水的微生物限度检查计数方法适用性试验方案文档格式.docx

1、审阅人Supervisor of QC Lab实验室主管Validation Engineer验证工程师Approved By批准人Head of QM 质量管理经理1.Protocol revise history list 方案修改历史列表Version版本Description of change变更描述01First issue 新版本2.Scope 范围本方案的范围为本工厂需进行微生物限度计数的水，包括:A类纯化水饮用水押出冷却水B类注射用水纯蒸汽高纯水验证方案分为以上A、B两类，但是每个具体的类型独立进行验证3.Objective of qualification 确认目的本工厂有

2、各类水系统需要进行微生物限度检查，2015年版中国药典有水的检测方法，拟进 行方法适用性试验。4.Responsibility 职责Responsibility 职责Prepare protocol and report, organize to proceed起草验证方案及报告并负责组织执行Review the protocol and report 审核方案和报告Authorize the protocol and report 批准方案和报告5.Validation background 验证背景本工厂有各类水系统需要进行微生物限度检查，2015年版中国药典有水的检测方法，拟 进行方法适

3、用性试验。6.Reference 参考以下文件是构成验证策略的基础文件Internal documents 内部文件CQAD-VTP-001-03验证主计划CQAD-SOP-017-07江苏费森尤斯医药用品有限公司验证通用要求CQAD-SOP-066-01验证偏差管理程序CQAD-SOP-004-05变更控制程序CHRD-SOP-001-06人力资源培训系统CQAD-SOP-001-08文件控制CLAB-SOP-038-03检验记录和报告书管理规程CLAB-SOP-013-03检定菌的管理Regulation document 法规文件中华人民共和国药典2015年版四部1105非无菌产品微生物

4、限度检查：微生物计数法7.Terms and abbreviations 术语和缩写Abbreviation / Term 术语/缩写Explanation 说明TSA胰酪大豆月东琼脂培养基R2AR2A琼脂培养基R2ARMR2A琼脂对照培养基S.aStaphylococcus aureus （CMCC（B） 26 003）金黄色葡萄球菌P.aPseudomonas aeruginosa （CMCC（B） 10 104）铜绿假单胞菌B.sBacillus subtilisCMCC（B） 63 501）枯草芽泡杆菌C.aCandida albicans （CMCC（F） 98 001）白色念珠菌A

5、.nAspergillus niger （CMCC（F） 98 003）黑曲霉SOPStandard Operating Procedure 标准操作规程FMC费森尤斯医疗用品（江苏）有限公司8.Description of system 系统描述A类水的的拟检测方法：往过滤杯里加入20ml灭菌纯化水，再加入1ml样品，过滤。将滤膜 菌面朝上贴于R2A琼脂培养基，30-35C培养不少于5天。B类水的的拟检测方法：往过滤杯里加入100ml样品，过滤，再加入100ml样品，过滤。将滤 膜菌面朝上贴于R2A琼脂培养基，30-35用R2A代替TSA,按照中华人民共和国药典）2015年版四部1105非无

6、菌产品微生物限度检 查：微生物计数法，进行方法适用性试验。9.Change/Deviation manage procedure 变更偏差管理程序验证过程中涉及到的变更和偏差按照变更和偏差管理程序进行10.Training of signatures 培训签名参与验证实施的关键人员及相关负责人必须经过相关验证培训，并在下表中签字作为凭证Department 部门11. Major Inspection Devices 主要测试、使用装置Devices测试装置编号以及 位置Usage用途Serial No.序列号Calibration Date校准日期Next Calibration Date

7、下次校准日期Signature/Date签字/日期细菌浊度计QC/LAB-010 阳性室预估菌悬液浓度1110095N/AHV-11。高压灭菌器QC/LAB-054 实验室灭培养基305080705682014-10-162015-10-15LB2-4B1型二级生物安全柜QC/LAB-045 阳性室阳性菌操作2008-31873MMM FRIOCELL 培养箱QC/LAB-120 培养室30-35 C 培养160012742015-09-102016-09-09VG 3 S25蜗旋振荡器QC/LAB-067 阳性室菌悬液的混合07.102491200微升移液枪QC/LAB-145 阳性室菌悬液

8、的稀释H17873D2015-08-122016-08-111000微升移液枪QC/LAB-075 阳性室406817A2015-07-072016-07-0610ml移液枪QC/LAB-079 阳性室244771Z12.方法适用性试验Medium培养基Name of positive bacteria 菌种名称及编号Incubation temperature and period: 培养温度和时间Staphylococcus aureus/金黄色葡萄球菌（CMCC（B） 26 003） Pseudomonas aeruginosa/铜绿假单泡菌（CMCC（B） 10 104） Bacill

9、us subtilis/枯草芽抱杆菌CMCC（B） 63 501）3035C培养时间不超过3天，接 种量不大于100cfuCandida albicans/白色念珠菌（CMCC（F） 98 001）Aspergillus niger/黑曲霉（CMCC（F） 98 003）C培养时间不超过5天，接 种量不大于10Ocf u将上述各菌种的新鲜培养物制备成不大于100cfu/0.1ml的菌悬液。采用薄膜过滤法进行方法适用性实验稀释液：灭菌纯化水。供试液：滤杯中先加入20ml灭菌纯化水，再加1ml样品，即为供试液。接种和稀释按下列要求进行供试液的接种和稀释，制备微生物回收试验用供试液。所加菌液的体积为

10、0.1ml （不大于 100cfu）。（1）试验组取上述制备好的供试液，加入试验菌液0.1mlo（2）供试品对照组取制备好的供试液，以稀释液代替菌液同试验组操作。（3）菌液对照组稀释液替代供试液，按试验组操作加人试验菌液并进行微生物回收试验.无。样品本身即为供试液。按下列要求进行供试液的接种。所加菌液的体积为0.1ml （不大于100cfu）o（1）试验组 取上述供试液100ml过滤，再加100ml供试液，加入0.1ml试验菌液。（2）供试品对照组取制备好的供试液，不加菌液，同试验组操作。（3）菌液对照组 取0.1ml试验菌液涂布。各组都制备两张滤膜。过滤后将滤膜菌面朝上贴于R2A琼脂培养基上

11、培养。判断标准：试验组菌落数（T）减去供试品对照组菌落数（P）的值与菌液对照组菌落数（M）的比值（R）应在0 .52范围内。每种样品都要独立进行三次试验。检验记录填入表1。Test测试Test item测试项目1Prerequisites Verification 先决条件确认2Equipment Information Verification 设备信息确认3Instrument Calibration Verification 仪器仪表校准确认12.1 Prerequisites Verification 先决条件确认Test 1Test item口Prerequisites Verification 先决条件确认测试1测试项目Objective 目标：1、确认试验方案己完成并批准。Procedures 程序：1、检查所有相关批准人是否已经在促生长试验方案上签字并注明了日期。Acceptance criteria 接受标准：1、试验方案已完成并批准。2、执行结果填入表2。12.2 Equipment Information Verification 设备信息确认Test 2Test item、m、q -、m、4H aEquipment Information Verification设备信息确认测试2测试项目1、确认主要设备规格型号/技