气相色谱常见问题解答Word格式.docx

1、问题4:何时需更换隔垫或衬管 通常比较好的隔垫至少能保证 100 次进样不发生问题. 当色谱特征说明衬管有问题时,需要更换衬管.影响隔垫寿命的因素有注射器尺寸,进样口温度和压力,当然受压力影响的程度比较小.影响衬管寿命的因素通常是样品的清洁度.应该根据仪器维护历史记录来选择色谱需要的特定程序. 问题5:随着进样室温度升高,对分析物分解有影响吗 如果化合物热稳定性差,分析物分解可能会带来一些问题.这在制药工业中比较常见.如果药物或中间体热分解温度低于进样口温度,则分析结果中将出现特殊的峰或与目标分析物发生反应. 问题6:排除色谱柱流失问题的最佳方法是什么 诊断色谱柱是否存在流失问题的最佳方法是第

2、一次在方法条件下安装色谱柱时,做一次空白色谱图,然后将最近的运行和空白运行色谱图对比.如果在空白运行中产生了很多峰,则色谱柱性能改变,这可能是由于载气中含有氧气,也可能是由于样品残留.如果有 GC-MS,则低极性色谱柱的典型流失离子（例如 DB/HP-1 或 5）质/荷比 m/z 将为 207,73,281,355 等,大多数为环硅氧烷. 问题7:如何得知分流/不分流进样口的进样体积不超过进样口衬管反应室的容积 如果不是多次重复进样引起精度问题,则不会经常发生这个问题.精度问题经常是由于不合适的进样体积引起.因为分流进样的进样口流速比较高,样品进出进样口比不分流快得多.同样地,由于溶剂没有时间

3、扩散到衬管外,因此分流模式进样体积要求没有那么严格.实际上,1 微升是比较合适的,由于降低分流比对增大峰面积比增加进样量更有效.然而,不分流进样要求要严格的多,建议使用蒸汽体积计算器估算最终的扩散体积. 问题8:问题9:色谱分析运行时,标样和样品的峰均随时间加宽 ,这正常吗 如果保留时间没有很大区别,只是加宽的峰拖尾,可能表明有活化点.如果加宽的峰是对称的,可能是由于正常的色谱柱损耗和流失.如果峰前伸,说明色谱柱过载. 问题10:为什么在空白运行中出现了我的样品组分峰 有可能是由于样品制备或系统清洁问题.尝试在样品和空白样品制备中使用新溶剂,并在样品清洗瓶中装上新溶剂.尝试使用新的注射器和隔垫

4、.取出并清洗分流出口管路.在未进样情况下运行以观察仅加热色谱柱有无峰出现.问题11:什么原因导致基线不稳和干扰 1. 进样针受污染.清洗进样针;做一浓缩试验,载气线路可能也要清洗. 2. 色谱柱受污染.烘焙色谱柱,限定时间1-2h. 3. 检测器不平衡.检测器一般需要24h才能得到平衡. 4. 在程序升温的时候改变载气流速（在很多情况下为正常现象）. 问题12:什么原因导致过多的基线噪音 3. 检测器不平衡.清洗检测器,通常噪音不是突然增大而是逐渐产生. 4. 污染或载气质量降低.使用高质量的载气或检查气体是否泄露.一般在换载气钢瓶的时候会突然发生. 5. 柱子安装太过.可重新安装. 6. 载

5、气流速不合适.重新设定流速. 7. 与MS,ECD,TCD联用时发生漏洞,查找并消除漏洞即可. 8. 检测器的灯或电子倍增管老化. 问题13:什么原因导致峰形改变 1.检测器响应改变.检查气体流速,温度和设置. 2.样品的浓度改变.检查并检验样品的浓度,样品的蒸发或成分的改变都可能引起. 3. 色谱柱受污染. 问题14:如果分离度下降,如何处理 1.柱温不同.检查柱温. 2.不同的色谱柱的维数和相位.核实色谱柱的特性. 3.改变载气流速. 4.色谱柱受污染,应用溶媒清洗柱子. 5.进样器的改变.检查进样器的设置. 6.样品的浓度或溶解能力的改变.试用一个不同的浓度. 问题15:如果出现分裂峰,

6、如何处理 1.试着改变一下进样方法. 2.改变溶媒,使其成为单一的溶媒. 3.重新安装色谱柱. 4.减小进样温度. 问题16:如果怀疑进样器或载气被污染了,应采用何种检测 1. GC在40-50保持8小时或8小时以上. 2. 运行一个空白分析（开启GC,但不进样）. 3. 收集空白分析的色谱图. 4. 第一个空白分析完成以后立即开始第二次,二者间隔时间不要超过5min. 5. 收集第二次空白分析的色谱图,并与第一次的图谱进行比较. 6. 假如在第一次时,峰图包含了大量的色谱峰,而且基线不稳定,那就暗示了 毛细管柱被污染了（进样器或载气被污染）. 7. 假如两次色谱峰图都包含少数的峰或基线的微小

7、漂移,那就可以假定进样器 或载气是比较干净的.假如 8. 假如两次色谱峰图都包含重大数量的噪音和（或）基线漂移,那通常也就表 明了进样器或载气被污染了. 问题17:保护柱应为多长 比较有代表性的保护柱柱长为0.5-10m.虽然没有确定的长度适合所有的样品,但是以下一些建议也可以参考.假如样品相对来说比较纯净,溶质为极性,保护柱应该在0.5-1.0m之间;若样品相对来说不纯净,保护柱应该适当长些.5-10m长的主要是为了维护单一系统.长保护柱允许使用者减去大约1m而代替整个保护柱安装.问题18.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 关于漂移问题： 温度

8、控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定 泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。 流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合 问题19.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？ 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。 存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子 可能柱超载，减少进样量。问题20.HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足，

9、解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多。调整衰减即可。 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。 检测池中有气泡。解决办法为排气。 记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。 流动相流量不合适。调整流速即可。 检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。问题21.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？ 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理； 比例阀失效，更换比例阀即可； 泵密封垫损坏，更换密封垫即

10、可； 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法； 系统检漏，找出漏点，密封即可； 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。问题22.我最近更换了另一种牌号的ODS柱，虽然分离情况仍可以，但保留时间不能重现，为什么？这是因为被分析物可能具有形成氢键的能力。尽管过去几年来，填料的制造技术有了极大的提高，但不同的厂商的ODS填料表面硅醇基的浓度不同。正是这些硅醇基可能与样品发生相互作用。因此，同一被分析物中的各组分在不同牌号的ODS柱上的相对保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物，如三乙基胺（TEA），将会使硅醇基的成键能力饱和，从而能保证不同牌号柱子上的相对保留时间具有较好的重现性。

11、如分离情况可以，系统稳定，达到系统适用性要求，就不必保留时间的重现。问题23.我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么？柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。 拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查； 把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查； 将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；只用于使用过的柱子。 更换柱子入口筛板，若柱压下降，说

12、明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。问题24色谱双峰产生的可能及判断和处理 HPLC分析中，在色谱柱正常，样品灵敏度足够，分析方法合适，色谱峰在出峰时间较短的条件下（不包括梯度），峰型应对称而尖锐。但是，在对样品了解程度不够，方法不妥，样品处理方法及进样方式不合理下，会出现各种意想不到的问题，而对色谱峰难以作出合理的解释，尤其对于新手更是如此。下面根据本人几年工作的体会，提出一些看法，向同仁指教。色谱双峰指的是明是一种物质，但在色谱图中出现双峰，而表明含二种物质。我将这种情况分为四种原