有丝分裂实验的改进文档格式.doc

1、我们用选洋葱和大蒜作为试验材料，在18 左右的恒温箱中培养，发现洋葱非常容易坏，且生根量极少。大蒜几乎不坏，且一个蒜瓣的生根量就相当于一个洋葱的生根量，因大蒜的蒜瓣之间有空隙，不易缺氧，避免因缺氧造成的腐烂现象。另外大蒜的染色体数为16，在观察染色体时候也比较方便。1.2 取材时机：中午11：00 点14： 00 点时取材较好本实验对材料的要求是最好用分裂相多的材料作为实验材料。我们通过对早6：00 点晚22：00 点之间的不同时段做对比实验得出：在2328 温度下，中午11：00 点时取材最好，观察到的分裂相最多，其它时间段相对较少。1.3 培养时间：根尖长到0.5-1cm后取材较好 不管用

2、洋葱还是大蒜作为实验材料，等根尖长长到0.5-1cm后就可剪取0.3cm进行实验，这样就能大大缩短培养时间，并且实验效果也好，因为幼根的根尖细胞分裂更加旺盛，并且显微镜下也容易区分。如果按照书本上的实验，不仅培养时间长，而且根尖的剪取长度也很难把握。1.4 培养温度：2 左右效果最好本人对洋葱和大蒜的根尖分别作了-2 、0 、2 、4 、6、8的24h 低温根尖培养。在低温处理中，- 2 或0 处理后，镜检时发现几乎无细胞分裂现象， 2 时,只有少数细胞处于分裂期，且分裂时期不明显，4 时，不仅积累了很多前、中、后、末期的细胞，而且染色体比较粗短，典型的分裂相大增，在分生区内，平均每个视野中少

3、则能观察到34 个分裂相，多则可见十几个分裂相，6 时分裂期细胞数目减少，8时分裂期细胞数目比6 时更少。2 材料的固定保存 由于受教学进度的限制，不能保证上课时根尖正处于分裂相最多的时期，这就需要把处在细胞分裂旺盛期的根尖随时取下来，进行固定处理。具体有以下两种操作方法：方法一：把剪取的根尖放入盛有固定液（95 %的酒精： 99 %的冰醋酸=3：1） 的培养皿内固定1224h ，然后取出漂洗，通过用不同体积分数的酒精（70 %、95 %、无水） 漂洗不同的时间，取出用体积分数为70 %的酒精漂洗1h 以上。然后把根尖保存在70%酒精中。方法二：把剪取的根尖放入卡诺固定液（纯酒精：氯仿：冰醋酸

4、=12：6：2）中固定1h，然后把根尖保存在70%酒精中。3 解离后的漂洗方法的改进解离后的根尖，必须漂洗干净，以便能够着色。而教材中的漂洗时间为10min。为缩短时间，可以将解离后的根尖放入盛有清水的小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌，使根尖上附着的盐酸加速溶解，约2-3分钟后，再将根尖放入另一盛有清水的水洗杯中，漂洗一下即可。4 染色液的改进我们在实验中发现质量浓度为0. 01g/ mL 的龙胆紫染液易把根尖都染成深紫色，较难观察清楚有丝分裂各时期和染色体行为变化，因此我们将质量浓度为0. 01g/ mL的龙胆紫染液进行稀释。因为醋酸能加强细胞核染色体的选择着色，所以我们选择用冰醋酸进行稀释，通过

5、对几种不同浓度的稀释液（50%冰醋酸、20%、10 %冰醋酸、4 %冰醋酸）进行不同浓度的稀释比较，最后得出：用10 %的冰醋酸以3 :1的比例稀释后染色效果最好。5 压片方法的改进为了减少细胞重叠，保证压片的质量，对于较粗的根尖不宜让学生直接压片，最好是把较粗的根尖纵切成23 片再压片。可以用双面刀片在萝卜上割一个根尖长短相当的缝隙，然后用镊子把根尖放入其中，再用左手压紧，右手用刀片把根尖纵切成23 片，经纵切后的根尖压片效果非常理想。不但易于观察，同时也能缩短时间，提高实验效率。（如果在解离之前纵切还能进一步缩短解离、漂洗、染色、再漂洗的时间，从而进一步提高实验效率。）取染好的洋葱根尖，放在载玻片上，滴一滴清水盖上盖玻片，用吸水纸包上整个装片用拇指轻压，使根尖细胞分散充分。这样不但能将压片过程中渗出来的水吸去，而且更加不容易使根尖和盖玻片移动。