1、,4.抗凝血机制,吞噬,清除,五大因素,凝血过程中有关物质和产物,细胞抗凝机制:,单核-巨噬细胞,抗凝血酶(Antithrombin,AT)灭活、a、a、a、a;体内最重要的抗凝物质,其抗凝作用占体内总抗凝血功能的5067,在肝素介导下起作用。肝素辅因子(Heparin cofactor,HC)抗凝谱同AT-活性仅AT-的1/3在肝素协同下作用可扩大1000倍 注意:病理性抗凝物,抗凝血酶系统:,组织因子途径抑制物 Tissue Factor Pathway Inhibitor TFPI TFPI抑制“TF-Fa”复合物和a蛋白C/蛋白S系统 灭活Va、VIIIa,激活纤溶系统,5.纤维蛋白溶
2、解系统,主要作用:分解纤维蛋白(原),清除血管内由于纤维蛋白沉积引起的阻塞,保持血流通畅,纤溶酶原,纤溶酶,u-PA t-PA,a PK,五大因素,原发性纤溶亢进:凝血瀑布没有形成,无凝血酶生成,纤溶酶活性,导致纤溶亢进,纤维蛋白原被降解;FDP 继发性纤溶亢进:继发于凝血酶生成后,有纤维蛋白单体生成及交联的纤维蛋白形成,而后发生的纤溶。FDP,D-D二聚体,止凝血障碍性疾病的发病机制,血管壁结构与功能异常血小板质与量异常凝血因子质与量异常循环中抗凝物质增加纤溶系统异常综合因素,一期止血缺陷,二期止血缺陷,纤溶系统缺陷,二、止凝血障碍的实验检查,(一)血管壁检测,1.出血时间(Bleeding
3、 Time,BT),原理皮肤刺破后,血液自然流出到出血自然停止所需要的时间,主要反映血管壁和血小板相互作用。方法出血时间测定器法,用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2-3mm 深,观察出血自然停止的时间。参考值6.92.1分钟9min为延长 临床意义Plt明显减少如原发或继发性Plt减少性紫癜 血小板功能异常(如血小板无力症)严重缺乏血浆某些凝血因子(vWD、DIC)血管异常药物,原理 对毛细血管壁施加压力,使静脉血流受阻,致毛细血管负荷,检查一定范围内皮肤出现出血点的数目,估计血管通透性、脆性,即观察血管壁、血管内皮、血小板等综合止血作用。方法血压计袖带上臂加压8min 在前臂直径5cm 圆圈内计数
4、出血点,(收缩压+舒张压)2,2、束臂试验,2.束臂试验,参考值 男性5 女性和儿童10临床意义 阳性见于:()Plt减少如ITP、AA()Plt功能异常()血管性病变血管病变:坏血病、败血症、血管性紫癜;()其他如vW病、抗血小板药物过量。,其他有关血管方面的检测:,vWF(抗原检测)免疫火箭电泳法、ELISA 减低:血管性血友病(VWD)增高:血栓性疾病vWF活性检测6酮-前列素F1a测定,(二)血小板检测,、血小板计数、血块收缩(CRT)原理 血浆凝固后由于血小板变性释放的血栓收缩蛋白使纤维蛋白网收缩而析出血清,血块因而缩小。是血小板数量和质量检测的双关试验。方法 全血标本注入试管中,静
5、置,观察析出的血清占原有全血量的百分比了解血块退缩的程度。,.血块收缩(CRT),参考值 h 开始收缩 18h-24h 收缩完全:血块收缩率65.8%11%临床意义 收缩不良见于ITP、Plt无力症、纤维蛋白原减少等。,.血小板相关免疫球蛋白(pAIg),血小板自身抗体分类:自身抗体:血小板相关免疫球蛋白(platelet associated Ig,PAIg,又称血小板相关抗体,如 PAIgG、PAIgM特异性抗体:如抗GPIIb-IIIa抗体,见于自身免疫病(ITP、SLE)同种抗体:多为反复输血时产生免疫复合物相关抗体:某些病毒感染、药物可产生,测定方法:ELISApAIg增高:是免疫性
6、血小板减少的共同特征自身抗体(最多90%),如ITP、SLE、类风湿;同种抗体,如大量输血或血小板、新生儿免疫性血小板减少症;免疫复合物相关抗体,见于药物性、败血症及AIDS等。,.血小板粘附试验,参考值:62.58.6意义:粘附减低:血小板无力症、vWD、MDS、异常蛋白增多、尿毒症、肝硬化。粘附增高:心肌梗塞、甲亢、血栓性静脉炎、脑血栓、糖尿病、高脂血症、手术后等。,.血小板聚集试验,参考值:意义:聚集减低:血小板无力症、VW病、骨髓增生性疾病,应用抗血小板药物。聚集增高:静脉血栓病、心肌梗塞、脑栓塞、糖尿病。,(三)凝血因子检测,XII,XI,IX,VIII,III,VII,X,V,II
7、,I,血液凝固,内源凝血途径,外源凝血途径,共同凝血途径,1、凝血时间(CT),原理 观察血液自离体后,到玻璃试管中凝固所需时间,血液,从血管中抽出,与带负电荷表面接触,内源性凝血途径启动,纤维蛋白形成(血液凝固),XII XIIa,参考值 6-12min(试管法)临床意义 CT延长、CT缩短病因见APTT。,原理与方法 XII因子活化剂 Ca+磷脂(代替PF3)启动血浆内源性凝血途径观察血浆凝固时间(normal:31-43s,正常对照10s为延长。),血浆,XII因子活化剂,Ca+磷脂(代替PF3),、活化的部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin
8、 Time,APTT),临床意义 主要检测内凝途径凝血因子缺陷 延长见于:,(1)内源性途径的凝血因子缺陷(、):血友病A、B,因子XI缺乏症(2)共同途径凝血因子缺陷:FV、FX、凝血酶原、纤维蛋白原(3)严重肝病、DIC(4)循环中抗凝物质增多(5)普通肝素应用的首选监测指标使APTT延长1.5-2.5倍缩短:高凝状态(脑血栓、心梗、DIC高凝期),、血浆凝血酶原时间(Prothrombin Time;PT),原理与方法 血浆+Ca+TF 血浆凝固 通过外源性凝血系统Normal:11-13s;应有正常对照,超过对照3s为延长,血浆,TF,Ca+,临床意义,PT延长:先天性凝血因子异常:、
9、因子的缺乏;后天性凝血因子异常,严重肝病、VitK缺乏。纤溶亢进、DIC后期及使用抗凝药物如双香豆素。PT缩短:DIC、心梗、脑血栓、血栓性静脉炎、MM、乙醚麻醉后。,4、血浆纤维蛋白原测定,原理:在受检血浆中加人一定量凝血酶,后者使血浆中的纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)转变为纤维蛋白,通过比浊原理计算Fg的含量。参考值:24gL,临床意义,FIB减低:肝脏疾病、DIC中晚期、原发性纤溶亢进、低或无纤维蛋白原血症、溶栓治疗等。FIB增高:血栓前状态或血栓性疾病如脑梗塞、心机梗塞,非特异急性相反应急性感染,外科手术后、恶性肿瘤等。2生理性:部分正常老人,妊娠晚期。,5、血浆因子、和促凝
10、活性测定,临床意义:增高 主要见于血栓前状态和血栓性疾病,如DVT、肺栓塞、妊高征、晚期妊娠、口服避孕药、肾病综合征、恶性肿瘤等。减低 FC减低见于血友病A、vWD、F抗体、DIC。FC减低见于血友病B、肝脏病、维生素K缺乏症、DIC、口服抗凝药物。FC减低见于因子缺乏症、肝脏疾病、DIC等。F C减低见于先天性因子缺乏症、肝脏疾病、DIC和某些血栓性疾病等。,6、血浆因子、和X促凝活性测定,临床意义增高:血栓前状态和血栓性疾病减低:相应的先天性因子、V、和X缺乏症获得性主要见于肝病、DIC、口服抗凝剂、维生素K缺乏症等,(四)抗凝血功能检查,病理性抗凝物质测定筛选试验凝血酶时间TT甲苯胺蓝纠
11、正试验APTT交叉试验诊断试验狼疮抗凝物质检测抗心磷脂抗体,生理性抗凝因子测定血浆抗凝血酶活性测定血浆PC活性测定血浆PS抗原和总蛋白测定血浆凝血酶-抗凝血酶复合物,1.血浆凝血酶时间(Thrombin Time TT),原理:血浆+凝血酶纤维蛋白形成;(1618s)超过正常对照3s为延长。,血浆,标准凝血酶,临床意义,主要检测凝血过程第三阶段 1纤维蛋白原质与量异常 2FDP增多,如纤溶亢进 3循环中抗凝物质增多,如AT-、肝素样物质 4异常球蛋白增多,如多发性骨髓瘤,2、血浆抗凝血酶活性(AT-:A),参考值 108.55.3临床意义 增高:见于血友病、白血病和再障等的急性出血期以及口服抗
12、凝药物治疗过程中。减低:见于先天性和获得性AT-缺乏症,后者见于血栓前状态、血栓性疾病、DIC和肝脏疾病等。,3、血浆蛋白C活性测定,参考值 100.2413.18%临床意义 减低:先天性或获得性PC缺乏症,后者见于DIC、肝病、手术后、口服抗凝剂、急性呼吸窘迫综合征,(五)纤溶系统检查,纤溶活性检测,筛选试验优球蛋白溶解时间D-二聚体定性试验血浆纤维蛋白原降解产物定性试验,纤溶活性检测,诊断试验血浆组织型纤溶酶原激活剂测定血浆纤溶酶原活性测定血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验血浆纤溶酶-抗纤溶酶复合物测定D-二聚体定量检测血浆纤维蛋白原降解产物定量检测,1.血浆纤维
13、蛋白(原)降解产物 Fibrin(ogen)Degradation Products,FDP,原理、方法:“抗原抗体”反应(乳胶凝集法)参考值:阴性,5mg/L临床意义:主要见于继发性纤溶活性增强,如DIC、严重感染、休克、恶性肿瘤、大手术后、深静脉血栓、肺梗塞、溶栓治疗期FDP增高对DIC诊断有重要价值,其灵敏度达100%原发性纤溶时FDP显著增高,2.D-二聚体测定,D-二聚体(D-dimer):交联纤维蛋白被纤溶酶降解的特异性分子标志物。参考范围:阴性00.256mgL,500gL 有临床意义,临床意义:深静脉血栓、肺梗塞、继发纤溶亢进(如DIC时)D-dimer显著增高。D-dimer正常时,可除外深静脉血栓形成。DIC诊断中的意义:常2000 gL以上,特异性可达100%。溶栓治疗:溶栓治疗时FDP 和D-dimer增高,溶栓完全后D-dimer下降,但FDP并不下降。原发性纤溶亢进时D-dimer不增加。,FDP,FDP,纤维蛋白单体,纤维蛋白,纤维蛋
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