1、3,T、B淋巴细胞不表达CD15、CD11B,NK细胞表达CD11B而无CD15(红色细胞)。4,有核红细胞及碎片不表达CD15和CD11B。根据骨髓细胞CD45/SSC图中分布情况设门圈定各类细胞:R1门为成熟淋巴细胞;R2门为正常单核细胞位置;R3门正常粒细胞位置;R4门为幼稚淋巴细胞出现位置;R5门为有核红细胞或细胞碎片位置;R6门为幼稚髓细胞出现位置;白血病细胞通常会在R4、R6两门位置处出现。M0免疫分型M0:急性髓细胞白血病微分化型 原始细胞在光镜下类似L2型细胞,核仁明显,胞浆透明,嗜碱性,无嗜天青颗粒及Auer小体,髓过氧化酶(MPO)及苏丹黑B阳性细胞3%的幼稚细胞表达MPO
2、,较M0多。不表达CD11B,CD15,CD16等。M1:CD11B-/+,HLA-DR+,CD13+,CD33+,CD34+,CD14+,MPO+,TdT-/+to+/-M2免疫分型CD45/RALS图中细胞分布广泛与M1不同,这是因为M2细胞已进一 步分化幼稚细胞减少,粒细胞增多并与BLAST WINDOWS区域内细 胞相连。因细胞没有明显分群,很难将异常细胞与正常相区分, 故设立多个门进行分析检测其成熟度抗原的表达情况。M2免疫表型与M1类似,HLA-DR,CD33,CD13阳性。上图中可见 幼稚细胞CD33与CD71表达均比成熟粒细胞强。CD13表达强于CD33。M2肿瘤细胞弱表达CD
3、15与CD11B,说明细胞已分化。 CD34表达显著降低。M2肿瘤细胞不表达CD5,CD7和TdT等抗原,如病例伴t(8;21),则 经常表达CD19偶表达CD56。一般肿瘤细胞MPO强阳性。偶见形 态为M2并伴t(8;21),但CD13-,CD33-,CD14-,而MPO+。细胞分布广泛,幼稚细胞较M1少。CD13和CD33阳性,且CD13表达高于CD33。HLA-DR阳性,CD15弱阳性。M2肿瘤细胞伴t(8,21)CD19阳性。M3免疫分型上图为M3V,少颗粒型早幼粒白血病细胞,细胞中颗粒少RALS信号 低而集中,SS座标上出现大量肿瘤细胞。肿瘤细胞大,FS信号强。 通过CD45/RAL
4、S双参图可辨别出M3与M3V。下为经典M3多颗粒细胞的 CD45/RALS和SS/FS图。M3与M3V在免疫表型上无区别。M3肿瘤细胞特征性地不表达髓系早期标志物CD34和HLA-DR;部分病例中CD9特征性地阳性,但不是完全特异。CD2在M3与M3V中会出阳性表达,在HLA-DR阴性的病例中,与染色体t(15,17)异常相关。肿瘤细胞CD33表达比正常粒细 胞强与正常单核细胞相似, CD13表达多样。肿瘤细胞不表 达晚期髓细胞分化抗原CD15, CD16和CD11B。肿瘤细胞完全不表达CD15,与正常早幼粒细胞表达CD15相区别;正常早幼粒细胞细胞周期中含高比例S期细胞,而肿瘤细胞中几乎不见
5、细胞周期。肿瘤细胞MPO阳性,上图中MPO与LACTOFERIN双染来区分成熟粒 细胞。肿瘤细胞除表达CD2外,很少表达T或B系抗原。M3肿瘤细胞因其胞浆内多颗粒,细胞具有很强的自发荧光。M3:CD33+,CD13+,MPO+,CD34-,HLA-DR-,CD11b-,CD14-,CD15-,TdT-M4免疫分型典型的M4病例CD45/RALS图中会出现一群异常的单核细胞和一群骨髓幼稚细胞,肿瘤细胞较M0,M1细胞的FS和SS信号增强。有时这两群细胞会相互叠加占据BLAST WINDOWS和成熟单核细胞位置,故难圈出独立成群的肿瘤细胞。对于M4病例一般都设多个门对异常细胞进行分析,且每个异常细
6、胞群根据其成熟度的不同,表型也可能互不相同。本例为M4EO,增多的嗜酸细胞RALS信号与早幼粒相似CD45信号与单核细胞相似,本例中为R4门中紫色细胞。幼稚细胞群表达CD34,HLA-DR,而异常单核细胞则CD34阴性,HLA-DR阳性。幼稚细胞CD33阳性,CD14阴性,而异常单核细胞则为CD33阳性,CD14,CD64阳性。CD64表达如象本图中强阳性表达则为单核细胞特异性标志。M4肿瘤细胞在CD11B/CD15图中会特征性分布如上,存在幼稚细胞及各期的粒细胞及单核细胞。CD2表达与M4EO有很大相关性,可能与16号染色体异常有关。M4/blast population: CD13+,CD33+,CD34+,HLADR+,CD11b-,CD14-M4/abnomal monocytic cell:CD13+,CD33+,CD34-,HLA-DR+,CD11b+,CD14+/-,CD4+/-M5免疫分型M5肿瘤细胞从细胞大小、颗粒度和CD45表达都向成熟单核细胞过渡,形成一大细胞群体。M5分为二个亚型M5a和M5b,前者细胞稍大,与成熟单相比CD45表达弱但不独立成群。髓系细胞的分化情况可从CD15/CD11B双参数图中观察,本例中肿瘤细胞CD15较平常高,但低于
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