生物技术概论Word格式文档下载.docx

1、A. GAAACTGCTTTGACB. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAGD. GAAACTGCAGTTTC6. 假设将含有 5 末端 4 碱基突出的外源 DNA 片段插入到含有 3 末端 4 碱基突出的载体质粒上，又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，那么需用的工具酶是DI T 4 -DNA 聚合酶 II Klenow III T 4 -DNA 连接酶 IV 碱性磷酸单酯酶A. IIIB. I + IIIC. II + IIID. I + II + III7.以下有关连接反响的表达，错误的选项是AA. 连接反响的最正确温度为 37 B. 连接反响缓冲体系

2、的甘油浓度应低于 10%C. 连接反响缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMD. 连接酶通常应过量 2-5 倍8. T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是DA. 2 -OH 和 5 PB. 2 -OH 和 3 -PC. 3 PD. 59. 载体的功能是（I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力） DA. IB. I + IIIC. II + III10.克隆菌扩增的目的是 （I 增殖外源基因拷贝 II 表达标记基因 III 表达外源基因） DA. I + IIB. I + IIIC.

3、 II + III11. 以下各组用于外源基因表达的受体细胞与其特点的对应关系中，错误的选项是CA. 大肠杆菌繁殖迅速B. 枯草杆菌分泌机制健全C. 链霉菌遗传稳定D. 酵母菌表达产物具有真核性12.考斯质粒cosmid是一种BA. 天然质粒载体B. 由 -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体C. 具有溶原性质的载体D. 能在受体细胞内复制并包装的载体13. 某一重组 DNA 6.2 kb 的载体局部有两个 SmaI 酶切位点。用 SmaI 酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与数据吻合，该重组分子插入片段上的 SmaI 酶切位点共有DA.4 个B. 3 个C. 2 个D

4、. 至少 2 个14. 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是 （I 融合基因能稳定扩增 II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表达产物易于亲和层析别离 ） DA.IIIB. I + IIC. I + IIID. II + III15.提高重组率的方法包括 （I 加大外源 DNA 与载体的分子之比 II 载体分子除磷 III 连接酶过量 IV 延长连接反响时间） AA. I + IIB. I + II + IIIC. I + III + IVD. II + III + IV16.识别基因序列不同，但酶切后产生的粘性末端一样的一类酶为 B A.同工酶 B.同尾酶 C.同裂酶 D.同位

5、酶17.pBR322质粒作为基因克隆载体应有以下何种调控元件 ABD A.AmPr和Tetr B.ori复制子 C.LacZ标记 D.多克隆位点18.噬菌体外包装目的基因片段的大小应为 D A.小于噬菌体DNA的50% B. 小于噬菌体DNA的75%C.大于噬菌体DNA的105% D.为噬菌体DNA的75%105%19.DNA连接酶的功能是 （ AB ）A.恢复3-OH与5-P之间的磷酸二酯键 B. 恢复缺口 C.恢复裂口 D.可使平末端与粘性末端连接20.PUC质粒作为基因克隆载体应有以下何种调控元件 （ A B C D ）A.AmPr B.ori复制子 C.LacZ标记 D.多克隆位点21

6、.以下属于获取目的基因的方法的是（ D ）利用mRNA反转录形成从基因组文库中提取从受体细胞中提取 利用PCR技术 利用DNA转录 人工合成A. B. C. D.22.的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是 B A提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B有利于对目的基因是否导入进展检测C增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接23. 有关基因工程的表达正确的选项是 DA限制酶只在获得目的基因时才用B重组质粒的形成是在细胞内完成的C质粒都可作为运载体 D蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料24.哪项不是基因表达载体的组成局部（ B ） A.启动子 B.终止密码 C.标记

7、基因 D.目的基因25.以下哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法（ B ） A基因枪法 B显微注射法 C.农杆菌转化法 D花粉管通道法26.以下说法正确的选项是CA、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来27.不属于质粒被选为基因运载体的理由是DA、能复制B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNA28.有关基因工程的表达中，错误的选项是A A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体

8、细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶29.有关基因工程的表达正确的选项是DA、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料30.基因工程是在DNA分子水平上进展设计施工的。在基因操作的根本步骤中，不进展碱基互补配对的步骤是CA、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达31.以下获取目的基因的方法中需要模板链是 B A.从基因文库中获取目的基因B.利用PCR技术扩增目的基因C.反转录法D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成32.以下有关基因工程的表达中，错误的选项是

9、 ACA 、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C、基因治疗主要是对有缺陷的进展修复D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料二、 是非判断题 1.DNA连接酶是一种能催化二条DNA链之间形成磷酸二酯键的酶，因此该酶既可修复基因序列中的缺口，也可修复裂口。 2.质粒提取后，在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高，当为三条带时为纯度不高。 3、入噬菌体的插入型载体只有一个单一限制酶切点，替换型载体有2个成对的限制性酶切点。 4、原核细胞和真核细胞转录的mRNA均具有与rRNA结合的SD序列，以利于进展有效的转录。5、 cDNA文

10、库是包含有细胞中所有mRNA，因此该文库能包含细胞所有的遗传信息。 X 三、 填空题 1、 在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显 白 色，为 阳性 克隆，未插入基因的克隆显 蓝 色，为 阴 性克隆。2、 理想的质粒克隆载体应具备以下根本条件，如 能自主复制 、一种或多种限制酶的酶切位点 、 筛选标记 、分子量小易拷贝 。3、点突变的基因系列在碱基替换中，假设为一个嘌呤换成另一个嘌呤或一个嘧啶换成另一个嘧啶者称 转换 ，假设一个嘌呤换成一个嘧啶或一个嘧啶换成一个嘌呤者称 颠换 。4、基因表达的四大表达系统分别为 大肠杆菌、酵母菌、 哺乳动物细胞 、昆虫细胞 。5

11、、基因与载体的平末端连接方法有哪些T4连接酶连接法。末端核苷酸转移酶加同聚物尾巴后，再用DNA连接酶进展连接；化学合成衔接物后连接DNA分子。5、目的基因与载体连接方式有哪些1） 粘性末端连接；2 平头末端连接； 3 人工接头法； 4 同源多聚尾连接法6、如何利用抗性标记基因筛选阳性克隆？抗性标记筛选；抗性基因插入失活筛选；LacZ基因失活筛选。7、核酸操作的根本技术有哪些核酸提取与纯化核酸的检测与保存核酸的凝胶电泳核酸分子杂交8、基因工程所需的根本条件1、用于核酸操作的工具酶；2、用于基因克隆的载体；3、用于基因转移的受体菌或细胞。9、Klenow酶在 有 dNTP 情况下，呈现DNA聚合酶

12、活性，在 没有dNTP 情况下呈现外切酶活性。 10、利用PCR技术扩增目的基因 概念：PCR全称为_聚合酶链式反响_，是一项 在生物_体外_复制_特定DNA片段_的核酸合成技术 原理：_DNA复制_条件：_基因的核苷酸序列_四种脱氧核苷酸_一对引物_、 _DNA聚合酶_.前提条件：方式：以_指数_方式扩增，即_2n_n为扩增循 环的次数结果使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增11PCR技术扩增过程a、DNA变性90-95：双链DNA模板 在热作用下，氢键 断裂，形成_单链DNA b、复性55-60：系统温度降低，引物 与DNA模板结合，形成局部_双链_。c、延伸70-75：在Taq酶的作

13、用下，从 引物的5端3端延伸，合成与模板互补的_DNA链_。四、名词解释1.同尾酶 某些限制性内切酶识别的碱基顺序不同，但酶切后产生同样粘性末端的两种酶2.柯斯C0S质粒 带有噬菌体的COS位点和整个pBR322的DNA顺序的大肠杆菌质粒。3.SD序列 为mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译的特殊序列。4.质粒不亲和性：在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。5.cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。6.穿梭质粒载体：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。7.基因（gene） 具有特定功能的DNA片段，这些片段有的编码蛋白质，有的编码rRNA、tRN