1、本题考查微生物实验室培养的灭菌和消毒方法,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络结构的能力。3下列关于微生物营养的说法正确的是A. 同一种物质不可能既做碳源又做氮源B. 除水以外的无机物仅提供无机盐C. 凡是碳源都能提供能量D. 无机氮源也可以提供能量【解析】对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源,如牛肉膏,A错误;CO2和N2是无机物,也是某些微生物的碳源和氮源,B错误;有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量,C错误自然界中一些微生物如硝化细菌,可以以无机氮源合成细胞物质,同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量,叫做化能合成作用,D正确。4
2、下列对纤维素分解菌选择培养的表述正确的是A. 可以增加纤维素分解菌的浓度B. 可以减少纤维素分解菌的浓度C. 所用培养基是固体培养基D. 选择培养不可以省略,但可以重复操作【答案】A筛选纤维素分解菌时通过选择培养可以增加纤维素分解菌的浓度,A正确;筛选纤维素分解菌时通过选择培养可以增加纤维素分解菌的浓度,B错误;筛选纤维素分解菌时选择培养所用的培养基是液体培养基,C错误;选择培养可以省略,但获得的纤维素分解菌浓度低数量少,D错误。本题主要考查纤维素分解菌的选择培养,意在强化学生对选择培养过程的理解与运用。5不同培养基的具体配方不同,但一般都含有A. 碳源、磷酸盐和维生素B. 氮源和维生素C.
3、水、碳源、氮源和无机盐D. 碳元素、氧元素、氢元素、氮元素【答案】C【解析】微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐四个基本成分,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求,故选C。【考点定位】微生物培养基的成分【名师点睛】培养基的概念、种类及营养构成(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质(3)营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。6在做分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结
4、果产生原因可能有( )土样不同 培养基污染操作失误 没有设置对照A. B. C. D. 【解析】土样不同可能导致计数偏差,正确;培养基污染,正确;操作失误可能增加微生物的数量和种类,菌落会增多,正确;没有设置对照不会增加菌落数目,错误。【考点定位】以尿素为氮源,测定能生长的细菌的数量7在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应的培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有由于土样不同 由于培养基污染 由于操作失误 没有设置对照实验A B C DA同学获得的菌落远大于其他同学,可能的原因是采用的土样不同,导致计数偏差,正确;也可能是因为培养基污染,
5、正确;还可能是由于操作失误,正确;没有设置对照实验不会增加菌落数目,错误。因此,A项正确,B、C、D项错误。微生物的分离和培养8刚果红染色时,加入刚果红应在( )(1)制备培养基时(2) 梯度稀释时 (3)倒平板时(4)涂布时 (5) 长出菌落时A(3)(5) B(2)(5) C(1)(3) D(4)(5)加入刚果红可以在配制培养基上,也可以在长出菌落时,故A正确,其余错误。本题考查微生物的培养和分离相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。9下列关于微生物代谢的调节的叙述不正确的是A.酶活性的调节是指温度对酶活性调节 B.组成酶的合成只受遗传物质的控制,与生长环境中的营养物质无关C.
6、通过对微生物代谢的调节,微生物细胞内不会积累大量的代谢产物D.酶活性调节现象只在产物对产生该产物的酶直接抑制10测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养;而真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,其原因是( )A. 细菌个体小,真菌个体大B. 细菌易稀释,真菌不易稀释C. 细菌在土壤中的含量比真菌高D. 随机的,没有原因【解析】在土壤中的微生物,大约70%90%是细菌,比真菌多,所以为了确保获得的菌落数在30300之间,测土壤中细菌的数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,故选C。11
7、下列关于高中生物学实验的叙述,正确的是( )A在制备果酒和果醋的实验过程中都要持续通入氧气B分离土壤中不同种类的微生物需采用相同的稀释度C选择过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验的理想材科D将DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热在制备果酒时需密闭培养,制果醋时才需要持续通入氧气,A错误;分离土壤中不同种类的微生物需采用不同的稀释度,B错误;过氧化氢在高温下可自发分解,无法利用过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验,C错误;将DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热,D正确。本题考查生物学实验等知识。12下列关于灭菌和消毒的理解不正确的是A灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞
8、、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是相同的C用酒精擦拭双手只能消毒,不能起到灭菌作用D常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等【答案】B灭菌是指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。A正确。消毒是指用较为温和的理化因素仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,不包括芽孢和孢子,因此实质是不相同的,B错误。用酒精擦拭双手属于消毒,C正确。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等,D正确。灭菌和消毒13微生物的生长包括四个时期,其中微生物的增长接近“J”型增长的是( )A调整期B对数期 C稳定期 D衰亡期【解析】:在微生物生长的分调整期:其特点是代谢活跃,
9、细胞体积显著增大,大量合成酶、ATP等,调整期的长短与菌种和培养条件有关;对数期:其特点是代谢旺盛,细胞形态生理特征稳定,常作菌种(缩短培养周期)和科研材料,微生物呈几何级数增长,接近“J”型增长;稳定期:特点是因营养不足、有害物质积累、PH值的变化导致细胞分裂速率下降,死亡率升高,死亡率繁殖率,有芽孢产生,细胞内有大量代谢产物积累,通过连续培养可延长稳定期、缩短培养周期,并提高代谢产物的产量;衰亡期:死亡率繁殖率,细胞出现多种形态,甚至畸形,细胞开始解体释放代谢产物。14夏天,煮沸过的肉汤很快就会腐烂变质,主要原因是A. 蛋白质被破坏 B. 细菌大量繁殖C. 肉汤中水分过多 D. 空气使肉氧
10、化分解【解析】夏天,煮沸过的肉汤的温度等环境条件适宜,肉汤中有丰富的营养,导致微生物大量繁殖,有机物被分解而腐烂变质,故选B。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等;有机物腐烂的实质是指细菌等微生物大量繁殖导致有机物被分解的过程。15微生物培养是微生物工程中的基础技术,下列相关叙述正确的是A培养基中并不都必需添加碳源或氮源B平板划线法常用于微生物的分离与计数C病毒和细菌的培养基成分基本相同D配制牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后还需调pH对于某些自养型微生物来说,培养基中并不都必需添加碳源或氮源,如硝化细菌的碳源就是二氧化碳,A项正确;平板划线法常用于分
11、离纯化菌落,稀释涂布平板法是用于计数的,B项错误;病毒无细胞结构,不能用培养基培养,只能寄生于活细胞中生存,C项错误;配制牛肉膏蛋白胨培养基时先调pH再灭菌,D项错误。16“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段,下列有关技术中不能筛选成功的是( )A在全营养的LB培养基中,筛选大肠杆菌B在以尿素为唯一氮源的固体培养基中,筛选能够分解尿素的微生物C用纤维素为唯一碳源的培养基,筛选能分解纤维素的微生物D在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体植物在全营养的LB培养基中,几乎所有细菌都能生长,不能筛选大肠杆菌;A错误在尿素固体培养基中,只有能分解尿素的微生物才能生长,不能分解尿素的微生物因缺
12、乏氮源不能生长,能够筛选分解尿素的微生物;B正确用纤维素为唯一碳源的培养基,只有能分解纤维素 的微生物才能生长,不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长,能筛选分解纤维素的微生物;C正确在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体植物;D正确本题的知识点是尿素固体培养基、纤维素为唯一碳源的培养基、加入氯化钠的高盐培养基的选择作用,主要考查 学生对选择培养基的理解与运用17(2013惠州模拟)下列说法正确的是( )A. 从落叶丰富的土壤中筛选能分解纤维索的细菌B. 家庭利用酵母菌制作腐乳C. 用红色西瓜汁作还原糖鉴定的替代材料D. 观察线粒体时,利用甲甚绿染液将线粒体染成绿色,再用显微镜观察本
13、题是纤维素分解菌的分离实验,腐乳制作,还原糖鉴定实验,观察线粒体的实验几个实验的综合性题目,可以根据选项涉及的每个实验的具体内容回忆相关知识点,分析判断选项解:A、分解纤维素的菌生活在含纤维素丰富的地方,落叶落叶丰富的土壤中纤维素丰富,从中能筛选能分解纤维索的细菌A正确B、制作腐乳的主要菌种是毛霉,不是酵母菌B错误C、红色西瓜汁对砖红色沉淀由遮蔽作用,不能用红色西瓜汁作还原糖鉴定的替代材料C错误D、观察线粒体时,利用健那绿染液将线粒体染成蓝绿色,再用显微镜观察D错误故应选A点评:本题的知识点是筛选纤维素分解菌的土壤取样,腐乳制作的菌种,鉴定还原糖的取材原则,观察线粒体所用的试剂,主要考查 学生
14、对基础知识的 掌握程度和综合运用的能力18下列有关生物技术的说法,正确的是A. DNA粗提取时,用体积分数为95%的冷却酒精进一步纯化DNAB. 制作果醋时应避免通入空气以保证有关菌种正常代谢C. 制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免杂菌的影响D. 测定土壤中能分解尿素的细菌数目,应采用平板划线法【解析】DNA粗提取时,用体积分数为95%的冷却酒精进一步纯化DNA,醋酸菌是好氧菌,果酒制作应反复冲洗葡萄去除污物,测定土壤中能分解尿素的细菌数目,应采用稀释涂布平板法。所以A选项正确。19据报道,一些日本人平日并没有饮用任何酒精饮料,却经常呈醉酒状态,后经抗生素治疗,很快恢复了健康。经查这些人肠道里含有
15、大量的:A 乳酸菌 B 酵母菌 C 大肠杆菌 D 硝化细菌【解析】本题考查的知识点:某些特殊体质的人体内能进行产生酒精的无氧呼吸、抗生素主要用于能杀灭细菌、人体消化道内本来就存在一个小的生态系统、其中的生物与人之间的关系一直处在一种动态平衡之中。此题将动物生理(人)与微生物代谢结合在一起。利用了一个在人体内很少出现的生理情景考查了学生的知识迁移能力和综合能力。20 下列对菌落的表述不正确的是A. 每个菌落都是由多种细菌大量繁殖而成B. 各种霉菌在面包上生长形成的不同颜色的斑块即为菌落C. 噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解,菌落变得透明D. 细菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同【解析】本题考查
16、的是微生物的有关内容。菌落是微生物子细胞群,有的菌落是由一种细菌大量繁殖而成,A错。故本题选A。21下列说法错误的是 ( )A研究细菌群体生长规律时要定期取样测定培养基里的细菌群体的生长情况B微生物含有丰富蛋白质,通过发酵获得的大量微生物的菌体就是单细胞蛋白C环境条件的变化不仅影响微生物的生长繁殖,也会影响微生物的代谢途径D酶活性的调节机制是通过代谢产物致使酶的结构发生不可逆性变化来实现的【解析】本题考查的是微生物生命活动的有关内容。酶活性的调节机制是代谢过程中产生的物质与酶结合,导致酶的结构产生变化.但这种变化是可逆的,当代谢产物与酶脱离时,酶结构便会复原,又恢复原有的活性。D错,故本题选D
17、。22下列关于统计菌落数目的方法的叙述,不正确的是( )A采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数B当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌,但前者不能用来计数D在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果A、采用平板计数法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的,所以往往少于实际的活菌数,A不正确;B、当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落,B正确;C、平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌,但前者不能用来计数,C正确;D、在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则
18、应以它们的平均值作为统计结果以减小实验误差,D正确菌落数目的统计23幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的螺旋状短杆菌,具有强的脲酶活性,是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要致病原因。下列关于幽门螺杆菌的说法中,正确的是( )A. 用健那绿染液对其进行染色,可以看到其细胞质被染成绿色B. 储存其遗传物质的主要场所是拟核,该菌含有质粒,可以为基因工程提供载体C. 该菌合成和加工蛋白质所涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体等D. 该菌菌体表面存在多种抗原成分,可刺激宿主T淋巴细胞产生多种抗体【解析】幽门螺杆菌为原核生物,其细胞中不含线粒体,因此不能被健那绿染成绿色,A错误;幽门螺杆菌为原核生物,储存其遗
19、传物质的主要场所是拟核,该菌含有质粒,可以为基因工程提供载体,B正确;幽门螺杆菌为原核生物,其细胞中不含内质网、高尔基体,C错误;该菌的宿主不是T细胞细胞,且只有效应B细胞能产生抗体,D错误【考点定位】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同。【名师点睛】真核细胞和原核细胞的比较:24在分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接种(图1)、培养结果(图2)如下图。有关叙述错误的是A. 接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C. 接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D. 图1中a区域为划线的起始位置一般采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,A项正确;菌液经过连续划线,菌液中的
20、菌体会越来越少,最终会获得单个细菌形成的菌落,B项正确;每次划线前后都需要将接种环灼烧灭菌,因此按照图中划线顺序(dcba),整个划线过程需要对接种环灼浇5次,C项正确;每次划线的菌种来自上一区域的末端,因此划线的起始区域菌落最多,由图乙可推知,图甲中的d区域菌落多,为划线的起始位置,D项错误。本题考查微生物的实验室培养的相关知识,意在考查学生能从题图中提取有效信息并结合这些信息,运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确结论的能力。25下表资料表明在各种培养基中细菌的生长状况(SCM为简单培养基;U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不
21、同物质),据表推测细菌自身不能合成的物质最可能是(说明:“+”表示能正常生长,“”表示不能生长)A. U B. V C. Y D. Z从表格中不同培养基中细菌生长情况可以看出,凡是缺少Y的培养基中,细菌都不能正常生长,因此,细菌不能合成的物质可能是Y。微生物的培养基。本题巧妙的利用了表格进行分析,对学生综合能力进行了考查。二、非选择题26纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物产生的纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,因为它们能产生纤维素酶。根据相关知识回答问题:(1)在微生物培养时,要获得纯净培养物的关键_;实验室中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。(2)纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种
22、组分,其中_酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。(3)在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前可以通过_增加纤维素分解菌的浓度。(4)在含纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红可以与纤维素形成_复合物。当纤维素被分解后,与刚果红染色的产物无法形成,用含刚果红的该培养基培养纤维素分解菌时,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的_。常用的刚果红染色法有两种,其中一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,这种方法的缺点之一是加入刚果红溶液会使_。【答案】 防止外来杂菌的入侵 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 葡萄糖苷酶 选择培养 红色 透明圈 菌落之间发生混杂本题考查分解纤维素的微生物的分离相关知识,意在考查考
23、生的理解能力。纤维素的单体是葡萄糖,纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别,能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。(1)在微生物培养时,要获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵;实验室中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。(2)纤维素酶是一种复合酶,至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,其中葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。(3)在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前可以通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度。(4)在含纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红可以与纤维素形成红色合物。当纤维素
24、被分解后,与刚果红染色的产物无法形成,用含刚果红的该培养基培养纤维素分解菌时,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。常用的刚果红染色法有两种,其中一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,这种方法的缺点之一是加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂。土壤中能分解纤维素的微生物的分离和鉴定27【生物选修I:生物技术实践】下图是分离、纯化及保存枯草芽抱杆菌菌株的过程示意图:将土壤表层土稀释液煮沸巧分钟(枯草芽抱杆菌的芽抱不会失去活性)静置5分钟后获得样品,进行如下操作:请回答下列问题:(1)可知,除用选择培养基外,还有_起到筛选作用。(2)上图的划线操作中,培养基从物质状态分类上属于_,接种环
25、用_法进行灭菌,划线过程中第一区和最后一区的划线_(能/不能)相连。(3)用稀释涂布平板法在5个培养基平板上,均接种稀释倍数为104的样品液0.1ml,培养一段时间后,平板长出来的菌落数分别为13. 160, 532, 175和187。每毫升样品中的细菌数量为_个。(4)用上述方法统计出的菌落数往往比样品中活菌的实际数目_,原因是_。【答案】 煮沸 固体培养基 灼烧灭菌(灼烧) 不能 1.74107 少 两个或者多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落微生物的接种方法:平板划线法和稀释涂布法。(1)平板划线操作:挑取他含菌样品:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。划A区:将
26、平板倒置于煤气(酒精)灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上,仍留在煤气灯旁),右手拿接种环先在A区划34条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完A区后应立即烧掉环上的残菌,以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时,左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内),以防止杂菌的污染。划其他区:将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下,并使B区转到上方,接种环通过A区(菌源区)将菌带到B区,随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线,D区的线条应与A区平行,但划D区时切勿重新接触A、B区,以免极该两区中浓
27、密的菌液带到D区,影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。等平板凝固后,将平板倒置。(2)稀释涂布法:是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,在适宜条件下培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。能够测定样品中活菌数的方法是:稀释涂布平板法。(1)枯草芽抱杆菌的芽抱耐高温,所以煮沸可以杀灭枯草芽抱杆菌的芽抱以外的杂菌,起到选择作用。(2)平板划线法用的是固体培养基,划线前需要用灼烧的方法对接种环灭菌。划线时要避免最后一区的划线与第一区线连,因为最后一区是细菌最稀少的,而第一区是细菌最致密的,如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果。(3)根据题干信息,五个数值中13和532相差太大,不予计算,所以每毫升样品中的细菌数量=平板上菌落数的平均值体积稀释倍数=(160+175+187)31040.1=1.741
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