免疫印迹法测定健康体检人群幽门螺旋杆菌抗体及毒性分型结果分析Word下载.docx

1、 Nov. 15th, 2016; accepted: Dec. 16th, 2016; published: Dec. 19th, 2016Copyright 2016 by authors and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License （CC BY）./creativecommons.Org/licenses/bv/4.0/Open AccessAbstractObjective: To analyze the infect

2、ion types of Helicobacter pylori in different age groups from December 2014 to December 2012, i.e. antibodies and characteristics of toxicity distribution after infection. Methods: We use Western blotting method to detect and classify the immunophenotype of serum of physical examination population.

3、Age is used as the statistical unit, results are tested and analyzed by 2, and P v 0.05 means that the difference has statistical sense. Results: The positive rate of type II Hp infection of A urease or/and urease B for the check-up was 33.27% （5674/17,052）, and age distribution ranging from 30 to 6

4、9 enjoys the highest positive rate; the positive rate of type I Hp infection of cytotoxin A or/and vacuolate cytotoxin A was 10.58% （1804/17,052）, and age ranging from 30 - 49 enjoys the highest positive rate. In different age groups of I and II, there exist differences （P 70 years） have lower possi

5、bilities to infect Hp. Conclusion: Among physical examination population, the rate of Hp infection and the immune typing results after infection, compared with clinical cases, both have some differences. Hp infection, as well as immune typing, exists special distribution characteristics among physic

6、al examination population.KeywordsHelicobacter pylori, Health Check-Up Group, Immune Phenotype, Immune Typing免疫印迹法测定健康体检人群幽门螺旋杆菌抗体及毒性分型结果分析柳晖，白建文文章引用：柳晖，白建文.免疫印迹法测定健康体检人群幽门螺旋杆菌抗体及毒性分型结果分析J.临床医学进展,2016, 6（4）: 191-196. httpdx.doi.org10.12677acm.2016.64036同济大学医学院附属上海市东方医院体检科，上海收稿日期：2016年11月15日；录用日期：201

7、6年12月16日；发布日期：2016年12月19日摘要目的：本文回顾性分析2012年12月至2014年12月健康体检人群不同年龄段幽门螺旋杆菌感染类型的情 况，即感染后产生的抗体及毒性的分布特征。方法：采用免疫印迹法对健康体检人群的血清进行免疫表 型检测和分型，以年龄进行分组统计，检测结果采用/检验进行分析，P0.05表示差异有统计学意义。结果：17,052体检者II型Hp感染尿素酶A或/和尿素酶B的阳性率为33.27% （5674/17,052）,阳性率最 高的年龄分布是3069岁；I型Hp感染细胞毒素A或/和空泡毒素A的阳性率为10.58% （1804/17,052）, 阳性率最高的年龄分

8、布是3049岁；II型Hp感染及II型Hp感染的阳性率在不同的年龄组之间存在差异（P 70岁）Hp感染的阳性率低。结论：在健康体检的人群中，无 论是Hp感染率，还是Hp感染后的免疫分型结果，都与临床病例存在一定的差异，Hp的感染及免疫分型 在健康体检的人群中存在特殊的分布特征。关键词幽门螺旋杆菌，体检人群，免疫表型，免疫分型1. 引言胃幽门螺旋杆菌（Hp）是一种严重影响公众健康的细菌，具有很强的活性与繁殖能力。它是引起慢性 胃炎、消化性溃疡的主要病原菌，也是引发胃癌、胃粘膜相关性淋巴样组织恶性淋巴瘤（MALT淋巴瘤） 的危险因子；目前幽门螺旋杆菌感染巳成为胃肠及胃肠外相关疾病研究的热点，世界卫

9、生组织已将幽门 螺旋杆菌列入I类致癌因子1。因此，检测Hp抗体的毒性对正确治疗并根除幽门螺旋杆菌至关重要； 为了了解健康体检人群的Hp感染后的免疫表型及分型特点，我们选择免疫印迹法对无症状的体检人群 进行血清学分型，以揭示不同年龄体检人群Hp感染的免疫表型及分型的分布特征。2. 材料与方法2.1. 调查对象随机选择2012年12月2014年12月间在我院进行健康体检自然人群，共7954名，性别及年龄不 限，无明显的消化道症状及病史者。2.2. 检测方法血清Hp抗体分型检测采用上海赛科医疗发展有限公司生产的Hp免疫印迹试剂盒；具体方法是：抽 取体检人员空腹静脉血3毫升，静置2小时后分离血清，应用

10、酶联免疫吸附反应，就会在抗原相应的位 置出现显色区域,通过此种方法，可测定细胞毒素相关基因蛋白（CagA）空泡毒素（VacA）、尿素酶A （UreA） 和尿素酶B （UreB）,并可以判断Hp感染的类型。（其敏感性：96.8%,特异性：97.6%,阳性预测值：99.2%, 阴性预测值：90.7%,符合率：97%,符合普查要求）。2.3. 结果判断（Result Judgment）通过从分子水平对Hp的基因特征和表型特性进行检测，可测定细胞毒素相关基因蛋白（CagA）、空泡毒素（VacA）和尿素酶亚单位A（UreA）和B （UreB）抗体，以此可以判断体检者的Hp感染的类型，由于 Hp感染的类型

11、代表着不同的意义及流行病学的特点（如表所示），故可以为下一步的预防及治疗提供依据。分型说明CagA （I型Hp感染）细胞毒素：会引起炎症，与疾病密切相关VacA （I型Hp感染）空泡毒素：主要毒力致病因子，与疾病密切相关UreA （II 型 Hp 感染）尿素酶A： Hp感染存在的依据UreB （II 型 Hp 感染）尿素酶B：UreA和/或UreB：说明有感染CagA和/或VacA：说明有毒性2.4.统计学分析Hp抗体分型的阳性结果用百分率表示，以年龄进行分组统计,检测结果采用检验进行分析,P0.05 表示差异有统计学意义。3.结果（1） 健康体检人群Hp感染的抗体及毒性检测结果17,052例

12、体检者中，II型Hp感染尿素酶A或/和尿素酶B的阳性率为33.3% （5674/17,052）,阳性率 最高的年龄分布是3069岁;I型Hp感染细胞毒素A或/和空泡毒素A的阳性率为10.6% （1804/17,052）, 17,502例体检者中各年龄组Hp感染率随着年龄增高而上升（P 0.05）,总的感染率为43.9%,与文献报道 一致2。阳性率最高的年龄分布是30-69岁，体检人群性别与Hp感染后的免疫表型及分型的阳性率差 异有统计学意义（P0.05）,见表1、表2。（2） 不同年龄组体检人群II型Hp尿素酶A或/和尿素酶B感染的情况，见表3。（3） 不同年龄组体检人群I型Hp细胞毒素A或/

13、和空泡毒素A感染的情况，见表4。3.讨论幽门螺旋杆菌是1983年由澳大利亚学者Warren和Marshall从慢性胃炎和消化性溃疡病人的胃粘膜 中分离出的一种螺旋杆菌3。幽门螺旋杆菌具有感染后顽固，自愈率较低，根治后复发率高的特点；流 行病学研究表明幽门螺旋杆菌已感染世界范围内一半以上的人口，发展中国家高于发达国家，我国人群 感染率达50%80% 4,并且其感染率的比例有随年龄的增长而增长及呈慢性致病的特点。本文对健康 体检人群以年龄进行分组，然后进行Hp感染后免疫表型及免疫分型的调查，结果表明：体检人群中Hp 感染率随年龄增高而呈上升趋势（结果见表3、表4； P 0.05）,由于此次是在健康

14、体检人群中做的检测， 结果显示健康体检人群性别与Hp感染率有差异，与文献报道有差别2；同时，本文对17,502例健康体 检人群Hp感染者进行分型时发现，I型及II型感染的比例分别为10.6%及33.3%,明显低于临床病例的 感染率5；近年来，越来越多的研究表明，幽门螺旋杆菌感染不仅与胃肠道疾病相关，还与许多胃肠道 以外的疾病如动脉粥样硬化、高脂血症、高血压、胆囊炎、牙周疾病等密切相关相关6；最新研究表明， HP与肝癌的发生也存在一定的联系7,因此，明确Hp感染的类型比早期诊断更重要8。众所周知，幽门螺杆菌感染（Hp）被认为与胃癌的发生有一定的关系；大量流行病学资料提示Hp是胃 癌发病的危险因素。Hp具有对胃粘膜的粘附性，其在体内能分解尿素产生的氨以及其产生的毒素、酶等， 有致病性，直接损伤