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1、（4）将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基（含蔗糖、琼脂和抗生素，下同）上，使叶小片先脱分化形成。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至 （ A.LB培养基 B.MS培养基+适宜浓度NAA C.MS培养基+适宜浓度BAD.NAA/BA小于1的MS培养基）上生根，形成完整植株。（5）取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的等条件下进行炼苗。提取叶片组织的DNA，采用PCR技术目的基因，鉴定目的基因是否成功导入。（6）为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因植株和非转基因植株的性状。2.（2016年4月）回

2、答下列（一）、（二）小题：（一）请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：（1）果胶是细胞壁的重要组成成分，其化学本质是_（A.蛋白质B.脂质C.核酸 D.多糖）。它在细胞壁的形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。（2）制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质，再用_酶处理，可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低成正相关。（3）由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提物（经酶处理后的混合物）进行_ 处理，从而得到干制品。（二）兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛

3、对甲醛的代谢能力，请回答：（1）从兔肝细胞中提取mRNA，在_酶的作用下形成互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成_，再导入用氯化钙处理的_，侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是_A.叶片在含适宜浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织B.愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽C.再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根D.愈伤组织在含适宜浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株（2）取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适宜浓度甲醛且密封的试管中。将试管置

4、于_上，进行液体悬浮培养。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是_，从而使叶片保持正常的形态。3.（2016年10月）回答下列（一）（二）小题（一）请回答从土壤中分高产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题：（1）LB全营养固体培养养基：取适量蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解，再加_灭菌备用。（2）尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用_灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤，因为G6玻璃砂漏斗_，故用于过滤除菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。（3）取适量含产脲酶细菌的10-4、

5、10-5两种土壤稀释液，分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上，培养48h，推测固体培养基上菌落数最少的是_A.10-5稀释液+尿素固体培养基 B.10-5稀释液+LB固体培养基C.10-4稀释液+尿素固体培养基 D.10-4稀释液+LB固体培养基在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现_ ，其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生_所致。（4）制备固定化脲酶时，用石英砂吸附脲酶，装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱，其作用是_。（二）某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究，请回答：（1）原生质体的分离：在无菌条件下，取烟草无菌苗的叶片，放入含有0.5mol/L的甘露醇（维持较高渗透压）的_

6、混合液处理，经过离心纯化后获得原生质体。（2）原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞，此时，应该_培养基中甘露醇的浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株。途径一：细胞团经球形胚、_和胚状体，最好发育成植株。途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出芽，切割芽经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是_、胚性细胞的主要特点是_。（A.液泡小、细胞核小B.液泡大、细胞核大C.液泡大、细胞核小D.液泡小、细胞核大）（3）为了对烟草的某些性状进行改良，分离得到两种烟草的原生质体，通过_方法将它们的遗传物质组合在一起，经

7、培养获得具有新性状的再生植株，提取再生植株的DNA，采用_扩增相关基因，来鉴定遗传物质是否成功重组。4.（2017年4月）回答下列（一）（二）小题（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用_蘸取少量的稀释液，在MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是_。（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_ 进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与_发生重氮化反应，再与 N-1-萘基乙二胺偶联

8、，形成紫红色产物。然后用光程为 1cm 的_，在 550nm光波下测定光密度值，与由已知浓度梯度亚硝酸钠制作的_比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。（二）回答与生态工程有关的问题：（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是_技术。其中“过腹还田”的具体途径是_。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的_技术。（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的_

9、技术提高经济和社会效益。“退耕还林”后，林地的增加可以减少_，更有利于受损生态系统的恢复。使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的_减少，因此利用生物的_进行生物防治是今后的发展方向。5.（2017年11月）回答下列（一）（二）小题（一）回答与酿酒和制醋有关的问题:（1）为了获得优良的酿酒红曲霉菌株，将原菌株的孢子诱变处理后制成较稀浓度的单孢子悬液，这样做的目的是在培养时有利于获得_（2）大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后,用某酿酒酵母进行酒精发酵,发酵完毕后得到新鲜红曲酒，酒中乙醇浓度不超过15%。其主要原因是当发酵液中的乙醇浓度接近15%时，_（A.乙醇氧化逐渐增强直至平衡B.葡萄糖分解逐渐增

10、强直至平衡C.乙醇氧化逐渐减弱直至停止D.葡萄糖分解逐渐减弱直至停止）。（3）已知葡萄糖与蒽酮试剂反应能产生颜色，采用光电比色法测定红曲酒中的葡萄糖含量的步骤如下：第一步,标准曲线的制作。用蒸馏水配置_，与蒽酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以_的标准曲线。第二步，样品处理。将待测酒样品通过活性炭脱色，其目的是_。第三步，样品测定与计算。（4）影响红曲酒风味的主要因素，除了温度、pH、氧气等环境因素外，还有_（答出2点即可）。（5）在红曲醋生产工艺中，将适量的红曲酒、水、醋化醋杆菌等混合。再添加一定量谷壳糠等制成松散的发酵料，其目的是_,以利于醋酸发酵。（二）回答与植物克隆和动物克隆有关的问题

11、:（1）利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径：一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的_途径，二是由愈伤组织细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外也可不通过愈伤组织阶段而直接采用带腋芽的茎段培养成丛状苗，再诱导生根获得再生植株，其原因是腋芽中存在_。（2）利用植物克隆培育新品种，一方面可利用带有目的基因的_侵染植株，或将目的基因通过_ 方法导入植物细胞、组织、器官获得转基因植株，另一方面利用异源植株的_进行融合产生杂交植株，或利用异源植株在试管内进行_，对其产生的胚进行培养产生杂种植株。（3）下列属于植物克隆和动物克隆共有培养方法是（ ）A悬浮培养、器官

12、培养 B.贴壁培养、传代培养C.器官培养、愈伤组织培养 D.原生质体培养、传代培养6.（2018年4月）回答下列（一）（二）小题（一）回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。（1）果胶提取工艺研究结果表明，原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率（提取得到的果胶占原料质量的百分率）显著高于常温水漂洗的果胶得率，最主要原因是沸水漂洗_（A.有助于清洗杂质和去除可溶性糖 B.使植物组织变得松散 C.使有关酶失活 D.有利细胞破裂和原料粉碎制浆）。（2）在淀粉分离生产工艺研究中，为促进淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝剂（乳酸菌菌液），其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用_，进行单菌落分离，然后将其_，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。（3）在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现