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生物化学大题剖析Word文件下载.docx

1、(1)生物活性丧失;(2)理化性质的改变,包括:溶解度降低,因为疏水侧链基团暴露;结晶能力丧失;分子形状改变,由球状分子变成松散结构,分子不对称性加大;粘度增加;光学性质发生改变,如旋光性、紫外吸收光谱等均有所改变。(3)生物化学性质的改变,分子结构伸展松散,易被蛋白酶分解。5蛋白质有哪些重要功能。蛋白质的重要作用主要有以下几方面:(1)生物催化作用:酶是蛋白质,具有催化能力,新陈代谢的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。(2)结构蛋白:有些蛋白质的功能是参与细胞和组织的建成。(3)运输功能:如血红蛋白具有运输氧的功能。(4)运动功能:收缩蛋白(如肌动蛋白和肌球蛋白)与肌肉收缩和细胞运动密

2、切相关。(5)激素功能:动物体内有些激素是蛋白质或多肽,是调节新陈代谢的生理活性物质。(6)免疫功能:抗体是蛋白质,能与特异抗原结合以清除抗原的作用,具有免疫功能。(7)贮藏蛋白:有些蛋白质具有贮藏功能,如植物种子的谷蛋白可供种子萌发时利用。(8)接受和传递信息:生物体中的受体蛋白能专一地接受和传递外界的信息。(9)控制生长与分化:有些蛋白参与细胞生长与分化的调控。(10)毒蛋白:能引起机体中毒症状和死亡的异体蛋白,如细菌毒素、蛇毒、蝎毒、蓖麻毒素等。6下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl、-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰

3、凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任务?(1)测定小肽的氨基酸序列。(2)鉴定肽的氨基末端残基。(3)不含二硫键的蛋白质的可逆变性;如有二硫键存在时还需加什么试剂?(4)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。(4)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。(5)在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。(a)异硫氢酸苯酯;(b)丹磺酰氯;(c)脲、-巯基乙醇;(d)胰凝乳蛋白酶;(e)CNBr; (f)胰蛋白酶。7扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。(1)在低pH时沉淀。(2)当离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉淀。(3)在一定的离子强度下,达到等电点pH值时,表现出

4、最小的溶解度。(4)加热时沉淀。(5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,而导致溶解度的减小。(6)如果加入一种非极性强的溶剂,使介电常数大大地下降会导致变性。pH=6.0比pH=2.0或pH=13.0时电泳能提供更好的分辨率。因为在pH6.0的条件下各肽带有的净电荷为:A肽+1,B肽1,C肽0;在pH2.0的条件下净电荷分别为A肽+2,B肽+1,C肽+2,在pH13.0的条件下净电荷分别为A肽2,B肽2,C肽2。8用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、-巯基乙醇、胰蛋白酶、过酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋

5、白酶。(1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序(2)鉴定小于10-7克肽的N-端氨基酸(3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫键,应加何种试剂?(4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键(5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键(6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键答(1)在低pH时,羧基质子化,这样蛋白质分子带有大量的净正电荷,分子内正电荷相斥使许多蛋白质变性,并随着蛋白质分子内部疏水基团向外暴露使蛋白质溶解度降低,因而产生沉淀。(2)加入少量盐时,对稳定带电基团有利,增加了蛋白质的溶解度。但是随着盐离子浓度的增加,盐离子夺取了与蛋白质结合的水分子,降低了蛋白质的水合程度,使蛋白质水化层破坏,而使蛋白质沉淀

6、。(3)在等电点时,蛋白质分子之间的静电斥力最小,所以其溶解度最小。(4)加热会使蛋白质变性,蛋白质内部的疏水基团被暴露,溶解度降低。从而引起蛋白质沉淀。(5)非极性溶剂减少了表面极性基团的溶剂化作用,促使蛋白质分子之间形成氢键,从而取代了蛋白质分子与水之间的氢键。(6)介电常数的下降对暴露在溶剂中的非极性基团有稳定作用,结果促使蛋白质肽链展开而导致变性。9. 什么是蛋白质的沉淀作用?有哪些沉淀蛋白质的方法?各方法沉淀的机理是什么?蛋白质在水溶液中可形成亲水的胶体,蛋白质从胶体溶液析出的现象称为蛋白质沉淀作用。沉淀蛋白质的方法有: 盐析法:在蛋白质溶液中加入高浓度的强电解质溶液如硫酸铵、硫酸钠

7、等,蛋白质从溶液中产生沉淀。 机理:破坏了蛋白质分子表面的水化膜和双电层(净电荷),蛋白质溶液失去稳定性而产生沉淀。 有机溶剂沉淀法:乙醇、丙酮等有机溶剂可使蛋白质产生沉淀。降低溶液的介电常数,也破坏了蛋白质的水化膜,蛋白质产生沉淀,但必须低温操作,以防止蛋白质的变性。等电点沉淀法:用稀酸或稀碱调节蛋白质的溶液于某蛋白质等电点处,该蛋白质沉淀析出。机理:中和蛋白质表面水化膜。 重金属沉淀法:蛋白质在等电点以上的pH下,易于重金属产生沉淀。重金属与带负电的蛋白质羧基结合产生不可逆沉淀。10何谓蛋白质的变性?哪些因素会导致蛋白质的变性?蛋白质变性的机理是什么?变性蛋白质有何特征?举例说明蛋白质变性

8、的应用蛋白质变性作用是指天然的蛋白质在一些物理或化学因素的影响下,使其失去原有的生物学活性,并伴随着其物理、化学性质的改变称为蛋白质的变性。使蛋白质变性的因素有:(1)物理因素:加热、剧烈的机械搅拌、辐射、超声波处理等;(2)化学因素:强酸、强碱、重金属、盐酸胍、尿素、表面活性剂等。蛋白质变性的机理:维持蛋白质高级结构的次级键破坏,二级以上的结构破坏,蛋白质从天然的紧密有序的状态变成松散无序的状态,但一级结构保持不变。溶解度降低,结晶能力丧失;光学性质发生改变,如旋光性改变、紫外吸收增加; (3)侧链反应增强; (4)对酶作用敏感,易被蛋白酶水解。蛋白质变性的应用: (1)加热煮熟食物时食物蛋

9、白质变性既有利于食物蛋白质的消化吸收,也可使食物中的致病菌中的蛋白质变性使其失去原有的生物学活性达到消毒灭菌的目的,使食物安全可靠;(2)酒精消毒也是微生物蛋白质在酒精作用下产生变性;(3)剧烈地搅打蛋清,蛋清变稠也是由于蛋清蛋白发生变性;(4)面团在搓揉过程中面筋蛋白质发生变性,体积增加,易混入气体使面团变得松软有弹性等。11 DNA热变性有何特点?Tm值表示什么?将DNA的稀盐溶液加热到70100几分钟后,双螺旋结构即发生破坏,氢键断裂,两条链彼此分开,形成无规则线团状,此过程为DNA的热变性,有以下特点:变性温度范围很窄,260nm处的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性丧失。Tm值代表核酸

10、的变性温度(熔解温度、熔点)。在数值上等于DNA变性时摩尔磷消光值(紫外吸收)达到最大变化值半数时所对应的温度。12简述tRNA二级结构的组成特点及其每一部分的功能。tRNA的二级结构为三叶草结构。其结构特征为:(1)tRNA的二级结构由四臂、四环组成。已配对的片断称为臂,未配对的片断称为环。(2)叶柄是氨基酸臂。其上含有CCA-OH3,此结构是接受氨基酸的位置。(3)氨基酸臂对面是反密码子环。在它的中部含有三个相邻碱基组成的反密码子,可与mRNA上的密码子相互识别。(4)左环是二氢尿嘧啶环(D环),它与氨基酰-tRNA合成酶的结合有关。(5)右环是假尿嘧啶环(TC环),它与核糖体的结合有关。

11、(6)在反密码子与假尿嘧啶环之间的是可变环,它的大小决定着tRNA分子大小。13简述下列因素如何影响DNA的复性过程:(1)阳离子的存在;(2)低于Tm的温度;(2)高浓度的DNA链(1)阳离子的存在可中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电作用,促进DNA的复性;(2)低于Tm的温度可以促进DNA复性;(3)DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会,从而促进DNA复性14RNA的功能多样性表现在哪几方面?RNA的功能多样性表现于:(1) 控制蛋白质的生物合成:有三种RNA 参与了蛋白质的合成:rRNA:构成核糖体是蛋白质的合成场所;tRNA:在蛋白质合成过程中携带氨基酸

12、参与蛋白质的合成, 是将mRNA的核苷顺序翻译成蛋白质的氨基酸顺序的“适配器分子”;mRNA:是蛋白质合成的模板,指导蛋白质的合成。(2) 作用于RNA转录后的加工:snRNA。(3) 生物催化:核酶具有催化功能。(4) 与遗传信息的加工与进化有关,asRNA。病毒RNA是遗传信息的携带者。14列述DNA双螺旋结构要点,并说明该螺旋模型提出的意义。 DNA双螺旋的结构特点有:(1)两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互相缠绕形成右手螺旋;(2)每圈螺旋由10对碱基组成,双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为 0.34nm,两核苷酸之间的夹角是36;(3)碱基位于结构的内侧,而亲水的戊糖磷酸主链

13、位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯键相连,形成螺旋的骨架;(4)碱基平面与轴垂直,糖环平面则与轴平行,双螺旋结构表面有两条螺形沟,一大一小;(5)碱基按A=T,GC配对互补,彼此以氢键相连。该螺旋提出的意义:直接揭示了遗传信息的传递机制,引发了人类对生物遗传性了解的一场革命。15简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其特性?(1)共性:用量少而催化效率高;仅能改变化学反应的速度,不改变化学反应的平衡点,酶本身在化学反应前后也不改变;可降低化学反应的活化能。 (2)特性:酶作为生物催化剂的特点是催化效率更高,具有高度的专一性,因容易失活而具有反应条件温和性,活力可调节控制并与辅助因子有关。16在很多酶的活性中心均有His残基参与,请解释?酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pK值为6.07.0,在生理条件下,一半解离,一半不解离,因此既可以作为质子供体(不解离部分),又可以作为质子受体(解离部分),既是酸,又是碱,可以作为广义酸碱共同催化反应,因此常参与构成酶的活性中心。17怎样证明酶是蛋

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