柱色谱分离经验Word文件下载.docx

1、以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。 2、关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好 柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要

2、用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。现在见到的柱子径高比一般在1：510，书中写硅胶量是样品量的3040倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.20.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。3、关

3、于无水无氧柱，适用于对氧，水敏感，易分解的产品 可以湿柱，也可以干柱。不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解，毕竟要分离的是敏感的东东，小心不为过。也是因为分离的东西比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。至于是加压、常压、减压，随需而定。因为是schlenk操作，所以点板是个问题，如果样品是显色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。如果样品无色，只好准备几十个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。像我以前过一根无水无氧柱，需要六个schlenk，现在只一个就能把所要的全收集

4、到。无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，很容易是样品分解，特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的，选择余地比较大，但是比硅胶要贵些。听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，没有验证过。哪位做过可以提出来大家参详参详。4、关于湿法、干法上样 湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不然溶剂就成了淋洗剂了。很多样品在上柱前是粘乎乎的，一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出，这一般都是比较大量的样品才会出现，是因为硅胶对样品的

5、吸附饱和，而样品本身又是比较好的固体才会发生，这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，如果不能重结晶那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是1：1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）。溶剂的选择。当然是最便宜，最安全，最环保的了。所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。文献中有写用正己烷的，太贵了，除非特别需要不要用不然银子哗哗的，流的比淋洗剂还快，不过因为极性很小，有

6、时还是非它不可。乙醚也可以用，但是就是容易睡觉，注意保持清醒别让溶剂流干了，那样柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅胶的吸附是一个放热过程，所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡，天气冷的时候会好一些。甲醇，据说能溶解部分的硅胶，所以产品如果想过元素分析的话要留神，应该经过后继处理，比如说重结晶等。其他的溶剂用的相对较少，要依个人的不同需要选择了。由于某些原因，用到的淋洗剂多是大包装的（便宜嘛），我们这里是用10升或25升的塑料桶装的，就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质，其他的杂质就可想而知了，所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料

7、时就可以免去这一步了，反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后最好也回收使用，一方面环保，另一方面也能节省部分经费，缺点是要消耗一定的人工。这里要注意的是，一般在过柱同时进行的是减压旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥发度的不同会导致极性的变化，一般会使得极性变大，在梯度淋洗时比较合适，正好极性越来越大了。在过完柱子后，溶剂最后回收要采用常压，因为在减压旋蒸时会有部分低沸点的杂质一起出来，常压时就会减少这种现象，如果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了。5、关于操作问题。5.1 装柱。柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要

8、能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果，甚至作废！5.2 加样。用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此两三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（24cm就够了），再加压，这样避免了溶剂（如二氯甲

9、烷等）夹带样品快速下行。5.3 淋洗剂的选择。感觉上要使所需点在rf0.20.3左右的比较好。不要认为在板上爬高了分的比较开，过柱子就用那种极性，如果rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的状态，可以通过公式的比较：0.6/0.8一次的分离度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。5.4 样品的收集。用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话，就不容易流出。这样就会发生，后面的点先出，而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。另外，收集的试管大小要以样品量而定，特别是小量样品，如果用大试管，可能一根就收到了三

10、个样品，wuwu。如果都用小试管那工作量又太大。5.5 最后的处理。柱分后的产品，由于使用了大量的溶剂，其中的杂质也会累积到产品中，所以如果想送分析，最好用少量的溶剂洗涤一下，因为大部分的杂质是溶在溶剂里的，一洗基本就没了，必要时进行重结晶。另外，再过柱的时候，有时会出现气泡，一是和使用的溶剂有关，如果是易挥发的溶剂，如乙醚、二氯甲烷等，在室温稍高的情况下，很容易出现这种现象，因此，在室温高的时候，可以选择沸点较高，挥发相对小的溶剂。还有，使用混合溶剂时，使用的两种溶剂的沸点应该相差不大，如：乙酸乙酯和石油醚（6090）,而乙醚却要选择3060的石油醚。二是：不论是用带砂板的还是塞棉花的，在装

11、柱之前，都要将空气用加压的方法将空气排干，这样就可避免柱中有空气！过柱子需要耐心，不要着急。萃取时严重乳化,求解决方法 我正在做一个产品,产物需用稀盐酸溶液提取有机溶剂中的产物,产物与HCL成盐后溶解在水相中，但在此过程中有时会产生严重的乳化现象，极难分液，共提取三次，不定在哪次产生乳化，求助：如何避免乳化？乳化后如何处理？谢谢。常用方法： 1，长时间静置 2，加入少量电解质（如氯化钠）破乳或增大水相比重使两相分离 3，若因溶液呈碱性，可加入少量酸，反之加碱 4，过滤 5，加入乙醇或磺化蓖麻油等破乳剂 有关氰化钠、氰化钾 我就要用大量的氰化钠、氰化钾了，好害怕。有人能给我点建议吗？如何防护？容

12、器如何处理？任何情况下不要在酸性条件下使用 做好劳动防护措施，手有伤口一定小心 如反应对水没有要求，可以用92的NaCN，含一定的水，呈湿粉状 后处理还是次氯酸钠好用一些 解毒剂：亚硝酸异戊酯，口服或注射 5% Pd/C 催化剂的制备 将10%的硝酸和活性碳粉末混合均匀，并在蒸汽浴上煮23 h，过滤，用水洗净硝酸后，于100110 烘干。称取11.5 g处理过的活性碳，悬浮在136.0 mL水中，水浴加热至80 ，加入溶有0.9 g氯化钯的2.3 mL浓盐酸与5.7 mL水的混合液，然后再加入37%甲醛溶液0.9 mL。搅拌下滴加30%的NaOH水溶液，直至反应液呈碱性，继续搅拌5 min。过

13、滤，滤饼用水洗涤10次，然后将滤饼置于空气中晾干，即得5% Pd/C催化剂，再移至装有KOH的干燥器中贮存。胺类化合物的分离 我在做一个仲胺与取代叔胺反应生成叔胺的反应。后处理非常麻烦，TLC的条件是CHCl3:MeoH=10:1, 我用CHCl3:MeOH=100:5, 100:3, 100:1（均含0.2%Et3N）过了三次柱了，还是没得到纯的产品。反应混合物里面有四个点，产物是第三个点，和第二个点距离非常近。有没有哪位仁兄有处理胺类化合物柱色谱分离的技巧？可否指点一二？提前致谢！我现在猜测产物叔胺可能也溶解于水，所以我用Chcl3提取的效率一直不太高。首先，体系用二氯甲烷和甲醇会好一些，

14、最好含有1%7N氨甲醇溶液，毒性小，容易旋干。第二，提取时，水相要点板监控。最好也用二氯甲烷。如果不行加一点thf. 第三，用反相硅胶过试试。（2）反应不用氮保护亦可以的. （3）要注意过程点板监控,原料和产物极性相差较小. 格氏试剂的实验室制法！所有溶剂、试剂、仪器均经过干燥/烘干处理。无水乙醚或者THF，加1.05 eq镁屑，惰性气体保护，温热（有些非常活泼的用室温甚至冰冷）条件下滴加约1/10的卤代烃，引发格氏反应（镁屑上冒小泡泡），如果引发不易，可以加热至微弱回流或者加少量的碘。引发后缓慢滴加剩余的卤代烃，过快会猝灭格氏反应或者引起偶联。加完所有的卤代烷后微弱回流1小时，绝大多数的镁屑

15、会反应完全，体系为灰色近透明液体。降温后有可能析出格氏试剂沉淀，如果漏气也会出现沉淀物。残余的镁屑，如果很少，可以不经处理，直接进行下步反应。如果镁的投料当量较大（有时用1.21.5 eq），可以将格氏试剂静置后吸取上清液或者压滤至新的反应瓶中。实验室制法，与工业制法没本质的差别。一种金属有机化合物，通式RMgX（R代表烃基，X代表卤素）。1901年由F.-A.V.格利雅首次使用卤代烃RX与镁在醚类溶液中反应制得。又称格利雅试剂。格氏试剂广泛用于有机合成中，从RMgX可以制得RH、R-COOH、R-CHO、R-CH2OH、R-OH、 和RnM（n为金属的化合价，M为其他金属）。在合适的情况下，RMgX还能与、-