轮状病毒腹泻患儿心脏损伤的相关因素Word格式.docx

1、L-1 ;AST异样者36例（82%），其中24例（55%）为7831466nkat&L-1 ，4例（9%）为15102075nkat&L-1 ，7例（16%）为26336800nkat&L-1 .腹泻、脱水与酶学增高无显著相关，发烧程度与之紧密相关.检测到病毒血症4例，其中血浆中1例，外周血单个核细胞中3例. 结论 在RV腹泻一般人群中也可能显现肠道外感染，心脏可能是受损器官之一.妥帖处置腹泻脱水大量补液与潜在心功能低下之间的矛盾是十分必要的. Keywords:rotavirus;infection;heart;viremia Abstract:AIM To investigate the

2、 possibility of myocardial involvement in children with rotavirus（RV）diarrhea and its association with clinical manifestations and viremia resulting from RV Levels of creatine kinase-MB（CK-MB）and aminotranferase（AST）in the serum of children with RV diarrhea were measured and multi-factor analysis wa

3、s performed to explore the correlation between changes in CK-MB level and the clinical genome of RV from blood serum and mononuclear cells were tested with reverse-nest polymerase chain For CK-MB，out of the44children with RV diar-rhea，25（57%）were observed abnormal in terms of the serum of these25cas

4、es，the values of22（ac-counting for50%of the total cases）ranged from282nkat&L-1 to498nkat&L-1 and3（accounting for7%of the total cases）ranged from650nkat&L-1 to1300nkat&L-1 .For AST，out of the44children with RV diarrhea，36（82%）were observed abnormal in the terms of the serum of the36cases，the values o

5、f24（accounting for55%of the total cases）ranged from783nkat&L-1 to1466nkat&L-1 ，4ranged from1510nkat&L-1 to2075nkat&L-1 and7（16%）ranged from2633nkat&L-1 to6800nkat&L-1 .Neither di-arrhea nor dehydration was shown to co-relate significantly with the variety of CK-MB and AST levels，while significant co

6、rrelation between fever and the changes in CK-MB levels was was found in4cases from44，out of which one was detected in serum and the other3ones，in mononuclear RV may diffuse from in-testine to other systems and organs in common children with rotavirus diarrhea and the heart may be one of the organs

7、to be must be taken against the contradic-tion between fluid replacement for dehydration and the poten-tial cardiac hypofunction. 0 引言 最近几年来，轮状病毒（RV）肠道外感染致使全身多脏器损伤的报导慢慢增多1，2 .RV肠道外感染的发生概率和发生机制、易侵犯的脏器及转归、与RV胃肠炎死亡病例的关系等问题引发了广大临床工作者的极大关注3 .鉴于国内外尚未见一般RV腹泻患儿RV感染与心脏关系的报导，咱们于RV腹泻流行顶峰期观看了该组患儿CK-MB，AST的转变，分析

8、了该指标与相关临床表现之间、病毒血症等的关系，试图探讨在RV腹泻一般患儿肠道外感染存在的可能性及其可能受累的器官，为临床诊治提供依据. 1 对象和方式 对象 1998-11/12本院就医的急性腹泻患儿44例，年龄6mo2a，临床表现符合急性RV肠炎的诊断标准，大便经ELISA检测RV阳性. 方式 采取患儿血清，由本院查验科专业人员检测CK-MB，AST值，仪器为AU-800血生化仪.采取患儿急性期静脉血，10g&L-1 EDTA抗凝.全血以1000r&min-1 离心5min，采取上层血清保留.血细胞以生理盐水稀释后，加入淋巴细胞分离液，水平离心机2000r&min-1 ，离心20min.取中

9、间淋巴细胞白膜层，生理盐水洗涤充分后1000r&min-1 ，离心10min，共3次.取淋巴细胞白色沉淀，加入细胞冻存液调整细胞数为109 &L-1 ，液氮保留.取全数患儿血清44例，和15例ALT异样的患儿的淋巴细胞14例进行PCR检测（1例ALT轻度增高患儿因采到血量过少而未能分离淋巴细胞，即结果中血清RV阳性者）.PCR检测参考文献设计内外引物4，5 .外引物:P（5GGCTTTAAA AGAGAGAATTTC-CGTCTGG3），P（5GGTCACATCATACAATTC TAATCTAAG3），内引物:P（5GTATGGTATT GAATATACCAC3），P（5GATCCTGTTG

10、GCCA TCC3）.这两对引物扩增片段别离为1062bp和342bp.采取胍-酚一步法提取患儿血清中RV总RNA.反转录4830min，第1次PCR循环9340s，4840s，7440s，共30圈.第2次PCR循环按9340s，7240s，7240s，共30圈.将终末产物于20g&L-1 琼脂糖凝胶电泳100V10min，紫外灯下观看有与阳性对照位置相同的342bp荧光带即为阳性.阳性标本重复检测证明.实验从RNA提取开始均设阳性对照组（Wa，YO，S2株）、阴性对照组（正常人、乙肝、丙肝、结核患者血清）和环境对照和污染对照，并设置严格的质量操纵和质量保证体系.判定标准:心脏损伤依照CK-M

11、B升高程度分为正常组，（正常值1倍组），正常值2倍组;发烧38为轻度，38以上为中重度;腹泻少于10次&d-1 为轻度，多于10次&d-1 为重度;脱水程度由固定专业人员判定;大便排毒ELISA检测+ 为轻度， 为重度，由固定专业人员检测.统计学处置依据不同查验结果，别离用2 查验或校正2 查验. 2 结果 RV腹泻患儿心肌酶的水平 在44例RV腹泻患儿中，CK-MB正常者（正常值<267nkat&L-1 ）19例（43%），异样者25例（57%）.其中达正常值1倍以上者22例（50%），此组范围在282498nkat&达正常值2倍以上者3例（7%），此组范围在6501300nkat&L

12、-1 .AST正常者（正常值&750nkat&L-1 ）8例（18%），异样者36例（82%）.其中达正常值1倍以上者24例（55%）此组范围在7831466nkat&达正常值2倍以上者4例（9%），此组范围在15102075nkat&达正常值3倍以上者7例（169%），此组范围在26336800nkat&L-1 . RV腹泻患儿CKMB升高与有关临床表现的关系 统计学处置提示，CK-MB升高与发烧程度有显著相关，发烧程度越重，CK-MB异样的概率越高，程度越重;与其他因素相关无显著性（Tab1）.表1 RV腹泻患儿CK-MB水平与临床表现的关系 病毒血症 4例阳性，其中44份血清中1例阳性，

13、14份单个核细胞中3例阳性，分属四个患儿.血清RV阳性者未能搜集到单个核细胞进行检测. 3 讨论 多种病毒可侵犯心脏并造成损伤6-8 .据不完全统计，全世界RV腹泻死亡的婴幼儿每一年达800000之多，RV感染引发猝死也有报导.其死亡缘故除严峻水电解质和酸碱平稳紊乱外，是不是尚存重要脏器损伤一直是国内外临床工作者关注的问题.RV腹泻引发心肌炎的病例已多有报导9-11 .在RV腹泻患儿中不仅发觉心肌酶谱增高及心电图的改变9 ，提示存在心肌受损，姚英民等3 还在对1例RV腹泻发生全身感染死亡患儿的尸检中发觉，该患儿部份心肌细胞颗粒变性，同时伴有间质性肺炎、肺水肿和出血，进一步有力地支持了RV感染时

14、心肌可能受累这一观点.Tsinzerling等12 也曾在3例成人RV感染死亡的病例，发觉存在心脏等多脏器受累. 为了排除酶学检查中非特异性因素的干扰，咱们选择了CK-MB，该酶几乎完全来自于心肌，受其他脏器阻碍甚微，是人们公认的心肌特异性酶学指标，且在心肌损伤的初期具有反映迅速等特点.将CK-MB配合AST指标做了进一步伐查，其结果与上述资料结果相吻合，证明在部份RV腹泻患儿中的确心肌酶释放增加.将CK-MB与腹泻相关临床表现进行多因素分析，结果腹泻、脱水等因素与之无显著相关，提示RV肠炎和水电解质紊乱不是引发心肌酶升高的要紧缘故，可能还有其他阻碍心脏的因素存在.同时咱们注意到，在CK-MB

15、升高的患儿中，绝大多数酶学改变发生在发烧后第12d，经相关分析显示CK-MB升高与发烧程度紧密相关. 众所周知，单纯发烧，尤其发烧12d一样不足以使心肌酶释放增加.许多学者以为RV通过病毒血症造成肠道外脏器的感染;病毒血症又恰恰多发生在发烧初期，而且也多次在检测肠道外脏器感染的同时被检出，因此咱们疑心病毒血症可能与初期较高程度发烧，和心肌酶升高有关.为了证明这一推测，咱们了采取了44例RV腹泻患儿的外周血，以灵敏而特异的反转录-套式PCR方式直接检测血清中的RV RNA基因组;鉴于曾在1例显现脑炎的RV腹泻患儿单个核细胞中和RV腹泻小鼠肠系膜淋巴结巨嗜细胞中检出RV13，14 ，又借鉴甲肝、乙

16、肝等病毒可由淋巴细胞携带的特点15，16 ，对酶学增高的患儿的淋巴细胞进行了PCR检测.结果在国内第一次检出病毒血症4例，证明了在一般RV腹泻患儿中的确存在着RV病毒血症.此4例患儿CK-MB、AST均成不同程度升高，因此咱们疑心其酶学异样可能与RV经由病毒血症抵达心脏有关.但由于门诊采取标本困难，少数几个患儿未能进行淋巴细胞分离检测，因此未对病毒血症和心肌损伤的关系进行统计学研究，尚不能提供病毒血症与心肌损伤之间的关系. 咱们的初步伐查结果提示，在RV腹泻的一般人群中也可能存在RV肠道外感染，心脏是受累脏器之一.警戒在RV腹泻急性期、尤其是发烧程度较重的部份患儿中存在不同程度的心肌损伤这一现

17、象，妥帖处置心肌损伤所致的心肌收缩潜力低与腹泻需大量补液这一矛盾，必将对减少RV感染救治中的死亡率和并发症具有重要意义.造故意肌酶增高、腹泻初期 发烧等的缘故仍有待于深切探讨. 参考文献:1Li N，Yao extraintestinal infectionreviewI.Guowai Yixue Erke Fence（Foreign Med Sci Section Pediatr），1999;26:253-256. 2 Li infection and immune of rotavirus reviewI.Guowai YixueErkeFence（Foreign Med Sci Sect

18、ion Pediatr），1998;25:145-147. 3Yao YM，Qiu HM，Zhao infection and pathology change resulting from rotavirus J.Zhonghua Linchuang Shiyan He Bingduxue Zazhi（Chin J Exp Clin Virol），1998;12:389-390. 4Gouvea V，Glass RI，Woods P，Taniguchi K，Clark HF，For-rester B，Fang chain reaction amplification and typing o

19、f rotavirus nucliec acid from stool specimenJ.J Clin Microbiol，1990;28:276-282. 5Flores J，Sears J，Schael IP，White L，Garcia D，Lanata C，Kapikian of human rotavirus serotype by hy-bridization to polymerase chain reaction-generated probes de-rived from a hyperdivergent region of the gene encoding outer

20、capsid protein VP7J.J Virol，1990;64:4021-4024. 6Wang XM，Zhang GC，Xu DL，Han between CMV，HSV，TOX infection and congenital heart diseasesJ.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1999;20:753-755. 7Zhang GC，Xu DL，Wang XM，Zhang XF，Qian XH，Zhang FY，Li diseases spectrums related with human par-vovi

21、rus B19infection in ChinaJ.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1999;495-498. 8Wang XM，Zhang GC，Han MY，Xu of par-vovirus B19infection in paraffin embedded cardiac tissues of con-genital heart disease by nested PCRJ.Di-si Junyi Daxue Xue-bao（J Fourth Mil Med Univ），1998;19:271-273. 9Wang Q，

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