减少荧光干扰，这些滤片分别是（长通滤片）、（ 短通滤片）和（ 带通滤片）。 9.基因工程中使用的连接酶有（T4 DNA连接酶）和（大肠杆菌连接酶），其中以（T4 DNA连接酶）更常用。 10.按杂交介质的不同可将杂交分为（固相杂交）和（液相杂交

20、）两类。 11.生物活性物质提取时必需同时建立一套有效的检测手段，常用的技术有（PCR ）、（电泳技术）、（免疫标记技术）及（）。 12.转基因的三个层次分别是（细菌转基因）、（离体真核细胞转基因）和（生物转基因）。 13.流式细胞仪主要由（流动室和液流）系统、（激光源和光学）系统、光电管及检测系统、计算机和分析系统以及（细胞分选系统）系统等五部分组成。 14.连接酶连接目的基因和载体时需要能量，（T4 DNA连接酶）连接酶以ATP为能量形式，而（大肠杆菌连接酶）连接酶则以（NAD+ ）供能。 15.三种印迹技术的名称分别是（Southern）、（Northern ）和（Western ）。

21、16.细胞破碎的方法主要有（机械破碎法）（物理破碎法）、（化学破碎法）、（酶解法）。 17.转基因动物的主要用途有（疾病型转基因动物）、（利用转基因动物制药）、（动物改良型）和基础生物学研究。 18.流式细胞检测时三个重要的参数分别代表FS（前向散射）、SS（侧向散射）和FL（每条线路上的光强）。 19.连接酶（大肠杆菌连接酶）只能连接粘性末端，而（T4 DNA连接酶）即能连接粘端又能连接平端。 20.三种印迹技术检测的目的物分别为（Southern测蛋白）、（Northern测RNA）和（western-测DNA）。 21.DNA序列测定的主要方法有（sanger法）、（Maxam-Gilb

22、ert化学降解法）、（基因芯片技术）及（PCR测序）等。 22.双脱氧合成终止法是在不同体系的底物中加入一种（ddNTP），在DNA合成过程中聚合酶随机终止合成反应，这个体系中每一条链都以（相应的ddNTP）结尾，经电泳后可（不同片段末端的ddNTP）读出DNA的序列。 23.化学断裂法利用特异的选择性试剂断裂DNA链，其中嘌呤选择试剂为（甲酸），嘧啶选择性试剂为（肼）。 24.PCR时，为了避免假阳性结果的出现需要分别做（阴性对照）、（阳性对照）和（试剂对照）三个对照。 25.PCR的一个循环包含（变性）、（退火）和（延伸）三个过程。 26.常用的测定蛋白质含量的方法有（凯氏定氮法）、（Lo

23、wry 法）、（紫外光谱吸收法）及（考马斯亮蓝染色法）等。 27.基因组计划所作的四张图分别是（物理图）、（遗传图）、（转录图）和（序列 图）。 28.遗传图作图时所用的遗传标记分别是（SNP ）、（STR）和（RFLP ）。 29.物理图作图的常用方法为（荧光原位杂交作图）、（限制性酶切作图）、（辐射杂交作图）及（稀有切点限制作图）。 30.原核细胞常用的四个表达系统分别是（大肠杆菌表达系统）、（链霉菌表达系统）、（芽孢杆菌表达系统）和（蓝藻表达系统）。 31.大肠杆菌表达载体构建时必要的顺式元件有（启动子和终止子）（核糖体结合位点）、（复制子）及（筛选标记）等。 32.活化的CASPASE

24、S是由同源（4）聚体组成，酶分子中含有（半胱氨酸）残基，作用的底物分子中含有（天冬氨酸）残基。 33.不连续电泳的三个效应分别是（浓缩效应）、（分子筛效应）和（电荷效应）。 34.转基因动物制备过程中，转基因的方法主要有（微量注射）、（胚胎干细胞法）、（生殖细胞载体法）、（逆转录和慢病毒转染法）、（精子载体法）、（受体介导法）等。 35.基因敲除技术是建立在（胚胎干细胞植入）、（胚胎显微操作技术）和（基因重组）三个技术的基础上的边缘技术。 36.酵母质粒载体的主要类型有（YIp）、（YEp）、（YRp）和（YCp）。 三、选择题 C 1.提出双脱氧法测DNA一级结构的科学家是 A Maxam

25、B Gilbert C Sanger D Chargaff E Crick A 2.原核表达系统中不包括 A 金黄色葡萄球菌 B 大肠杆菌 C 芽孢杆菌 D 蓝藻 E 链霉菌 C 3.构建真核细胞表达载体时不需要的顺式元件是 A 启动子 B 筛选标记 C SD序列 D 加尾信号 E 增强子 C 4.随机引物一般是由6个核苷酸组成的片段，原则上可设计多少种这样的引物 A 42 B 44 C 46 D 48 E 410 C 5.蛋白质序列测定时对蛋白质的纯度要求达到 A 95% B 96% C 97% D 98% E 99% B 6.人类基因组计划是哪年开始实施的 A 1985 B 1990 C

26、1995 D 1997 E 2022 B 7.胰蛋白酶专一性位点是由下列哪种氨基酸年形成的肽键 A 甲硫氨酸 B 赖氨酸 C 苯丙氨酸 D 亮氨酸 E 苏氨酸 B 8.最早构建的质粒载体是 A pUC B pBR322 C pUR278 D pGPD-2 E 柯斯质粒 C 9.转基因动物制备时，能使目的基因表达不影响邻近基因表达的元件是 B 增强子 C 绝缘子 D 沉默子 E Kozak序列 A 10. PCR引物设计时，按经验，引物自身存在的连续互补序列一般不超过 A 3bp B 5bp C 7bp D 9bp E 10bp A 11.双脱氧合成终止法测DNA序列时，加A体系中所得到的DNA

27、片段都是以哪个核 苷酸结尾 A A B C C G D T E U C 12.原核细胞mRNA与核糖体特异结合的序列称为 A Kozak序列 B 启动子 D 起始密码 E 帽子结构 C 13.与分泌表达相关的元件是 B 核糖体识别位点 C 信号肽序列 D 报告基因 E 加尾信号 B 14.能检测不同细胞表达区别的PCR技术是 A 彩色PCR B 差异显示PCR C 原位PCR D 不对称PCR E 定量PCR D 15.蛋白质组成分析时，酸水解的主要缺点是破坏了下列哪种氨基酸 A 丝氨酸 B 脯氨酸 C 组氨酸 D 色氨酸 E 酪氨酸 E 16. 人类基因组计划是哪年完成的 C 17. 胃蛋白酶专一性位点是由下列哪种氨基酸年形成的肽键 D 18.植物基因工程中使用的基因载体是 A 质粒 B 粘粒 C