药学分子生物学重点Word文档格式.docx

1、帽子 5非编码区 编码区 3非编码区3polyA原核生物的mRNA结构：5非编码区 调控序列编码区终止子 起始调控序列编 码区终止区3非编码区tRNA的二级结构：三叶草形 三级结构：倒L形 功能： 接受氨基酸、携带氨基酸，把氨基酸转运到核糖体上，然后按照mRNA上的密码顺序装配成多肽或蛋白质。rRNA：组成核蛋白体核酸分子杂交的原理：复性（变性的DNA重新恢复成双链的过程称为复性也叫做退火。）反义RNA的作用机制（掌握）： 类反义RNA:直接作用于靶mRNA的S D序列和（或）部分编 码区，直接抑制翻译，或与靶mRNA结合形成双 链RNA，从而易被RNA酶 降解； 类反义RNA：与mRNA的非

2、编码区结合，引起mRNA构象变 化，抑制翻译； 类反义RNA：则直接抑制靶mRNA的转录。 双链RNA诱导诱导RNAi的过程主要分为两个阶段（重点掌握）： 启动阶段 执行阶段 启动阶段：当细胞中由于感染等原因出现双链RNA分子时， 细胞中一种称为Dicer的核酸酶就会识别这些双 链RNA，并将其降解成21-23bp长的小干扰RNA （siRNA），单链siRNA与一些蛋白形成复合体， 构成“RNA诱导的沉默小体”（RISC） 执行阶段：当目标mRNA与RISC中的siRNA完全配对时， RISC就会切割目标RNA，并由细胞中的核酸酶将 其进一步降解，从而抑制目标基因的表达病毒核酸的特点（了解）

3、：（1）病毒只含一种核酸，构成病毒体的心髓。（2）核酸类型多态化（3）分子量小，基因组结构简单，所含基因组数目少（4）病毒基因组核酸复制多样化（5）病毒核酸更易受宿主细胞的影响而发生基因突变和重组（6）有些病毒去除囊膜和衣壳，裸露的DNA或RNA也能感染细胞， 这 样的核酸成为传染性核酸 第二章 染色质、染色体、基因和基因组染色质和染色体的化学成分和组成： DNA:脱氧核糖、磷酸、碱基 组蛋白：碱性氨基酸，带正电，如精氨酸、赖氨酸。 非组蛋白：酸性氨基酸，带负电，如天冬氨酸、谷氨酸。 少量RNA 酶 DNA和组蛋白的含量比较恒定，非组蛋白的含量变化较大，RNA的含量最少。基因的定义：基因的生物

4、学定义:是携带生物遗传信息的结构单位，又是控制 一个特定性状的功能单位。基因的分子生物学定义：指DNA分子中能编码一条多肽链，并且 具有一定长度的片段。严格地说，基因不仅 包含编码蛋白质肽链或RNA的核酸序列，还 包括为保证转录所必须的调控序列。基因组（genome）：是细胞中一套完整单体遗传物质的总和。基因组结构的异同：原核生物真核生物基因组很小基因组庞大复杂，含多种序列成分几乎无蛋白质和核酸结合和蛋白质结合形成染色体有操纵子结构基因家族化，有重复序列基因多连续，有重叠基因（真核细胞病毒除外）基因不连续多顺反子单顺反子以单拷贝和多拷贝两种形式存在第三章、可移动的遗传因子（转座子）和染色体外的

5、遗传因子 转座子（transposon）：原核生物和真核生物基因组中存在着可以从 一个部位转移到另外一个部位的DNA序列，这些序列称为转座子。逆转录转座子（retransposon）:指内部含逆转录酶编码序列，通过DNA RNA DNA方式进行转座，即转座子转录产生相应的RNA，再经过逆转录生成新的转座子DNA并整合到基因组中。质粒（plasmid）:是多数细菌和某些真核生物细胞染色体外的双链环状DNA分子。遗传重组（genetic recombination）:减数分裂时，通过同源染色体的交换和非同源染色体的独立分配，使子代细胞的遗传信息产生了重新组合，这种现象称为遗传重组。同源重组（hom

6、ologous recombination）:指发生在两条双链DNA的同源序列之间，涉及的是大片段同源DNA序列的交换。位点特异重组（site-specific recombination）:指不依赖于DNA序列的同源性，而依赖于能与某些酶相结合的特异DNA序列的重组。简述原核生物转座子的类型及组成特点：IS两端有ITR,只能编码转座酶；类转座子结构同IS，但不能独立存在，仅作为复合转座子的两端组件；复合转座子两端由IS或类IS构成，可编码抗性物质；TnA转座子家族两端为ITR,可编码转座酶、解离酶和抗性物质。解释逆转录病毒与逆转录转座子的区别：2 转录病毒是具有感染能力的病毒颗粒，可以在细胞

7、之间转移；逆转录转座子是宿主DNA基因组的组分，可以在基因组内转座， 但是不能在细胞之间转移。简述质粒DNA特性： 质粒的复制 严密型质粒的复制 松弛型质粒的复制 质粒的不相容性 质粒的转移性 质粒的选择性标记试述大肠杆菌同源重组酶的特点（p92）： RecBCD:具有外切核酸酶活性，序列特异性的单链内切酶的活性和解旋酶活性使DNA产生具有游离末端的单链、ATPase活性水解ATP为解旋提供能量； RecA：有单、双链DNA结合活性，有ATPase的活性，并且促进各种DNA分子进行同源配对或分子入侵，形成同源配对的联合分子； RuvAB：RuvA：识别 Holliday 结构的连接点 RuvB

8、：为分枝迁移提供动力（ATPase） 凭借其解旋酶活性，推动Holliday中间体的分支迁移； RuvC：是一种核酸内切酶-专一性识别Holliday结构的连接点。同源重组与位点特异重组有何不同： 同源重组中DNA链的切断可能是随机的； 位点特异性重组是在某些特异的DNA序列处发生重组。 同源重组后染色体内的DNA序列一般仍按原来的顺序排列； 位点特异性重组中DNA节段的相对位置发生了移动，即DNA 序列发生重排，从而得到不同的结果。Holliday模型的步骤： 1、两个DNA分子单链的同一部位发生断裂； 2、两个断裂的单链的游离末端彼此交换，连接形成holliday连接体； 3、通过分支移动

9、产生同另一分子的互补序列形成异源双链DNA； 4、Holliday交叉的上部或下部旋转180，中间体切开并修复，形成两个双链重组体的DNA。分别为片段重组体和拼接重组体。第4章 DNA 的复制、突变、损伤和修复复制（replication）:遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。半保留复制：DNA生物合成时，母联DNA解开为两条单链，各自作为模板按碱基配对规律，合成与模板链互补的子链。子代细胞的DNA ，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。复制子：两个复制起始点之间的DNA片段。复制叉：DNA分子复制时，复制起点两条链解开成单链状态所形成的Y形结构称为复制

10、叉。使DNA链解离的酶：（1）解旋酶利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。 （2）单链DNA结合蛋白 SSB在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。 （3）DNA旋转酶（拓扑异构酶）改变DNA超螺旋状态、理顺DNA链。DNA聚合酶：原核生物：DNA-pol: 对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补 DNA-pol DNA-pol: 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。 真核生物：DNA聚合酶：合成后随链，引物酶活性 DNA聚合酶：DNA修复 DNA聚合酶:先导链合成 DNA聚合酶：线粒体DNA 的合成 DNA聚合酶：机制不明类似于端粒：真核生物染

11、色体线性DNA分子末端的结构。端粒的结构特点：1、由末端单链DNA序列和蛋白质构成。2、末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短序列。端粒的功能：1、维持染色体的稳定性；2、维持DNA复制的完整性端粒酶的组成：端粒酶RNA；端粒酶协同蛋白；端粒酶逆转录酶影响端粒酶的药物：1、反义核酸；2、核酶；3、逆转录酶抑制剂：3-叠氮胸苷（AZT）线粒体DNA复制：D环复制噬菌体和病毒DNA的复制：滚环复制AZT的作用原理：逆转录酶合成病毒DNA时，AZT掺入到病毒DNA中，由于AZT的3-OH被叠氮取代，所以不能合成3-5磷酸二酯键，使病毒DNA合成终止。（HIV治疗）突变可分为：自发突变；诱发突变

12、突变类型 碱基置换突变 点突变 （转换、颠换） 单点突变 碱基插入（较长） 多点突变 碱基缺失（较长） 移码突变：插入、缺失一个或两个碱基引起阅读框架 的改变 移码突变：是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。根据密码子遗传信息改变分类：同义突变、错义突变、无义突变根据突变表现型对外界环境的敏感性分类：非条件性突变、条件性突变突变型与野生型的变换：正相突变、回复突变突变原因：（一）自发突变（脱氨基、脱嘌呤）（二）诱发突变射线化学诱变剂（）碱基类似物（）氨基嘌呤（）碱基修饰剂（亚硝酸、羟胺、烷化剂）（）插入剂（3）基因的人工诱变DNA 的修复系统： 尿嘧啶糖基酶系统 一、

13、复制修复 错配修复 无嘌呤（AP）修复 光复活修复 二、损伤修复 甲基转移酶修复 切除修复 三、复制后修复 大肠杆菌的重组修复系统 SOS修复光复活修复（原理）：胸腺嘧啶在uv的作用下生成TT二聚体（胸腺嘧啶二聚体），光复活酶在蓝光的照射下激活，是二聚体解离。限制与修饰 限制：限制性内切酶切断外来的DNA 修饰：甲基化酶保护细胞自身的DNA渥曼青霉素的作用机制：（抑制肿瘤细胞）抑制DNA损伤修复的蛋白激酶的活性，DNA的修复功能减弱，增加多耐药细胞对化疗药物的敏感性。第5章 转录 、转录后加工转录（transcription）：生物体以DNA为模板合成RNA 的过程。转录单位：RNA链的生物合成起始于DNA模板的一个特定位点，并在另一位点处终止，这一特定区域称为转录单位。 （位于转录起点到转录终点之间的DNA模板区域。不对称转录：