1、二、实验设计【活动2】阅读教材P78【资料一】和【资料二】,讨论并回答下列问题:1有机溶剂包括水溶性有机溶剂(如乙醇、丙酮等)和水不溶性有机溶剂(如石油醚、乙酸乙酯、苯、乙醚等)。2乙醇和丙酮不能(能、不能)用于胡萝卜素的萃取。原因是萃取中乙醇和丙酮能与水混溶而影响萃取效果。3在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这五种有机溶剂中,由于石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以最适宜用作萃取剂。4萃取效率的主要取决于萃取剂的性质和用量,其次还受到原料颗粒大小、紧密程度、含水量;温度、时间等条件的影响。【思考2】从影响萃取效率的因素来看,应当如何控制萃取的过程条件?用石油醚作为萃取剂,用量相对
2、多一些;原料要粉粹、干燥;萃取温度高;萃取时间长。【活动3】结合教材图66,阅读教材P78【资料三】,讨论并回答下列问题:1填写萃取法提取胡萝卜素的实验流程:2实验步骤:原料加工:取500g新鲜胡萝卜,清水清洗、沥干、粉碎、烘干。原料装填:将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。加热萃取:安装冷凝回流装置,沸水浴加热萃取30min。过滤:待降温后,将萃取物进行过滤,除去固体物,得到萃取液。浓缩:安装水蒸气蒸馏装置,加热萃取液,萃取剂挥发,得到胡萝卜素粗提物。【思考3】在烘干过程中要注意什么问题?温度不能太高、时间不能太长,以防止胡萝卜素分解。三、粗提物的纯度鉴定【活动4】结合教材图68、9,阅
3、读教材P79“结果分析与评价”,讨论并回答下列问题:1胡萝卜素粗提物的纸层析鉴定制备滤纸条:取1830cm滤纸条,于距底端2cm处划基线,取ABCD四个点。点样:用最细注射器针头分别吸取标准样品和提取样品在AD和BC点样,吹干。层析:将滤纸卷成筒状并固定,放到盛有1cm深石油醚的密封容器中层析。观察:取出滤纸条,使石油醚充分挥发后观察层析带。2纸层析过程中的注意事项:滤纸条预先干燥处理,目的是有利于层析液的扩散;点样时应该快速细致、样点圆而细小,目的是有利于形成规整的色素斑点;滤纸筒的竖直边缘不能接触,以防止层析液沿着缝隙快速扩散;由于石油醚易挥发,因而层析容器要密封。【思考4】“胡萝卜素的提
4、取和鉴定实验”与“叶绿体中色素的提取和分离实验”相比较,相同点是都用到了萃取法和纸层析法;不同点是前者的萃取温度高、纸层析时与标准样品进行了对比实验。【活动4】观看视频:观看“胡萝卜素的提取”视频,体会并学会相关技术和方法。课后学习1尝试提取植物芳香油。2基础训练册:将基础知识整理到作业本上;完成该节训练题。6.1植物芳香油的提取导学案学习要求设计简易实验装置提取植物芳香油;了解提取植物芳香油的基本原理;学会玫瑰精油和橘皮精油的提取技术。【活动1】阅读教材P72“基础知识”部分和栏旁资料,讨论并回答下列问题:1(记忆)天然香料的主要来源是动物和植物,另外还有微生物中的真菌。2(记忆)植物芳香油
5、的特点是挥发性强,易溶于有机溶剂,成分复杂,以萜类化合物及其衍生物为主。3(记忆)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨、萃取等,而具体采用哪种提取方法要根据植物原料的特点来决定。4(理解)水蒸气蒸馏法原理:水蒸气可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物,冷却后水和油分层。方法:根据原料放置位置,水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏。不足:有些原料不适宜于水蒸气蒸馏,如柑橘、柠檬等易焦糊,有效成分容易水解。5(理解)萃取法:芳香油易溶于有机溶剂,有机溶剂挥发后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。原料浸泡在溶剂中得到浸泡液有机溶剂挥发芳香油。有机溶剂必须事先精制,除去其中的杂质,否则会影
6、响芳香油的质量。【活动2】阅读教材P73“玫瑰精油的提取”和P75“提示(一)”,讨论并回答下列问题:1(记忆)玫瑰精油化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,能随水蒸气一同蒸馏。2(学会)填写并分析下列实验流程图:采集玫瑰花:采集盛花期(5月中上旬)的玫瑰花,清水清洗沥干。装入蒸馏原料:称取50g玫瑰花放入蒸馏瓶,添加200mL蒸馏水。安装蒸馏装置:按照从左向右、自下到上的次序安装水蒸气蒸馏装置。加热蒸馏:控制蒸馏时间和速度(12滴/秒),获得乳白色乳浊液。特别注意蒸馏时间不能过短,温度不能过高。分离油层:向乳浊液加入NaCl,目的是促进油水分层,然后利用分液漏斗分离出下(上、下)层的玫瑰油
7、。除去水分:向玫瑰油中加入无水硫酸钠,除去其中的水分,24h后过滤得到玫瑰精油。【活动3】阅读教材P74“橘皮精油的提取”和P75“提示(二)”,讨论并回答下列问题:1(记忆)橘皮精油的主要成分是柠檬烯,其有效成分在用水蒸气蒸馏法提取时容易发生部分水解,使用水中蒸馏法提取时原料容易焦糊,所以一般采用压榨法提取橘皮精油。橘皮预处理:将新鲜橘皮用清水清洗、沥干。石灰水浸泡:用78石灰水浸泡橘皮24h,目的是防止压榨时滑脱,提高出油率,降低压榨液的黏稠度,过滤时不堵塞筛眼。清水漂洗:浸泡好的橘皮用流水彻底漂洗干净、沥干。粉碎压榨:将橘皮粉碎,加入小苏打和硫酸钠,目的是促进油和水的分离,然后用压榨机压
8、榨,得到压榨液。过滤压榨液:用布袋过滤,滤液再高速离心处理,分离出上(上、下)层的橘皮油。静置处理:将橘皮油在510冰箱中静置57d,目的是使果蜡等杂质沉淀,用吸管吸出上层的澄清橘皮油。再次过滤:将下层的橘皮油用滤纸过滤,目的是除去其中的水分和果蜡等杂质,将滤液与吸出的上层橘皮油合并,得到橘皮精油。观看“植物芳香油的提取”视频,体会并学会相关技术和方法。5.1DNA的粗提取与鉴定导学案学习要求知道DNA的粗提取与鉴定的原理;掌握并能分析DNA粗提取的技术方法和要求;学会DNA分子的鉴定方法【活动1】阅读教材P54“基础知识”,讨论并回答下列问题:1(记忆)提取生物大分子的基本思路是利用它们的理
9、化性质的不同进行分离。2(记忆)DNA的溶解性特点:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精。【思考1】据图51分析:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?在0.14mol/L时溶解度最小;要使DNA溶解,需要使用什么浓度?较高浓度,可使DNA溶解;要使DNA析出,又需要使用什么浓度?0.14mol/L可使DNA析出。【思考2】利用DNA不溶于酒精的原理,可以达到将DNA和蛋白质进一步分离目的。3(记忆)DNA的耐受性特点:蛋白酶能分解蛋白质而不能分解DNA;在6080时蛋白质变性沉淀而DNA分子不变性。洗涤剂能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子
10、。4(记忆)DNA的鉴定原理当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用二苯胺(甲基绿)进行鉴定。在沸水浴条件下,该试剂与DNA反应,呈现(浅)蓝色。【活动2】阅读教材P55“实验设计”,讨论并回答下列问题:1(记忆)实验材料的选取:选取材料时应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。【思考3】你认为教材提供的材料中哺乳动物的血液不适合提取DNA。2(记忆)破碎细胞,获取含DNA的滤液:鸡血:向鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并玻棒搅拌,用纱布过滤后,收集滤液。洋葱:向研钵中加入一定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,用纱布过滤后,收集滤液。【思考4】在以上实验中,蒸馏水的作用是使血细胞大量吸水而胀裂,洗
11、涤剂的作用是瓦解细胞膜,食盐的作用是溶解DNA物质。3(学会)去除滤液中的杂质:方案一:30mL滤液加NaCl使DNA溶解过滤得滤液加蒸馏水使DNA析出过滤得过滤物放到2mol/LNaCl溶液中溶解DNANaCl溶解液方案二:30mL滤液加嫩肉粉(木瓜蛋白酶)静置10分钟得DNA滤液方案三:30mL滤液6067处理过滤得DNA滤液【思考5】以上三个方案的原理分别是什么?方案一原理:方案二原理:蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三原理:DNA耐高温而蛋白质不耐高温。【思考6】方案一中:“加NaCl使DNA溶解过滤得滤液”的目的是除去不溶(可溶、不溶)于NaCl溶液中的细胞杂质;“加蒸馏水使DN
12、A析出过滤得过滤物”的目的是除去可溶(可溶、不溶)于NaCl溶液中的细胞杂质。4(记忆)DNA的析出:DNA滤液与等体积冷却酒精混合,静置一段时间后析出的白色丝状物就是DNA。5(记忆)DNA的鉴定:取2支洁净的试管,编号甲、乙,各加入等量的2mol/L NaCl溶液。甲中放入少量白色丝状物,使之溶解。在甲、乙试管中各加4mL二苯胺,混合均匀。沸水浴5min,观察颜色变化,甲试管呈现蓝色。三、操作提示【活动3】(记忆)阅读教材P56“操作提示”和P57“课题延伸”,关注下列注意事项:1在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固;鸡血静置或离心后除去血浆,以提高细胞悬液浓度。2实验中使用塑料烧杯和尼龙布,以免DNA被吸附。3玻棒沿同一方向缓慢搅拌(细胞破裂时快速搅拌),玻棒不要碰到烧杯壁。4二苯胺试剂要现用现配。5为提高DNA纯度,实验中通常使用的洗涤剂有CTAB、SDS等。观看“DNA的粗提取与鉴定”视频,体会并学会相关技术方法。1尝试从植物组织中提取DNA分子。5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段导学案 尝试PCR技术的基本操作,体验PCR技术的分子生物学实验方法;理解PCR技术的原理;讨论PCR技术的应用
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