安徽省马鞍山市二中学年高二下学期期末生物试题.docx

1、安徽省马鞍山市二中学年高二下学期期末生物试题绝密启用前安徽省马鞍山市二中2018-2019学年高二下学期期末生物试题试卷副标题考试范围：xxx；考试时间：100分钟；命题人：xxx题号一二总分得分注意事项：1答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息2请将答案正确填写在答题卡上第I卷（选择题)请点击修改第I卷的文字说明评卷人得分一、单选题1 利用下图装置制作果酒和果醋，下列叙述正确的是A制作果酒时应关闭阀b，适时打开阀a几秒钟B制作果酒时如果关闭阀a，打开阀b，会导致爆瓶C制作果醋时需打开阀a通气，打开阀b排气D制作果醋时把发酵装置放到25环境中比较适宜2关于泡菜发酵的叙述，不正确的是（ ）A泡

2、菜发酵过程中产生亚硝酸盐，某些条件下转化为致癌物质亚硝胺B煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌C制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型D泡菜腌制时间过长，容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加3下列关于腐乳制作过程中，后期发酵的叙述不正确的是（ ）A后期发酵中，腐乳风味的形成与蛋白质的降解密切相关B后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程C盐的用量、酒的用量和种类、温度等均影响后期发酵D前期发酵过程中，毛霉的生长情况不影响后期发酵过程4下列对发酵过程中灭菌的理解不正确的是（ ）A防止杂菌污染B灭菌就是杀死培养基中的一切细菌但不包括芽孢和孢子C培养基和发酵设

3、备都必须灭菌D灭菌必须在接种前5以下关于传统发酵技术的相关描述正确的是（ ）A酿酒的时间越长，酵母菌产生酒精的速率就越快B在氧气、糖源充足时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸C制作腐乳需利用毛霉产生的酶分解豆腐中的蛋白质等物质D制作泡菜时，乳酸菌可以将葡萄糖分解成乳酸和CO26制作葡萄酒时，在部分发酵液中加入果胶酶处理一段时间后，得到如下表所示结果，相关叙述错误的是（ ）指标组：加果胶酶的葡萄酒组：不加果胶酶的葡萄酒透光率/%pH还原糖含量/（g/L）果胶含量/%87.34.34.37.382.23.93.311.6A果酒制作时一般将温度控制在1825B葡萄酒的澄清度随果胶含量减少而下降

4、C果胶酶在酸性条件下仍具有催化活性D组中还原糖含量高主要是因为有更多的多糖被分解7有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ）A是碳源的物质不可能同时是氮源B微生物的培养都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可C牛肉蛋白胨培养基属于合成培养基，营养全面D液体培养基有利于营养物质的吸收，可用于微生物的扩增培养8有关平板划线法操作的叙述不正确的是（ ）A第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C在每一区域内画线时接种环上的菌种直接来源于菌液D划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操

5、作者9有关稀释涂布平板法的叙述，错误的是A首先将菌液进行一系列的梯度稀释B其关键是防止杂菌污染，保证培养物的纯度C然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面D结果都是在培养基表面由单个细胞形成单个的菌落10下列有关菌种保藏的叙述错误的是（ ）A临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上B对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法C临时保藏菌种的培养基不需要更换D长期保藏菌种时，各取1毫升培养菌液和灭菌甘油，混匀后保存在零下20的冰箱中11在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10-6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述不正确的是

6、（ ）AA同学出现这种结果的原因可能是土样不同B可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误DC选项没有遵循了实验的对照原则12要将土壤的自生固氮菌与其它杂菌分离开来，应将它们接种在A加入氮源，加入杀菌剂的培养基上 B加入氮源，不含杀菌剂的培养基上C不含氮源，不含杀菌剂的培养基上 D不含氮源，加入杀菌剂的培养基上13若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，要将它们分离可采用的培养基是（ ）A加食盐的培养基和蛋白胨培养基 B伊红美蓝培养基和无氮培养基C斜面培养基和液体培养基 D

7、加青霉素培养基和伊红美蓝培养基14为了使牛仔裤呈现“穿旧”效果，在工业洗衣机中用酶洗代替传统的浮石擦洗，是目前重要的生产手段（工艺流程见下图）。下列叙述中错误的是（ ）A纤维素酶在仿旧中的作用机理与其在洗衣粉中去污的机理相似B在上述工艺中，为重复使用纤维素酶，可选用适当的包埋剂固定化酶C在上述工艺中，通过调节温度、酸碱度、处理时间可控制仿旧颜色的深浅D纤维素酶是可先将纤维素分解为纤维二糖15某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5 cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表。与此有关的叙述不正确的是()组别1组2组3组4组土壤灭菌不灭菌灭菌不灭菌处理湿润湿

8、润较干燥较干燥A探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用B预期结果是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解C为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理D该实验的自变量为土壤是否灭菌处理，实验中的对照组是1和316以下分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是（）A倒平板时就加入了刚果红的染色法，需用1molmLNaCl处理15分钟B富集培养这一步可省略，但所培养的纤维素分解菌浓度可能会比较低C经稀释培养后，分离的过程需要用到鉴别培养基D为确定得到纤维素分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验17刚果红染色时，加入刚果红应在（ ）制备培养基时 梯度

9、稀释时 倒平板时 涂布时 长出菌落时A B C D18以下有关生物技术实践的叙述中，错误的是（ ）A显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法B平板划线法能用来测定土壤溶液中某活菌数目C培养能合成脲酶的细菌时可在培养基中添加尿素作为唯一氮源D挑选菌种时可在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌19若除酶外所有试剂已预保温，则在测定酶活力的实验中，下列操作顺序合理的是（ ）A加入酶加入底物加入缓冲液保温并计时一段时间后检测产物的量B加入底物加入酶计时加入缓冲液保温一段时间后检测产物的量C加入缓冲液加入底物加入酶保温并计时一段时间后检测产物的量D加入底物计时加入酶加入缓冲液保温一段时间后检测产物的量2

10、0下图是针对某加酶洗衣粉的相关实验，其中说法错误的是A加酶洗衣粉中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶B该实验的目的是为了检验洗衣粉中是否加入了蛋白酶C图示实验存在二处明显的错误，实验结果不能令人信服D若 A 组中蛋白膜消失，则此加酶洗衣粉不能用于洗涤丝绸及棉纤维类衣物21关于探究酶特性的实验的叙述中，正确的是A若探究温度对酶活性的影响，可选择过氧化氢溶液为底物B若用淀粉、蔗糖和淀粉酶来探究酶的专一性，可用碘液对实验结果进行检测C在探究pH对酶活性的影响的实验中，温度和pH是自变量D若探究过氧化氢酶的离效性，可选择无机催化剂作为对照22下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是

11、（ ）A固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧B利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件C固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显D利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物23关于固定化酶中用到的反应柱理解正确的是( )A反应物和酶均可自由通过反应柱B反应物和酶均不能通过反应柱C反应物能通过，酶不能通过D反应物不能通过，酶能通过24下列有关“用海藻酸钠固定酵母细胞”及“用固定化酵母细胞发酵”实验的叙述，错误的是A在将海藻酸钠溶液和酵母细胞混合之前，需用蒸馏水将酵母细胞活化B配制海藻酸钠溶液时，通常用酒精灯加热，且边加热边搅拌C固定好的酵母细胞（凝胶珠）需要

12、用CaCl2溶液冲洗23次D用固定化酵母细胞发酵时，需要提供适宜的条件，如营养物质等25橘皮精油的提取中，用压榨法得到压榨液，要使橘皮油易于与水分离，这种物质是()A0.5%的小苏打 B5%的硫酸钠 C0.9%的生理盐水 D0.25%的硫酸钠26提取胡萝卜素和玫瑰精油时都需要加热，但是用萃取法提取胡萝卜素时采用水浴加热法，而用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油时可以用直接加热法，其原因是A前者需要保持恒温，后者不需要恒温B前者容易蒸发，后者不容易蒸发C胡萝卜素不耐高温，玫瑰精油耐高温D前者烧瓶里含有机溶剂，易燃易爆，后者是水27下列关于玫瑰精油提取装置的说法，正确的是 （） A本装置为萃取装置，其中玫瑰

13、花瓣和清水的质量比为1：4B图中2为进水口，3为出水口C收集后的液体是油水混合物，需要加入氯化钠，促进水、油分离D使用装置时，由于原料在水中，不易产生原料焦糊问题28下列有关植物芳香油的提取方法的叙述中，正确的是( )植物芳香油具有较强的挥发性，能随水蒸气蒸发，因此可利用蒸馏法提取压榨法是利用机械压力榨出芳香油将新鲜的植物材料浸泡在用于萃取的有机溶剂中，然后蒸去溶剂，即可获得植物芳香油，此为萃取法A B C D29下列有关植物有效成分提取的说法正确的是A乙醇和丙酮虽然都是有机溶剂，但因其可与水混溶，所以不能用于胡萝卜素的萃取B在高温下延长蒸馏时间，有利于充分提取玫瑰精油C对提取出的胡萝卜素进行

14、纸层析鉴定时，可用最小号的滴管吸取少量的样品进行点样D提取橘皮精油的实验中，用石灰水浸泡的目的是使橘皮油易于与水分离30提取橘皮精油的过程中，需先后进行A、B两次过滤，下列相关说法正确的是AA过滤是使用滤纸过滤的，其目的是除去固体物和残渣BB过滤是使用普通布袋过滤的，其目的是除去较小的残留固体物C经过A过滤后的滤液，直接利用滤纸进行B过滤D经过A过滤后静置处理得到的上清液和B过滤后得到的滤液就是橘皮精油第II卷（非选择题)请点击修改第II卷的文字说明评卷人得分二、非选择题31我们的日常生活与传统发酵技术密不可分，如常见的果酒、果醋、腐乳、泡菜等，结合所学知识回答下列问题：（1）实验室制作果酒时

15、，将葡萄汁装入发酵瓶要留1/3空间，目的是_。（2）与制作果酒相比，利用醋酸杆菌制作果醋需在_的条件下完成。（3）制作腐乳时，卤汤中酒精含量应控制在12%左右，酒精含量过高导致的结果是_。（4）在测定泡菜中亚硝酸盐的含量时所用的方法是_。32锈去津是一种含氮的有机化合物，是一种广泛使用的除草剂，且在土壤中不易降解。为修复被其污染的土壤，某研究小组按下图选育能降解锈去津的细菌（目的菌）。已知锈去津在水中溶解度低，含过量锈去津的固体培养基不透明。（1）为获取目的菌，图中AC均为_的选择培养基，AC培养的目的是_。（2）若图为所测得的AC瓶中三类细菌的最大密度，则甲类细菌密度迅速降低的主要原因是_。

16、图中从C瓶将细菌接种到固体培养基常用的接种工具是_。（3）含过量锈去津的培养基是不透明的，其中_菌落即为目的菌落。33回答下列问题：（1）酶活性是指酶催化一定化学反应的能力，酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化某一反应的_来表示。（2）纤维素酶是一种复合酶，包括_酶、_酶、_酶。（3）在以纤维素为唯一碳源的培养基上培养一段时间后，培养基表面形成多个单菌落，但不同菌株分解能力有差异，为选出高效分解的菌株，请利用所学知识，写出具体思路：_34请根据胡萝卜素的提取过程及其性质，回答下列问题：（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是_。不采用蒸馏法的原因是_。（2）以下为提取胡萝卜素的操作流程：胡

17、萝卜粉碎干燥A过滤B胡萝卜素，其中B过程叫_。（3）如图甲为提取胡萝卜素的装置示意图，请指出其中的一处错误并改正：_。（4）图乙是胡萝卜素粗品鉴定装置示意图。该鉴定方法的名称是_法。在图乙的胡萝卜素层析结果示意图中，A、B、C、D四点中，属于提取样品的样点是_。参考答案1A【解析】制作果酒时应关闭阀b，适时打开阀a几秒钟，b是进气口，a是出气口。制作果酒应该保持无氧环境，关闭阀b，由于酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，适时打开阀a几秒钟放气。A正确；制作果酒时如果关闭阀a，打开阀b，会导致葡萄酒溢出。B错误；制作果醋时需打开阀a通气，打开阀b排气，果醋制作需要通入氧气，但是b是进气口，a是出气口。C

18、错误；制作果酒时把发酵装置放到25环境中比较适宜。D错误。【考点定位】果酒和果醋的制作【名师点睛】发酵技术中常用菌种的比较酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型异养需氧型异养厌氧型发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧无氧生长适宜温度182530351518室温生产应用酿酒、发面酿醋制作腐乳制作酸奶、泡菜2D【解析】【分析】泡菜制作所用微生物为乳酸菌：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸；（2）利用乳酸菌制作泡菜定的过程中会引起亚硝酸盐含量的变化。【详解】A、泡菜制作过程中会产生亚硝酸盐，若摄入体内的亚硝酸盐含量过多，在特定的

19、条件下会转化成亚硝胺，亚硝胺是化学致癌因子，可导致细胞癌变，A正确；BC、制作泡菜所用菌种为乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型；故为营造无氧条件，需煮沸泡菜盐水以除去水中的氧气，同时此举还可杀灭盐水中的其他杂菌，B、C正确；D、泡菜腌制时间过短，容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加，而在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势，D错误。【点睛】温度过高、食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般在腌制10天后亚硝酸盐含量开始下降。3D【解析】【分析】腐乳制作原理：在严格无菌的条件下，将优良毛霉菌种接种在豆腐上，毛霉等微生物能产生蛋白酶和脂肪酶，将

20、蛋白质分解为肽和氨基酸，将脂肪水解为甘油和脂肪酸，该过程将长满毛霉的豆腐块整齐地摆放在瓶中，并逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口的表面盐要铺厚些。【详解】A、后期发酵风味的形成中蛋白酶将蛋白质分解成氨基酸，脂肪酶将脂肪水解成甘油和脂肪酸，A正确；B、后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程，加入配料后生成腐乳的香气，B正确；C、盐的用量适度，可以使得腐乳变硬，后期制作不会过早酥烂，而且抑制杂菌生长；酒能抑制杂菌生长，而且使得腐乳具有独特的香味，C正确；D、前期发酵过程中毛霉的生长情况可以形成腐乳的体，而且毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶，有利于后期发酵，D错误。【点睛】卤汤中的酒应控制在

21、12%左右，酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败。4B【解析】【分析】灭菌指的是指用物理或化学方法杀灭物质中一切微生物的过程，其目的是达到阻止杂菌污染的效果。【详解】A、因发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），故A正确；B、灭菌就是杀死培养基中的一切细菌（包括芽孢和孢子），B错误；C、灭菌的对象是与所培养微生物接触的所有物质，包括培养基、发酵罐、接种环等，C正确；D、灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死，D正确。【点睛】常用的灭菌方法有灼烧灭菌（适用于接种环、接种针或其他金属工具）、干热

22、灭菌（适用于玻璃器皿等）和高压蒸汽灭菌（适用于培养基）三种。5C【解析】【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，适宜条件是18-25，密封；果醋所需的菌种是醋酸菌，条件是30-35，持续通入空气；豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。【详解】A、利用酵母菌酿酒时，在一定范围内，发酵时间越长，产生的酒精量就越多，但时间过长后，由于营养物质的消耗等原因，酒精产量减少，A错误；B、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养

23、需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B错误；C、制作腐乳需利用毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质分解成多肽和氨基酸，将脂肪分解成甘油和脂肪酸，C正确；D、制作泡菜的微生物是乳酸菌，乳酸菌可以将葡萄糖分解成乳酸，不能产生CO2，D错误。【点睛】本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作，要求考生识记参与果酒、果醋和腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒、果醋和腐乳制作的原理及条件，能结合所学的知识准确判断各选项。6B【解析】【分析】本题以两组实验探究在葡萄酒制作过程中果胶酶加入与否对结果的影响，分析表格数

24、据可知：与不加果胶酶的组相比，加入果胶酶后组葡萄酒的果胶含量降低，透光率、PH及还原糖含量均有不同程度的增加。【详解】A、葡萄糖是由酵母菌发酵产生的，酵母菌发酵的最适温度为18-25，A正确；B、在酒精发酵前和酒精发酵过程中加入果胶酶，能加大色素或芳香物质的浸提、增大出汁率，葡萄酒的澄清度随果胶含量减少而提高，B错误；C、果胶酶在PH为3.0左右时活性最强，故果胶酶在酸性条件下仍具有催化活性，C正确；D、组中加入了果胶酶，果胶酶将多糖分解为还原糖，故与组相比，果胶含量低，还原糖含量高，D正确。【点睛】果胶是植物细胞壁及胞间层的主要组成成分，是果汁中影响出汁率和果汁澄清的主要原因；果胶酶是分解果

25、胶的一类酶的总称，可以将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。7D【解析】【分析】本题主要考查微生物的营养需求及培养基的组成及功能，培养基的组成成分包括碳源、氮源、水和无机盐，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质及氧气的要求。【详解】A、是碳源的物质同时也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误；B、并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源：自养的微生物不需要碳源、固氮微生物不需要氮源.，B错误；C、牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的培养基，属于天然培养基，C错误；D、液体培养基中不加任何凝固剂，这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的

26、养料，利于微生物扩增培养，D正确。【点睛】不同的微生物，所需营养物质由较大差别，要针对微生物具体情况进行分析，本题需要考生比较分析，是对考生综合能力的考查。8C【解析】【分析】平板划线操作的基本步骤是： （一）、右手持接种环，经火焰灭菌，待冷却后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口通过火焰，将已经冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口通过火焰并塞上棉塞。（二）、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，注意接种环不应划破培养基表面。（三）、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，

27、表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三、四、五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。（四）、将平板倒置，放入培养箱中培养。【详解】接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B正确；第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端，C错误；划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D正确。故选C。9D【解析】【分析】稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释

28、度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。【详解】稀释涂布平板法首先将菌液进行一系列的梯度稀释，A正确；稀释涂布平板法的关键是防止杂菌污染，保证培养物的纯度，B正确；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，C正确；结果在培养基表面由单个细胞形成单个菌落，也可由两个或多个细胞连在一起形成一个菌落，D错误；因此，本题答案选D。【点睛】解答本题的关键是：明确微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，再根据题意作答。10C【解析】【分析】本题考查菌种的保存：对于频繁使用的菌

29、种，可以采用临时保藏的方法，将其接种到试管内的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。等到菌落长成后，将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。但该方法保存时间不长，菌落容易被污染或产生变异。对于要长期保存菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与灭菌的甘油充分混匀后，放在20的冷冻箱中保存。【详解】A、临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，等到菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A正确；B、对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，B正确；C、临时保藏菌种的培养基需要定期更换，C错误；D、长期保藏菌种时，各取1毫升培养的菌液和灭菌的甘油，混匀后保存在零下