急性毒性试验 LD的测定Word文档格式.docx

1、 参与科研 科技活动 自选实验 素质培养指导教师及实验技术人员姓名： 李岩实验项目起止日期：2013-4-5至2013-5-5 利用何种时间段开展实验：课余时间开展实验的累计总学时数：32学时实验项目基本原理：急性毒性试验是临床前新药安全性评价的第一步，与其它毒性实验相比具有简单、经济、易行等特点。因此新药研究开发时往往通过该项试验，尽可能多的了解一些新药的毒理学特点，为早期判断侯选新药是否具有研究开发价值提供毒性强度资料。通常测定药物ED50及LD50以初步估计药物毒性大小。 实验项目的实验方法概述：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并观察记录各组别小鼠的行为变化，通过比较不同组

2、别小鼠出现死亡的数量来计算LD50。实验项目的仪器设备组成情况：天平，1000ul的移液枪，200l移液枪，2ml离心管，1ml注射器，手术器械（包括剪刀、镊子等） ，鼠笼，离心管架实验项目的消耗材料明细：乳胶手套，KM小鼠,封口膜实验项目的主要结论：戊巴比妥钠的半数致死量为134.32mg/kg 用 Bliss 法计算半数致死量，回归方程 y（Probit）=-24.916+14.058Log（D） 半数致死量 LD50=134.32mg/kg LD50（Feiller校正）95%的可信限=92.405-205.57mg/kg LD5=102.59mg/kg LD95=175.85mg/kg

3、二、实验项目技术报告1实验原理戊巴比妥钠属于巴比妥类镇静催眠药，对中枢神经系统有普遍性抑制作用，可起到镇静、催眠、抗惊厥作用。一定剂量的戊巴比妥钠引起一般实验动物死亡。半数致死量（LD50）,即在一群实验动物中，能使实验动物一半死亡的药量，其值越大越好。2实验内容（1） 探测戊巴比妥钠LD50的剂量范围。（2） 确定组数并计算各组剂量。（3）正式实验：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并观察记录各组别小鼠的行为变化及死亡情况。（4）记录实验结果，并计算LD50。3实验方法： 1、预试溶液配制和样品处理（预实验）（1）探索剂量范围：取小鼠9到12只，以3只为一组，分成3到4组，包括组

4、距较大的一系列剂量，按组分别腹腔注射戊巴比妥钠溶液，观察出现的症状并记录动物死亡数，找出引起0及100%有效剂量的所在范围，此即上下限剂量Dn和Dm。（2）：确定组数并计算各组剂量确定组数G：根据适宜的组距确定组数，一般分为5到8个剂量，这里我们分为5组，按等比级数增减计算各组剂量：在找出Dm、Dn和确定组数后，课按下列公式求出公比r.再按公比计算各组剂量Dl-Dm,其中D1=Dn=最小剂量。配置等比药液系列，让每只小鼠给药量相等，一般为0.1ml/10g体重经过预实验的五个剂量浓度分别是77、96、120、150、190mg/kg,相应浓度：0.77、 0.96、1.2、1.5、1.9%，在

5、随后的急性毒实验中对这些剂量进行验证2、急性毒性试验：昆明种小鼠共15只，实验前一天晚禁食不禁水，实验当天称重，标记，随机分组。给5组小鼠分别按77、96、120、150、190mg/kg,腹腔注射，给药后观察动物死亡情况。记录小鼠死亡时间，死亡数目。利用Bliss法计算LD50。分组动物数（N）剂量（mg/kg）对数剂量（X）动物死亡数（n）死亡率（P=n/N）1234577961201501901.891.982.082.182.28033.366.7100表1 药物对小白鼠产生效应情况【实验结果】：LD50的测定 依据药物剂量依次给药。利用Bliss法计算LD50样品名称戊巴比妥钠 实验

6、动物昆明小鼠 给药途径腹腔注射 实验日期2013.5.5 用 Bliss 法计算半数致死量 - 剂量 对数剂量 动物数 死亡数 死亡百分率 实验机率单位 回归机率单位 （x） （只） （只） （%） （Y） （Y） 77 1.8865 3 0 0.00 - 1.6031 96 1.9823 3 0 0.00 - 2.9495 120 2.0792 3 1 33.00 4.5697 4.3119 150 2.1761 3 2 67.00 5.4303 5.6742 190 2.2788 3 3 1E2 - 7.1173 回归方程 y（Probit）=-24.916+14.058Log（D）三、参加开放性实验的体会与建议四、评价与认定指导教师评价意见与成绩评定：实验态度积极认真，并且能够较好的完成实验包含的内容。试验后积极思考老师提出的问题。 成绩：指导教师签字： 年 月 日院系主管领导审核与学分评定意见：同意核准该生选修学分数 分。 院系主管签字：学校主管部门审批意见： 部门签章：备注：