医院消毒灭菌的效果监测07-06-13PPT资料.ppt

1、化学指示胶带监测法：l 将将化化学学指指示示胶胶带带粘粘贴贴于于每每一待灭菌物品包外一待灭菌物品包外BD试验试验l 对预真空和脉动真空压力蒸汽灭对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌，每日进行一次菌，每日进行一次B-D试验。试验。l 设计原理设计原理l a.使实验包成为灭菌器内残留空气使实验包成为灭菌器内残留空气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气布料易吸附、布料易吸附、“捕捉捕捉”残留空气。残留空气。l b.真空测试图上的化学试剂对残留真空测试图上的化学试剂对残留空气具有敏感性。空气具有敏感性。BD试验方法试验方法l 将测试图置于实验包中间位将测试图置于实验包中间位置

2、；置；l 然后，将实验包放于灭菌器然后，将实验包放于灭菌器室内排气口处，关闭柜门；室内排气口处，关闭柜门；l 进行进行1345分钟灭菌处理分钟灭菌处理完毕，打开柜门，观察测试结果。完毕，打开柜门，观察测试结果。BD实验包的制备实验包的制备l 实验包由实验包由4650cm8090cm纯棉纯棉布巾组成，布巾先横折为三层，再纵折布巾组成，布巾先横折为三层，再纵折成六层。将折好的布巾一条摞一条至成六层。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度。摞放时，各层布巾按折叠侧高度。摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替摆好，以使两侧厚度相等。布左右交替摆好，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，将真空测试图夹放于中央布巾摆好后

3、，将真空测试图夹放于中央布巾之间，然后用布包巾包好，外面用化巾之间，然后用布包巾包好，外面用化学指示胶带固定好，成为一个实验包。学指示胶带固定好，成为一个实验包。整个实验包的大小高约整个实验包的大小高约25cm，宽约宽约23cm，长约长约27cm，重约重约5kg。BD实验条件l 实验规定在实验规定在134蒸汽条件下，蒸汽条件下，使用使用3.5分钟观察结果，最长不超分钟观察结果，最长不超4分钟。分钟。l 测试图必须夹放于布包的中测试图必须夹放于布包的中央层位置。央层位置。l 实验包放在灭菌器底层，靠实验包放在灭菌器底层，靠近柜门与排气口处。近柜门与排气口处。l 实验在每天第一次灭菌前空实验在每天

4、第一次灭菌前空锅进行。锅进行。结果判断结果判断l结果判断结果判断合格：合格：测试图变黑且均匀，即中央部测试图变黑且均匀，即中央部分和边缘部分颜色一致，表示灭菌分和边缘部分颜色一致，表示灭菌器抽真空系统良好。器抽真空系统良好。不合格：测试图变色不均匀，通常中测试图变色不均匀，通常中央比边缘部分颜色浅，表示空气排央比边缘部分颜色浅，表示空气排除不彻底，须检查、修理后使用除不彻底，须检查、修理后使用.B-D测试失败原因分析测试失败原因分析l l真空泵效果下降真空泵效果下降l l自控系统失灵自控系统失灵,抽气时间缩短抽气时间缩短l l柜室密封性能下降柜室密封性能下降,不能维持规定的负压不能维持规定的负

5、压l l空气起始温度低空气起始温度低,重力作用明显重力作用明显l l送入蒸汽动能偏高送入蒸汽动能偏高,将过多的空气挤入试验包将过多的空气挤入试验包l l试验包与柜室容量相比过小试验包与柜室容量相比过小,产生小装量效应产生小装量效应l lB-D试验未按规定进行试验未按规定进行 2 2、生物监测法、生物监测法 指指示示菌菌株株：指指示示菌菌株株为为耐耐热热的的嗜嗜热热脂脂肪肪杆杆菌菌芽芽孢孢（ATCC ATCC 79537953或或SSIK SSIK 3131株株），菌菌 片片 含含 菌菌 量量 为为 5.5.Ol0Ol05 5cfu/cfu/片片5.5.Ol0Ol06 6cfucfu片片，在在1

6、21121O.5O.5条条件件下下，D D值值（杀杀灭灭90%90%微微生生物物所所需需时时间间）为为 1.31.3min1.9minmin1.9min，杀杀 灭灭 时时 间间（KTKT值值）1919minmin，存活时间存活时间（STST值值）为为3.93.9minmin。培培养养基基：试试验验用用培培养养基基为为溴溴甲甲酚酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。紫葡萄糖蛋白胨水培养基。检测方法检测方法l 将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。心部位。l 在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排在下排气压力蒸汽灭菌柜室

7、内，排气口上方放置一个标准试验包气口上方放置一个标准试验包（由由3 3件平件平纹长袖手术衣，纹长袖手术衣，4 4块小手术巾，块小手术巾，2 2块中手块中手术巾，术巾，1 1块大毛巾，块大毛巾，3030块块lOcmlOcmlOcmlOcm 8 8层纱布敷料包裹成层纱布敷料包裹成（25（25cm30cm30cmcm30cm30cm大小大小）。预真空和脉动真空压力蒸汽预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌器 预真空和脉动真空压力蒸汽灭预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气门上方放置菌器灭菌柜室内，排气门上方放置一个标准测试包一个标准测试包（由由16条全棉手术巾条全棉手术巾4lcm66cm，将每条

8、手术巾的长边先将每条手术巾的长边先折成折成3层，短边折成层，短边折成2层然后叠放，层然后叠放，作成作成23cm23cml5cm大小的测试包大小的测试包）。手提压力蒸汽灭菌器手提压力蒸汽灭菌器 l 手手提提压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器用用通通气气贮贮物物盒盒（22cml3cm6cm）代代替替标标准准试试验验包包，盒盒内内盛盛满满中中试试管管，指指示示菌菌片片放放于于中中心心部部位位的的两两只只灭灭菌菌试试管管内内（试试管管口口用用灭灭菌菌牛牛皮皮纸纸包包封封），将将贮贮物物盒盒平平放放于于手手提提压压力蒸汽灭菌器底部。力蒸汽灭菌器底部。检测方法检测方法l 经经一一个个灭灭菌菌周周期期后后，在在无

9、无菌菌条条件件下下，取取出出标标准准试试验验包包或或通通气气贮贮物物盒盒中中的的指指示示菌菌片片，投投入入溴溴甲甲酚酚紫紫葡葡萄萄糖糖蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基中中，经经561561培培养养7 7d（d（自自含含式式生生物物指指示示物物按按说说明明书书执执行行），观观察察培培养养基基颜颜色色变变化化。检检测测时时设设阴阴性性对对照照和阳性对照。和阳性对照。快速检测快速检测（24小时出结果小时出结果）结果判定结果判定 l 每每个个指指示示菌菌片片接接种种的的溴溴甲甲酚酚紫紫蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基都都不不变变色色，判判定定为为灭灭菌菌合合格格：指指示示菌菌片片之之一一接接种种的的溴溴甲甲酚

10、酚紫紫蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基，由由紫紫色色变变为黄色时，则灭菌过程不合格。为黄色时，则灭菌过程不合格。l 注注意意事事项项：监监测测所所用用菌菌片片须须经经卫卫生生部部认认可可，并并在在有有效效期期内内使使用用，生物指示物监测应生物指示物监测应1 1月月1 1次。次。、干热灭菌效果监测方法、干热灭菌效果监测方法 l 1 1、化学检测法、化学检测法l 检测方法：检测方法：将既能指示温度又能将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂指示温度持续时间的化学指示剂3 3个个5 5个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌菌器最难达到

11、灭菌的部位。经一个灭菌周期后，取出化学指示剂，据其颜色及周期后，取出化学指示剂，据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。性状的改变判断是否达到灭菌条件。结果判定结果判定 l 检测时，所放置的指示管检测时，所放置的指示管的颜色及性状均变至规定的条件，的颜色及性状均变至规定的条件，则判为达到灭菌条件；若其中之则判为达到灭菌条件；若其中之一未达到规定的条件，则判为未一未达到规定的条件，则判为未达到灭菌条件。达到灭菌条件。2 2、物理检测法：、物理检测法：（热电偶检测法热电偶检测法）l 检检测测方方法法：检检测测时时，将将多多点点温温度度检检测测仪仪的的多多个个探探头头分分别别放放于于灭灭菌菌器器各

12、各层层内内、中中、外外各各点点。关关好好柜柜门门，将将导导线线引引出出，由由记记录录仪仪中中观观察察温温度度上上升升与与持持续续时时间。间。l 结果判定：结果判定：若所示温度若所示温度（曲线曲线）达达到顶置温度，则灭菌温度合格。到顶置温度，则灭菌温度合格。生物检测法生物检测法 l 指指示示菌菌株株：枯枯草草杆杆菌菌黑黑色色变变种种芽芽孢孢（ATCC9372）ATCC9372），菌菌 片片 含含 菌菌 量量 为为5.0105.0105 5cfucfu/片片5.0105.0106 6cfucfu/片片。其其抗抗力要求同上。力要求同上。l 检测方法：将枯草杆菌芽孢菌片将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌中

13、试管内分别装入灭菌中试管内（1（1片片/管管）。灭菌。灭菌器与每层门把手对角线内，外角处放置器与每层门把手对角线内，外角处放置2 2个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至降至8080时，加盖试管帽后取出试管。时，加盖试管帽后取出试管。l在在无无菌菌条条件件下下 ，加加入入普普通通营营养养肉肉汤汤培培养养基基（5（5mlml管管），以以361361培培养养4848h h，观观察察初初步步结果，无菌生长管继续培养至第七日。结果，无菌生长管继续培养至第七日。l 结结果果判判定定:若若每每个个指指示示

14、菌菌片片接接种种的的肉肉汤汤管管均均澄澄清清，判判为为灭灭菌菌合合格格，若若指指示示菌菌片片之之一一接种的肉汤管混浊，判为不合格。接种的肉汤管混浊，判为不合格。l对难以判定的肉汤管，取对难以判定的肉汤管，取o o1ml1ml接种于营养接种于营养琼脂甲板，用灭菌琼脂甲板，用灭菌L L棒涂匀，放棒涂匀，放361361培培养养4848h h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。菌合格。三、环氧乙烷三、环氧乙烷（EO）灭菌效果监测灭菌效果监测l 灭菌效果监测灭菌效果监测l 每次每次灭菌均应进行程序监测灭菌均应进行程序监测l 每每个个灭灭菌菌物物品品的的外外包包装装应应粘粘贴贴包包外外化化学学指指示示胶胶带带，作作为为灭灭菌菌过过程程的的标标志志；包包内内放放置置化化学学指指示示卡卡，作作