1、):2、灭菌灭菌灭菌灭菌(sterilizationsterilization):杀灭物体上所有微生物的方法杀灭物体上所有微生物的方法杀灭物体上所有微生物的方法杀灭物体上所有微生物的方法 3、防腐(防腐(防腐(防腐(antisepsisantisepsis):防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法的方法的方法的方法,不一定杀死微生物不一定杀死微生物:杀死物体上或环境中的病原微杀死物体上或环境中的病原微杀死物体上或环境中的病原微杀死物体上或环境中的病原微生物生物生物生物,不能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法不
2、能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法不能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法不能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法第一节第一节 消毒灭菌消毒灭菌一、概念:一、概念:4、无菌(无菌(无菌(无菌(asepsisasepsis):无菌是无菌是无菌是无菌是无无无无活菌的意思,多是灭菌的结果活菌的意思,多是灭菌的结果活菌的意思,多是灭菌的结果活菌的意思,多是灭菌的结果。5、无菌操作无菌操作无菌操作无菌操作:防止细菌进入人体或其它物品的操作技术。热力灭菌法热力灭菌法热力灭菌法热力灭菌法 辐射灭菌法辐射灭菌法辐射灭菌法辐射灭菌法物理方法物理方法 滤过除菌法滤过除菌法滤过除菌法滤过除菌法 超声波杀菌法超声波杀菌法超声
3、波杀菌法超声波杀菌法 干燥和低温抑菌法等干燥和低温抑菌法等干燥和低温抑菌法等干燥和低温抑菌法等 高效消毒剂高效消毒剂高效消毒剂高效消毒剂-含氯、醛类消毒剂含氯、醛类消毒剂含氯、醛类消毒剂含氯、醛类消毒剂 环氧乙烷环氧乙烷环氧乙烷环氧乙烷 等等等等化学方法化学方法 中效消毒剂中效消毒剂中效消毒剂中效消毒剂-含碘消毒剂含碘消毒剂含碘消毒剂含碘消毒剂 醇类(异丙醇)醇类(异丙醇)醇类(异丙醇)醇类(异丙醇)低效消毒剂低效消毒剂低效消毒剂低效消毒剂-季铵盐类季铵盐类季铵盐类季铵盐类 氯已定氯已定氯已定氯已定 高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾 第二节第二节 消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法第二节第二节 消毒
4、与灭菌消毒与灭菌二、物理消毒灭菌法:二、物理消毒灭菌法:(一)热力消毒灭菌法:1、干热灭菌法:焚烧烧灼干烤第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌二、物理消毒灭菌法:2、湿热消毒灭菌法:巴氏消毒法 61.1/62.8 15-30min71.715-30秒 煮沸法1005分钟间歇蒸气消毒法1001530分钟过夜(循环3次)高压蒸汽灭菌法:高压蒸汽灭菌法:最有效的灭菌方法,为一密闭最有效的灭菌方法,为一密闭容器中,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。容器中,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌高压蒸汽灭菌基本原理:高压蒸汽灭菌基本原理:加热密闭容器中水至沸腾产生蒸汽,排尽原锅内
5、的加热密闭容器中水至沸腾产生蒸汽,排尽原锅内的冷空气后,闭阀升压,使水沸点升高,从而导致菌冷空气后,闭阀升压,使水沸点升高,从而导致菌体蛋白质凝固变性失活。体蛋白质凝固变性失活。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌 高压蒸汽灭菌主要对象:高压蒸汽灭菌主要对象:牛肉膏蛋白胨、营养肉汤等培养基、生理盐水、手牛肉膏蛋白胨、营养肉汤等培养基、生理盐水、手术器械及耐高温、湿热的物品。术器械及耐高温、湿热的物品。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌同温度下湿热灭菌较干热效果好的原因:同温度下湿热灭菌较干热效果好的原因:(1)湿热中菌体吸水,蛋白质易凝固,因蛋白质含)湿热中菌体吸水,蛋白质易凝固,因蛋白质含水量
6、增加,所需凝固点降低。水量增加,所需凝固点降低。(2)湿热穿透力明显大于干热。)湿热穿透力明显大于干热。(3)湿热蒸汽有潜热存在,能迅速提高被灭物体的)湿热蒸汽有潜热存在,能迅速提高被灭物体的温度,从而增加灭菌效力。温度,从而增加灭菌效力。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌 高压灭菌几点注意事项:高压灭菌几点注意事项:第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌二、物理消毒灭菌法:(二)电磁波辐射杀菌法:紫外线波长在265-266nm杀菌能力最强,它能干扰DNA复制,导致细菌变异或死亡,但穿透力弱,故只能用于房间空气和物品表面的消毒.1、日光与紫外线:2、电离辐射、电离辐射 包括包括包括包括 和和和和
7、射线,电离射线具有较高的能量,对各种射线,电离射线具有较高的能量,对各种射线,电离射线具有较高的能量,对各种射线,电离射线具有较高的能量,对各种细菌均有致死作用,机制是干扰细菌均有致死作用,机制是干扰细菌均有致死作用,机制是干扰细菌均有致死作用,机制是干扰DNADNA合成、破坏合成、破坏合成、破坏合成、破坏细胞膜、引起酶系统紊乱等,主要用于一次性医用细胞膜、引起酶系统紊乱等,主要用于一次性医用细胞膜、引起酶系统紊乱等,主要用于一次性医用细胞膜、引起酶系统紊乱等,主要用于一次性医用塑料制品消毒,食品、药品等消毒灭菌,而不破坏塑料制品消毒,食品、药品等消毒灭菌,而不破坏塑料制品消毒,食品、药品等消
8、毒灭菌,而不破坏塑料制品消毒,食品、药品等消毒灭菌,而不破坏其营养。其营养。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌3、微波、微波 波长波长波长波长1-1000mm1-1000mm的电磁波,可穿透玻璃、陶瓷和塑的电磁波,可穿透玻璃、陶瓷和塑的电磁波,可穿透玻璃、陶瓷和塑的电磁波,可穿透玻璃、陶瓷和塑料,但不能穿透金属表面。主要用于食品、非金属料,但不能穿透金属表面。主要用于食品、非金属器械、检验室用品等消毒,原理是极性分子摩擦生器械、检验室用品等消毒,原理是极性分子摩擦生器械、检验室用品等消毒,原理是极性分子摩擦生器械、检验室用品等消毒,原理是极性分子摩擦生热,内外升温达到杀毒灭菌的目的。热,内外升
9、温达到杀毒灭菌的目的。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌二、物理消毒灭菌法:(三)滤过除菌法:主要用于不耐高温的血清、抗毒素、抗生素、药液的除菌。第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌三、化学消毒灭法:(一)常用化学消毒剂的种类及用途(二)化学消毒剂的杀菌机制:1、使菌体蛋白变性或凝固;2、干扰微生物的酶系统和代谢;3、损伤细胞膜;种种种种 类类类类常用浓度常用浓度常用浓度常用浓度用用用用 途途途途作用机制作用机制作用机制作用机制1.1.高效消毒剂高效消毒剂高效消毒剂高效消毒剂含氯含氯含氯含氯消毒剂;消毒剂;漂白粉漂白粉漂白粉漂白粉 次氯酸钠次氯酸钠次氯酸钠次氯酸
10、钠 过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸 过氧化氢过氧化氢过氧化氢过氧化氢 戊二醛戊二醛戊二醛戊二醛甲醛(福尔马甲醛(福尔马甲醛(福尔马甲醛(福尔马林)林)林)林)有效氯量有效氯量有效氯量有效氯量:4g/L:4g/L有效氯量有效氯量有效氯量有效氯量:100-:100-1000g/L1000g/L0.2%-1%0.2%-1%3%-25%3%-25%2%2%35%-40%35%-40%饮水消毒饮水消毒饮水消毒饮水消毒皮肤、物体表面、皮肤、物体表面、皮肤、物体表面、皮肤、物体表面、排泄物、污水排泄物、污水排泄物、污水排泄物、污水皮肤、物表面、皮肤、物表面、皮肤、物表面、皮肤、物表面、空气空气空气空气皮肤
11、、物表面、皮肤、物表面、皮肤、物表面、皮肤、物表面、空气空气空气空气医疗器械医疗器械医疗器械医疗器械医疗,防腐医疗,防腐医疗,防腐医疗,防腐氧化作用氧化作用氧化作用氧化作用,蛋蛋蛋蛋白质变性与白质变性与白质变性与白质变性与沉淀沉淀沉淀沉淀,灭活酶灭活酶灭活酶灭活酶类类类类 氧化作用氧化作用氧化作用氧化作用,蛋蛋蛋蛋白质沉淀白质沉淀白质沉淀白质沉淀菌体蛋白质菌体蛋白质菌体蛋白质菌体蛋白质及核酸烷基及核酸烷基及核酸烷基及核酸烷基化化化化常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制(一)种种种种 类类类类常用浓度常用浓度常用浓度常
12、用浓度用用用用 途途途途作用机制作用机制作用机制作用机制2.2.中效消毒剂中效消毒剂中效消毒剂中效消毒剂 乙醇乙醇乙醇乙醇 碘酊碘酊碘酊碘酊 碘伏碘伏碘伏碘伏3.3.低效消毒剂低效消毒剂低效消毒剂低效消毒剂苯扎溴铵(新洁苯扎溴铵(新洁苯扎溴铵(新洁苯扎溴铵(新洁尔灭)尔灭)尔灭)尔灭)氯已定(洗必泰)氯已定(洗必泰)氯已定(洗必泰)氯已定(洗必泰)高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾 70%-75%70%-75%20g20g碘碘碘碘/L75%/L75%乙醇乙醇乙醇乙醇1-2mg1-2mg游离游离游离游离/L/L0.4%-1.6%0.4%-1.6%溶液溶液溶液溶液0.5%-4.0%0.5%-4.0%
13、1-10g/L1-10g/L医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物体表皮肤、黏膜、物体表皮肤、黏膜、物体表皮肤、黏膜、物体表面面面面皮肤、黏膜、物体表皮肤、黏膜、物体表皮肤、黏膜、物体表皮肤、黏膜、物体表面面面面皮肤、黏膜、食具、皮肤、黏膜、食具、皮肤、黏膜、食具、皮肤、黏膜、食具、蔬菜、水果蔬菜、水果蔬菜、水果蔬菜、水果蛋白质变性蛋白质变性蛋白质变性蛋白质变性凝固、干扰凝固、干扰凝固、干扰凝固、干扰代谢代谢代谢代谢第三
14、节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用 皮肤、黏膜、空气、饮水、环境、医皮肤、黏膜、空气、饮水、环境、医疗器械、病人污染物品、病人排泄物与分疗器械、病人污染物品、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌。(具体自己看书)泌物的消毒灭菌。(具体自己看书)影响消毒灭菌效果的因素:影响消毒灭菌效果的因素:1、消毒剂的性质、浓度和作用时间、消毒剂的性质、浓度和作用时间2、细菌的种类与生活状态(、细菌的种类与生活状态(P44)3、温度、温度4、酸碱度、酸碱度5、有机物、有机物第四节第四节 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素第五节 病原微生物实验室生物安全 一、一、生物安全(生物安全(biosafety)即
15、生物技术安全即生物技术安全(safety of biotechnology)指与生物有关指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生的各种因素对社会、经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。态环境所产生的危害或潜在风险。在安全的实验室内使用安全的方法从在安全的实验室内使用安全的方法从事与病原微生物菌(毒)种、样本有关事与病原微生物菌(毒)种、样本有关的教学、检测、诊断、研究等活动,达的教学、检测、诊断、研究等活动,达到保护实验室工作人员和公众健康的目到保护实验室工作人员和公众健康的目的。的。核心是核心是防感染防感染和和防扩散防扩散!二、病原微生物的分类二、病原微生物的分类 根根据据传传染染性性和和危危害害程程度度,病病原原微微生生物物分分为四类:为四类:第第第第一一一一类类类类是是是是指指指指能能能能够够够够引引引引起起起起人人人人
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