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现代分子生物学第4版朱玉贤课后思考题答案文档格式.docx

1、一,肺炎双球菌感染实验,1,R型菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒,注入小鼠体内后,小鼠不死亡。2,S型菌落光滑,菌体有多糖荚膜,有毒,注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。3,用加热的方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内,小鼠不死亡; 二,噬菌体侵染细菌的实验:1,噬菌体侵染细菌的实验过程:吸附侵入复制组装释放。 2,DNA中P的含量多,蛋白质中P的含量少;蛋白质中有S而DNA中没有S,所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体的蛋白质,用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体的DNA。用35P标记蛋白质的噬菌体侵染后,细菌体内无放射性,即表明噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部;而用32P标记DNA的噬菌体侵染

2、细菌后,细菌体内有放射性,即表明噬菌体的DNA进入了细菌体内。三,烟草TMV的重建实验:1957年,Fraenkel-Conrat等人,将两个不同的TMV株系(S株系与HR株系)的蛋白质与RNA分别提取出来,然后相互对换,将S株系的蛋白质与HR株系的RNA,或反过来将HR株系的蛋白质与S株系的RNA放在一起,重建形成两种杂种病毒,去感染烟草叶片。 5请定义DNA重组技术与基因工程技术DNA重组技术:目的是将不同的DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。 基因工程技术:是除了包含DNA重组技

3、术外还包括其他可能是生物细胞基因结构得到改造的体系,基因工程是指技术重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术与下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆与表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 6写出分子生物学的主要研究内容。1,DNA重组技术;2,基因表达调控研究;3,生物大分子的结构功能研究-结构分子生物学;4,基因组、功能基因组与生物信息学研究。7.分子生物学的定义答: 广义的分子生物学:蛋白质及核酸等生物大分子结构与功能的研究都属于分子生物学的范畴,即从分子水平阐明生命现象与生物学规律狭义的分子生物

4、学:偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA的复制、转录、表达与调控等过程,当然也涉及与这些过程相关的蛋白质与酶的结构与功能的研究第二章1,染色体具备哪些作为遗传物质的特性?1,分子结构相对稳定;2,能够自我复制,使得亲子代之间保持连续性;3,能够指导蛋白质的合成,从而控制整个生命活动的过程;4,能够产生可遗传的变异。 2,什么是核小体?简述其形成过程。核小体是染色质的基本结构单位,由200bpDNA与组蛋白八聚体组成。形成过程:核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体与由大约200bp的DNA组成的。形成核小体时八聚体在中间,DNA分子盘绕在外组成真核细胞染色体

5、的一种重复珠状结构。 3简述真核生物染色体的组成及组装过程 组成:蛋白质+核酸。组装过程:1,首先组蛋白组成盘装八聚体,DNA缠绕其上,成为核小体颗粒,两个颗粒之间经过DNA连接,形成外径10nm的纤维状串珠,称为核小体串珠纤维;2,核小体串珠纤维在酶的作用下形成每圈6个核小体,外径30nm的螺旋结构;3,螺旋结构再次螺旋化,形成超螺旋结构;4,超螺线管,形成绊环,即线性的螺线管形成的放射状环。绊环再非组蛋白上缠绕即形成了显微镜下可见的染色体结构。4,简述DNA的一、二、三级结构特征。1,DNA的一级结构,就是指4种核苷酸的连接及排列顺序,表示了该DNA分子的化学成分;2,DNA的二级结构是指

6、两条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构;3,DNA的高级结构是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。6,原核生物DNA与真核生物有哪些不同的特征?(1)DNA双螺旋是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的,多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定,一条是5-3,另一条是3-5。(2)DNA双螺旋中脱氧核糖与磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧(3)其两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对 意义:该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征,最有价值的是确认了碱基配对原则,这是DNA复制、转录与反转录的分子基础,亦是遗传信息传递与表达的分子基础。该模型的

7、提出是20世纪生命科学的重大突破之一,它奠定了生物化学与分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石 7,DNA复制通常采取哪些方式。一,线性DNA双链的复制:1,将线性复制子转变为环装或者多聚分子;2,在DNA末端形成发卡式结构,使分子没有游离末端;3,在某种蛋白质的介入下(如末端蛋白,terminal protein),在真正的末端上启动复制。二,环状DNA的复制:1,型;2,滚环形;3,D环形(D-loop)。 8,简述原核生物的DNA复制特点。1,与真核生物不同,原核生物的DNA复制只有一个复制起点;2,真核生物的染色体全部完成复制之前,各个起始点上DNA的复制不能在开始,而在快速生长的原

8、核生物中,复制起始点上可以连续开始新的DNA的复制,变现为虽然只有一个复制单元,但可有多个复制叉;9,真核生物的DNA的复制在那些水平上受到调控?1,细胞生活周期水平调控;2,染色体水平调控;3,复制子水平调控。10,细胞通过哪些修复系统对DNA损伤进行修复?1,错配修复,恢复错配;2,切除修复,切除突变的碱基与核苷酸序列;3,重组修复,复制后的修复,重新启动停滞的复制叉;4,DNA的直接修复,修复嘧啶二聚体与甲基化的DNA;5,SOS系统,DNA的修复,导致突变。 11,什么是转座子?可以分为哪些种类?转座子是存在于染色体DNA上可自主复制与移位的基本单位。转座子可分为两大类:插入序列与复合

9、型转座子。 12,请说说插入序列与复合型转座子之间的异同。插入序列是最简单的转座子,它不含有任何宿主基因,它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分,一般插入序列都是很小的DNA片段,末端带有倒置重复序列; 复合型转座子是一类带有某些抗药性基因的转座子,其两翼往往带有两个或者相同高度同源的IS序列,一旦形成复合转座子,IS序列就不能移动,因为他们的功能被修饰了,只能作为复合体移动。第三章1,什么是编码链?什么是模版链?与 mRNA 序列相同的那条 DNA 链称为编码链(或有意义链) ;另一条根据碱基互补原则指导 mRNA 合成 DNA 链 称为模版链(或反义链) 。2,简述 RNA 转录的概念

10、及其基本过程。RNA 转录:以 DNA 中的一条单链为模板,游离碱基为原料,在 DNA 依赖的 RNA 聚合酶催化下合成 RNA 链的过 程。基本过程:模版识别转录开始转录延伸转录终止。 3,大肠杆菌的 RNA 聚合酶有哪些组成成分?各个亚基的作用如何?大肠杆菌的 RNA 聚合酶由 2 个亚基、一个亚基、一个亚基与一个亚基组成的核心酶,加上一个亚基后则 成为聚合酶全酶。亚基肯能与核心酶的组装及启动子的识别有关,并参与 RNA 聚合酶与部分调节因子的相互作用; 亚基与亚基组成了聚合酶的催化中心,亚基能与模版 DNA、新生 RNA 链及核苷酸底物相结合。 4,什么是封闭复合物、开放复合物以及三元复

11、合物?模版的识别阶段,聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭性复合物;封闭性复合物形成后,此时,DNA 链仍然处于双 链状态,伴随着 DNA 构象的重大变化,封闭性复合物转化为开放复合物;开放复合物与最初的两个 NTP 相结合并在这 两个核苷酸之间形成磷酸二脂键后即转变成包括 RNA 聚合酶、DNA 与新生 RNA 的三元复合物。5,简述因子的作用。1,因子的作用是负责模版链的选择与转录的起始,它是酶的别构效应物,使酶专一性识别模版上的启动子;2, 因子可以极大的提高 RNA 聚合酶对启动子区 DNA 序列的亲与力;3,因子还能使 RNA 聚合酶与模版 DNA 上非特异 性位点结合常数降低。 6,什

12、么是 Pribnow box?它的保守序列是什么?pribnow box 是原核生物中中央大约位于转录起始位点上游 10bp 处的 TATA 区,所以又称作-10 区。它的保守序 列是 TATAAT。 7,什么是上升突变?什么是下降突变?上升突变:细菌中常见的启动自突变之一,突变导致 Pribnow 区共同序列的同一性增加;下降突变:细菌中常见的 启动子突变之一,突变导致结构基因的转录水平大大降低,如 Pribnow 区从 TATAAT 变成 AATAAT。 8,简述原核生物与真核生物 mRNA 的区别。1,原核生物 mRNA 常以多顺反子的形式存在。真核生物 mRNA 一般以单顺反子的形式存

13、在;2,原核生物 mRNA 的转录与翻译一般是偶联的,真核生物转录的 mRNA 前体则需经转录后加工,加工为成熟的 mRNA 与蛋白质结合生成 信息体后才开始工作;3,原核生物 mRNA 半寿期很短,一般为几分钟 ,最长只有数小时。真核生物 mRNA 的半寿期 较长, 如胚胎中的 mRNA 可达数日;4,原核与真核生物 mRNA 的结构特点也不同,原核生物的 mRNA 的 5端无帽 子结构,3端没有或只有较短的 poly A 结构。9,大肠杆菌的终止子有哪两大类?请分别介绍一下它们的结构特点。大肠杆菌的终止子可以分为不依赖于 p 因子与依赖于 p 因子两大类。不依赖于 p 因子的终止子结构特点

14、:1,位于 位点上游一般存在一个富含 GC 碱基的二重对称区,由这段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式结构。2,在终止位 点前面有一端由 48 个 A 组成的序列,所以转录产物的 3端为寡聚 U。依赖于 p 因子的终止子的结构特点:10,真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟的 mRNA,以用作蛋白质合成的模版。加工包括:(1)5端连接“帽子”结构; (2)3端添加polyA “尾巴”;(3)hnRNA被剪接,把内含子(DNA上非编码序列)转录序列剪掉,把外显子(DNA上的编码序列)转录序列拼接上(真核生物一般为不连续基因)。(4)分子内部的核苷酸甲基化修饰11,简述、类内含子的剪接特点。 类内含子的剪接主要是转酯反应, 即剪接反应实际上是发生了两次磷酸二脂键的转移。 I 类内含子的切除体系中, 在 第一个转酯反应由一个游离的鸟苷或者鸟苷酸介导, 鸟苷或鸟苷酸的 3OH 作为亲核基团攻击内含子 5端的磷酸二 脂键,从上游切开 RNA 链。在第二个转酯反应中,上游外显子的自由 3OH 作为亲核基团攻击内含子 3位核苷酸 上

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