浅论亚低温对SAH大鼠rCBF及死亡率的影响Word文档格式.docx

1、 死亡率;亚低温Abstract：Objective To study the effects of mild hypothermia on regional cerebral blood flow （rCBF） and mortality rate within 24 hours after subarachnoid hemorrhage onSD rats were used as experimental animal and were respectively divided into normal thermal group and hypothermal group. Anteri

2、or cerebral artery perforation method was used to establish SAH rat model. Rats of hypothermia group were put onto ice blanket to degrade body temperature to （32） and automatically rewarmed under room temperature after 3 hours. rCBF of each group was determined in 2 hours after SAH. Calculate 24-hou

3、r mortality rate in eachIn normal thermal group, rCBF was significantly decreased in 2 hours after SAH and the mortality rate is % in 24 hours. In hypothermal group, rCBF was also significantly decreased in 2 hours but to obviously lower extent compared with normal thermal group and with a mortality

4、 rate of %.Conclusions Hypothermic therapy could significantly increase rCBF and reduce the mortality rate in experimental SAH rats.Key words：subarachnoid hemorrhage; regional cerebral blood flow; mortality rate;Mild hypothermia亚低温（3035 ）作为一种较为成熟的治疗手段已逐渐被越来越多的临床医师所接受。亚低温治疗对脑缺血、脑损伤有保护作用,且副作用轻微1-3,但目前

5、主要应用于对颅脑外伤的治疗, 很少应用于治疗出血性脑血管疾病的治疗。本研究旨在通过动物实验探讨亚低温治疗对蛛网膜下腔出血（SAH），大鼠局部脑血流量（rCBF）和死亡率的影响。1 材料和方法材料实验动物SD大鼠雌雄各半,34月龄,体重300350 g,由辽宁医学院实验动物中心提供。大鼠随机分为两组:常温组36 只,穿刺法制作SAH模型,常温处理;亚低温组36 只,造模后亚低温处理,3 h后复温。术后2 h测定局部脑血流量（rCBF）,计算各组24 h内大鼠死亡率。实验仪器立体定位仪（Narishige, Tokyo, Japan）;K90牙科台式电钻车（浙江宁波医疗器械厂）;激光多普勒血流计（

6、Perimed,瑞典）;显微手术器械（辽宁医学院分子生物学教研室）。方法蛛网膜下腔出血模型的建立10%水合氯醛麻醉大鼠（300 mg/kg）,立体定向仪固定头部,取颈部正中切口切开皮肤,在显微镜下暴露左侧颈总动脉（CCA）主干及分叉处,显露左侧颈内动脉（ICA）和颈外动脉（ECA）,分离颈外动脉近分叉处分支,包括甲状腺上动脉和咽升动脉等,用双极电凝器电凝离断,电凝翼腭动脉,于ECA远心端结扎并剪断,拉直ECA使其与ICA成一直线。将3-0单丝尼龙线（长约5 cm,前端用手术刀片切成斜面）经ECA导入ICA,用显微手术镊将进入颈内动脉的尼龙线继续插入,当进至翼腭动脉超始部时,轻抬颈外动脉使此处的

7、弯曲消失,以利尼龙线顺利通过。向远端继续插入尼龙线至颈内动脉颅内段,有阻力感后再插入2 mm左右刺破willis环,造成蛛网膜下腔出血,迅速将尼龙线拔出,整个过程不超过30 s。王宝忠,等：亚低温对SAH大鼠rCBF及死亡率的影响辽宁医学院学报 2008年8月，29（4） 亚低温处理亚低温组在SAH后10 min将大鼠放置冰毯上降温,15 min内将体温降至（32）。如体温过低用鹅颈灯加温,亚低温3 h后在室温下自动复温。大鼠体温采用温度电极连续监测肛温。对照组及常温组肛温维持在（37） 。局部脑血流量检测穿刺手术前大鼠俯卧固定,取颅顶正中切口,于冠状缝旁5 mm处电钻钻1个直径约3 mm的平

8、底小孔, 用另一立体定向仪的微操纵臂将激光多普勒血流计（LDF）,LDF探头垂直置放于硬脑膜上,LDF探头与LDF血流仪相连,通过微机屏幕连续记录前后前脑局部脑血流量（rCBF）。LDF探头经固定得到合适的rCBF信号,在整个实验过程中保持探头的位置和深度不变。死亡率观察统计各组大鼠在24 h内的死亡率,分为4个时间段:1 h;2 h;4 h;7 h。统计学处理数据以均数标准差（s）表示,应用软件系统分析,应用方差分析及q检验进行统计学处理。死亡率比较采用2检验。2 结 果模型验证测定实验相关指标后，各组大鼠行颅脑解剖观察, 见实验组大鼠均在蛛网膜下腔中有弥漫分布的血液及血凝块,主要分布于前颅

9、窝、蝶鞍处及后颅窝,覆盖脑底部的主要血管,证实大鼠SAH模型制作成功。对照组未发现SAH现象,所有动物均未发现脑实质的出血或机械损伤。局部脑血流量变化对照组在rCBF无明显变化。常温组及亚低温组在穿刺后rCBF即显着下降。常温组穿刺后10 min时达术前值的%,在穿刺后20 min时达术前的%,随后rCBF呈缓慢回升的趋势,整个观察时间内维持在低水平。亚低温组刺后10 min时达术前值的%,在穿刺后20 min时达术前的%,随后rCBF呈缓慢回升的趋势,整个观察时间内维持在低水平,至穿刺结束后2 h,为术前值的%,rCBF下降水平显着少于常温组（），见图1。图1 两组大鼠2h内局部脑血流量改变

10、亚低温治疗对SAH大鼠死亡率的影响常温组总死亡率为%,较亚低温显着增高,以SAH后23 h死亡最高,占总死亡率的%;亚低温组死亡2 只,分别在SAH后25 min及150 min时死亡（见表1）。对两组大鼠死亡情况进行行列表的2检验分析示，差异具有显着性。常温组与对照组比较使用2分割法进行分析示结果有显着性差异（见表2）。表1 两组大鼠24 h内死亡情况组别n死亡时间（h）1247常温组361643亚低温组361100表2 两组大鼠死亡率比较组 注：2=，P=3 讨 论蛛网膜下腔出血（SAH）是一种常见的出血性脑血管疾病,其死亡率及致残率较高4,5,除了SAH本身的损害外,脑水肿等并发症导致的

11、病理性连锁反应及叠加效应均是造成死亡的重要原因。SAH后可引起脑血管痉挛和局部脑血流量的下降,使该组织缺血、缺氧,处在无氧代谢状态下,ATP耗尽,细胞膜功能发生障碍,钠、钾、钙、镁等离子异常转移,钠、水细胞内潴留和脂肪过氧化反应增强,自由基产生,导致细胞内水肿。脑组织受损后,脑组织内白三烯增加,直接使内皮细胞收缩,内皮细胞间隙增加,使血脑屏障破坏,通透性增强,形成脑水肿。国内外研究结果表明6,7,亚低温的脑保护作用机制包括下列几个方面:（1）降低脑氧耗量,维持正常的脑血流和细胞能量代谢,减轻乳酸堆积,脑细胞能量完全依赖于血流提供氧和葡萄糖,实验表明亚低温能明显降低能量代谢率,使损伤后的脑组织A

12、TP能量维持在正常范围。（2）抑制白三烯生成,保护血脑屏障,减轻脑水肿及降低颅内压。（3）抑制颅脑损伤后乙酰胆碱、儿茶酚胺以及兴奋性氨基酸等内源性有害因子的生成和释放,减少对脑组织的损害。（4）减少钙离子内流,阻断钙对神经元的毒性作用,并调节调钙蛋白激酶活性和蛋白激酶C的活力。（5）减少脑细胞结构蛋白破坏,促进脑细胞结构和功能修复。（6）减轻弥漫性轴索损伤和脱髓鞘改变,促进网状上行激动系统功能的恢复。本实验采用大脑前动脉穿刺法构建SAH动物模型,并探讨亚低温对SAH后大鼠rCBF和死亡率的影响。结果显示:常温组24 h内病死率为%,而亚低温组病死率为%,两者具有显着性差异。亚低温组大鼠的rCB

13、F下降较常温组明显减少,说明亚低温治疗能够有效的提高SAH后rCBF并显着降低SAH后动物死亡率。本研究结果表明,亚低温治疗SAH可能通过改善SAH后局部脑血流量,减轻脑水肿等并发症的发生而降低SAH的病死率。亚低温治疗不易引起室颤、低血压、凝血功能障碍等并发症,实施容易。可以预期,随着亚低温治疗机理研究的深入和方法的不断完善,其应用将越来越广,并可为其它脑保护措施的实施赢得时间。【参考文献】 1 Goto Y, Kassell NF, Hiramatsu K, et al. Effects of intraischemic hypothermia on cerebral damage in

14、a model of reversible focal ischemia J.Neurosurgery, 1993, 32（6）:980-984. Shankaran S. Whole-body hypothermia for neonates with hypoxic-ischemic encephalopathy J. N Engl J Med, 2005, 353（15）:1574-1584.Konstas AA, Choi JH, Pile Spellman. Neuroprotection for ischemic stroke using hypothermia J. Neuroc

15、rit Care, 2006, 4（2）:168-178.Gonzlez-Prezof treatment of subarachnoid haemorrhage due to a ruptured cerebral aneurysm J.2006, 17:433-439.Nishizawa S, Zhang JH. Basic research and treatment for cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage: the present and future prospects J. No Shinkei Geka, 2008, 36（2）:121-133.康伟民,只达石,黄慧玲.亚低温在蛛网膜下腔出血急性期的脑保护作用J. 国际脑血管病杂志, 2006, 14（2）:117-119.Thom C, Schubert GA, Schilling L. Hypothermia as a neuroprotective strategy in subarachnoid hemorrhage: a pathophysiological review focusing on the acute phase J. Neurol Res, 2005, 27（3）:229-237