1、机能实验报告实验目录:1 实验目的2 实验装置和器材3 实验药物4 实验动物5 实验原理6 实验方法7 实验注意事项8 实验结果 实验数据 实验记录波型及静态测量数据9 实验结果讨论10 实验结论11 实验思考实 验 报 告实验次序: 九 实验项目:班级:11临本 姓名:符宏展 学号:112 实验类型(打):(基础 综合 设计)一、实验预习实验预习报告内容原则上应包含实验目的、实验原理、实验主要仪器、试剂及实验步骤。实验目的:掌握:1.消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。 2.哺乳动物离体器官灌流法。实验装置和器材:RM6240生物信号采集与处理系统、离体器官恒温灌流仪、氧气瓶、张
2、力换能器、烧杯、滴管等。实验药物:蒂罗德溶液、0.01%肾上腺素、0.01% 乙酰胆碱、0.01%阿托品、0.1%普萘洛尔、0.1%酚妥拉明等。实验动物:家兔实验原理:哺乳动物消化道平滑肌具有收缩性、缓慢而不规则的自动节律性、伸展性和对化学、温度及机械牵张刺激较为敏感等生理特性。消化道平滑肌常保持微弱的持续收缩状态,即有一定的紧张性。本实验应用不同的化学刺激、神经递质和药品作用于离体平滑肌,以了解其一般生理特性及药物的影响。家兔小肠平滑肌上存在、受体。、受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。观察乙酰胆碱、阿托品、肾上腺素等传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用
3、并掌握离体平滑肌的实验方法。实验方法 :1.仪器的准备:恒温浴槽的水箱加入适当的水,设置温度为38;2.动物手术:制备离体肠肌标本;3.安装实验装置:肠段置于恒温灌流仪的内槽,下端系在钩上,上端与张力换能器相连。氧气袋开口的针头插入标本槽下端的橡皮管内,人工加压控制出气量,使气泡呈单个逸出;4.观察项目:观察正常小肠平滑肌运动的节律、波形和幅度;给予0.01%乙酰胆碱2滴,观察收缩曲线的变化;给予0.01%阿托品24滴,观察收缩曲线的变化。12min后再加入乙酰胆碱2滴于浴槽内,观察收缩曲线的变化;给予0.01%肾上腺素2滴,观察收缩曲线的变化;给予0.1%普萘洛尔2滴,观察收缩曲线的变化。2
4、min后加入0.01%肾上腺素2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.1%普萘洛尔2滴,观察收缩曲线的变化;给予0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化。1min后加入0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化;同时给予0.1%普萘洛尔2滴和0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.01%乙酰胆碱,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.01%阿托品,观察收缩曲线的变化。实验注意事项:在恒温槽内先装水,方可接通电源;制备肠标本时,动作宜轻柔,勿用手捏,以免损伤肠壁。冲洗肠管不能用力过猛,避免肠管过于膨胀,影响其正常功能。标本不宜在空气中暴露过久,以免影响数据的准确性;供氧时气
5、量要适中,气泡要缓慢、成串、单个为好。气泡过多肠管受冲击,收缩曲线不稳定;每次出现效应后,立即用冷蒂罗德溶液冲洗23次,再更换热蒂罗德溶液进行下一步实验;每个步骤要有对照曲线。注意节律、幅度和紧张度的改变;实验过程中各仪器参数一经确定,勿随意调动,以免影响数据的准确性。二、实验操作原始(数据)记录及实验结果的分析实验时间:2013年 6 月 5 日 (星期三 晚上:7:0010:00)实验同组人:马腱明 符宏展 朱佛妹 叶超群 黄小花 张鹏 黄锦霞如果实验有数据表格,学生在实验预习时应画好实验数据表格,供实验填写数据。实验结果:正常 数据表格实验数据测量最大收缩力(g)最小舒张力(g)平均值(
6、g)频率1.5390.2860.84814实验记录波型实验一:乙酰胆碱1.4220.2050.6791.7370.2710.89116实验二:阿托品乙酰胆碱0.6960.40715阿托品0.5570.1610.2901.0330.1690.48313实验三:肾上腺素数据表格1.0920.5030.5500.1470.312实验四:普萘洛尔肾上腺素普萘洛尔1.3780.1910.665普萘洛尔1.0040.442120.7030.1540.3500.335实验五:酚妥拉明肾上腺素酚妥拉明0.9450.447酚妥拉明1.2240.533肾上腺素11.0260.1250.425肾上腺素20.8570
7、.1170.3510.7330.1100.308实验六:普萘洛尔+酚妥拉明肾上腺素酚妥拉明普萘洛尔乙酰胆碱阿托品1.0850.1390.490普萘洛尔+酚妥拉明0.8210.1320.3560.6080.2790.5130.0950.2360.4910.225普萘洛尔10.4620.222普萘洛尔20.3220.0880.1730.2420.1820.1030.152实验结果讨论:1、正常情况下,我们观察到离体小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩,但其节律性很不规则。小肠平滑肌自律性产生的离子基础尚未完全清楚,目前认为,它的产生可能与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关,当钠泵的活动暂
8、时受抑制时,膜便发生去极化;当钠泵活动恢复时,膜的极化加强,膜电位便又回到原来的水平。2、在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱(Ach)2滴后,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩频率变快,幅度增加。出现上述现象的机理,目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性Ca2+专用通道,另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感,小剂量Ach即引起开放;后一类通道对Ach相对不敏感,只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高,进而激活肌纤蛋白肌凝蛋白ATP系统,使平滑
9、肌收缩,肌张力增加。3、在正常38度蒂罗德溶液先滴加阿托品,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合抑制的作用,很快又恢复到正常,可能因为阿托品被稀释或被氧化;1min后再加乙酰胆碱的小肠可见离体肠管活动增强,描记曲线出现幅度增加,但频率下降。频率下降可能是阿托品的拮抗作用,活动增强,描记曲线出现幅度增加,由于这次实验加的是高浓度的乙酰胆碱溶液,相对于低浓度的阿托品对平滑肌肌膜上M受体竞争性作用占优势,但没有单独使用乙酰胆碱明显。4、在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度
10、减小。出现上述现象的机理,目前认为与肠肌细胞膜上存在和两中受体,受体又分为抑制型受体和兴奋型受体有关。肾上腺素作用于抑制型受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使K+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降。同时,肾上腺素还作用于受体,它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多,cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动,使肌浆中Ca2+浓度降低,亦使肌张力降低;受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超极化,促进了肠肌肌张力的减低;5、在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴,普萘洛尔为非选择性竞争抑制肾上腺素受体阻滞剂,受体阻断作用较强,无内在拟交感活性,可见离体肠管活动减弱
11、,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,与理论不符合,可能是小肠在离休环境下没有体内其他因素作用。2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,但没有单独使用肾上腺素明显。1min后在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率增加,幅度减小。出现上述现象的机理,普萘洛尔阻断了肾上腺素对受体的兴奋作用,从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用,可能小肠的受体已完全被阻滞剂。6、在浴槽中加入0.1%酚妥拉明2滴,酚妥拉明为肾上腺素受体阻滞药,对1与2受体均有作用,有拟胆碱作用,使胃肠平滑肌兴奋,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩幅度增加。2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,但没有单独使用肾上腺素明显,也没有使用普萘洛尔后加肾上腺素明显。出现上述现象的机理,酚妥拉明阻断了肾上腺素对受体的兴奋作用,有拟胆碱作用,使胃肠平滑肌兴奋,从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用,可能小肠的受体已完全被阻滞剂。7、在浴槽中同时加入0.1%普萘洛尔2滴和0.1%酚妥拉明2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小。2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺
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