最全糖化血红蛋白测定的原理与仪器解析.docx

1、最全糖化血红蛋白测定的原理与仪器解析糖化血红蛋白（HbA1c）测定的原理方法与仪器解析及临床意义糖尿病目前在世界上发病率很高，占免疫病的比率，在发达国家高达2-5%，而我国糖尿病的发病率亦达2-3%，并且每年还以1的速度增长。糖尿病是一种终生性疾病，其并发症是至残至死的主要原因，所以人们希望能尽早发现和治疗糖尿病。临床上广泛采用血糖参数来判定糖尿病，而血糖参数只代表抽血时的血糖水平，对确诊有局限性。近年来的医学研究证明：血液中的糖化血红蛋白（HbA1c）浓度相对稳定，其浓度值能准确反映最近1-3个月期间的血糖水平，便于医生对糖尿病进行早期诊断；也可用于糖尿病人的血糖监控及慢性并发症的判断等，受

2、到临床的广泛重视，目前我国各大、中型医院正逐渐开展糖化血红蛋白（HbA1c）占总血红蛋白（Hb）的百分含量的测定项目。有些发达国家已将HbA1c的测定列入中老年人的常规体检项目。测定HbA1c比较常用的方法，目前有乳胶凝集反应法和离子交换高压液相色谱法两种，分别用生化分析仪和糖化血红蛋白自动分析仪进行测定。1HbA1c的临床意义糖化血红蛋白是一项说服力较强、数据较客观、稳定性较好的生化检查，不受偶尔一次血糖升高或降低的影响。能反应糖尿病患者2-3个月以内的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切，在糖尿病学上有重要的临床参考价值。 11增高：测定HbA1c可以了解糖尿病人在23个

3、月的血糖控制情况。此外，用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人，地中海贫血和白血病病人亦增高。12降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性低血糖症等。13作为糖尿病的病情监测指标131作为轻症、型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。132不是诊断糖尿病的敏感指标，不能取代现行的糖耐量试验。133可以列为糖尿病的普查和健康检查的项目。14当HbA1c9时，说明患者存在着持续性高血糖，可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。临床经常以糖化血红蛋白作为监测指标来了解患者近阶段的血糖情况，以及估价糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。15对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿、畸形胎、死胎，以及急、慢性并发症

4、发生发展的监督具有重要意义。16对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖（测血糖当然增高）抢救者，急查糖化血红蛋白具有鉴别诊断的价值。17对于糖化血红蛋白特别增高的糖尿病患者，应警惕如酮症酸中毒等急性合并症的发生。2临床常用的测定糖化血红蛋白HbA1c的方法21乳胶凝集反应法乳胶凝集反应法是利用抗原抗体直接测定总血红蛋白Hb中的糖化血红蛋白HbA1c的百分含量。目前有国内外几家厂商可以提供HbA1c测定的试剂盒。这种免疫反应是由被测血样品中的总Hb和HbA1c与试剂中的抗体结合而形成凝集，凝集量随HbA1c浓度的大小而变化。使用生化分析仪器来进行比浊测定HbA1c的浓度，采用终点法，生化仪通过测

5、定反应液的吸光度值，可直接反映出凝集量的多少；推算出HbA1c占Hb的百分含量，测定时，仪器多采用660nm单色光做主波长，800nm单色光做副波长，通过标准曲线得出实测值。由于这种试验其标准曲线是非线性的，所以在测定前，首先用随试剂盒一起带有的5种不同浓度的定标液，做出5点非线性标准曲线。曲线和数值存在生化仪的贮存器中，测定样品时，实测出的吸光度值A与标准曲线比较，由仪器CPU求出实测样品中的HbA1c百分含量。乳胶凝集反应法测定HbA1c简便、不用增加仪器，可直接用自动生化分析对样品进行快速测定。该方法也可以用手工的方法，在酶标仪进行测定，是目前使用较多的方法。但是乳胶凝集反应法其准确性和

6、重复性均有欠缺。 22离子交换高压液相色谱法HPLC使用离子交换高压液相色谱HPLC（high pressure liquid chromatography）来测定HbA1c的百分含量目前被认为是分析HbA1c的金标准。采用HPLC方法工作的全自动糖化血红蛋白分析仪器，以其快速、简便、精巧、准确等特点，受到越来越多用户的欢迎。 色谱分析是一类利用混合物的各组分在不同相上的分配差别，在两相物质相对运动过程中，将混合物中的各种成份分离开的一种分析技术。液相色谱是以液体或固体为固定相，以液体为液动相的色谱法的总称。色谱法又叫色层或层析，这一技术在生命科学研究中用于生物活性物质的分析；生物活性物质是以

7、混合物形式存在，人类血液中的蛋白质有上千种，只有把混在一起的被测蛋白分离出来，才能准确测定；在HbA1c的测定时，可以通过高精度HPLC，将HbA1c从Hb中分离出来，才能得到准确的数值。在生命科学研究中，活性物质的分离主要应用的是液相柱色谱。这种技术诞生于20世纪初叶，俄国化学家茨维特把植物色素混合液置于装有碳酸钙吸附剂的玻璃管顶端，用石油醚洗脱后，在玻璃柱上出现了几组颜色不同的色带，这些色带随着不断的洗脱，越分越开，先后从玻璃柱下端流出，茨维特把这样一种用流体洗脱色素混合液，使之通过碳酸钙做固定相从而实现分离的技术，起名叫“色谱法”。这种方法被推广用于分离许多混合物中的各种物质，被分离物质

8、已和颜色无关了，但“色谱”分析的名称仍沿用至今。当然更贴切的名称应该叫“层析法”。早期的“色谱柱”体积大，做固定相的物质颗粒大，分离时需要大量的洗脱液。并且洗脱液靠重力流动，分离时间长，效率低。随着科学技术的进步，20世纪60年代，人们研制出新型液相柱，同时采用高压输液泵自柱上端为洗脱液加压，大大加速了洗脱液的流速，开发出相应的高灵敏度的检测器，新的分析仪器高压液相色谱仪在70年代诞生，很快就占领了分析化学的舞台。特别是在生命科学的研究中，HPLC技术由于对被测物活性影响小，几乎可以测定生物医学中所有的非发挥性物质，如近年来利用离子交换HPLC法测定血液中的HbA1c的百分含量，被认为是糖尿病

9、诊断的金标准。 3糖化血红蛋白自动分析仪糖化血红蛋白自动分析仪采用离子交换HPLC法测定HbA1c。离子交换HPLC法，是利用能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的方法。仪器使用阳离子交换柱进行HbA1c的百分比测定；当一定量的全血样品被取样针吸入到进样装置内，在稀释部分被溶血，释放出红细胞中的血红蛋白Hb，并由稀释液稀释，稀释好的已经溶血的样品，由高压泵注入离子交换柱。柱内的固定相是最新开发的非多孔性，不溶和可渗透的交联高聚物，上面分布固定的带电荷基团和能游动的配衡离子；样品通过过滤器从交换柱顶端加入后，由三种不同浓度的盐洗脱缓冲液（流动相）洗脱，使样品向下移动。此时溶液中所含血红蛋白

10、（Hb）的各种组份即与固定相上能移动的离子进行交换，样品中的血红蛋白多种组分在固定相上连续进行可逆的交换吸着和解吸作用，而3种不同离子浓度的盐液，形成线性梯度洗脱，洗脱液No1叫起始缓冲液，含低离子浓度的盐，洗脱液No2、No3缓冲液，其离子浓度依次增高很多，这种流动相离子浓度的改变对分离效果的影响非常明显，前面洗脱出来的组分分离效果好，色谱峰很窄，后面组分也能在很短时间内洗脱出来，大大缩短了分离时间；所以全自动血红蛋白分析仪，在1分多钟内、Hb中的多种成份被分离成6个部分，其中的HbA1c、HbF、HbA1被有效、精确的分离；由交换柱流出的Hb成分到达仪器的检测器，检测器内装有发射单色光的发

11、光二极管，通过双波长可见光比色法测定HbA1c、HbF、HbA1三个参数。仪器的检测器检测出分离后HbA1c、HbF、HbA1组分的吸光度值，与HbA1c标准品吸光度值比较，分析计算出结果，最后以百分率表示的Hb组分结果与色谱图一起打印出来。 离子交换柱HPLC法对全血直接测定HbA1c，其批内和批间变异系数CV均可以小于1%（CV 1%），结果精确，HbA1c检测结果不受存在的变异型血红蛋白及其衍生物的影响，特别适合于糖尿病人的监控。关于糖化血红蛋白的不同的测定方法与正常值之间的关联！由于现在糖化血红蛋白测定方法不同，标注的正常值也不同，不光患者糊涂，临床工作中也不方便。现在糖化血红蛋白的测

12、定方法有5种：（1）离子交换高效液相色谱分析法检测糖化血红蛋白HbA1c的金标准；（2）电泳法；（3）微柱法；（4）亲和层析法；（5）免疫法。比如我们医院以前用的是免疫法，正常值是5%-7%，现在用的是微离子柱层析法（机器型号是DREW DS5），正常值是6%-8%，请教大家这些不同的测定方法得到的测量值之间是否有一定的比例关系？国际上有没有糖化血红蛋白测定的统一标准（测量方法及测量值）。糖化血红蛋白（Glycated hemoglobin, GHB）实验通常是检测由血红蛋白和葡萄糖经缓慢过程且非酶促反应所形成的稳定部分，其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比,积累并持续于红细胞120天生

13、命期中。由于红细胞允许葡萄糖自由渗透，血液样本中糖化血红蛋白水平反应过去120天内的平均血糖水平。GHB检测用于常规实验室始于二十世纪七十年代末期，且稳定发展至今，成为评价血糖控制水平的重要指标。临床实验室中应用的GHB检测方法主要分为两大类，一类方法基于GHB与非GHB的电荷不同，如离子交换色谱、电泳和等电聚焦方法；另一类方法基于血红蛋白上糖化基团的结构特点，如亲和层析和免疫实验，每种方法各有优缺点，对临床实验室而言，尚无“最佳”方法可以选择。虽然方法不同，结果的表示不同，但在正确操作和解释的情况下，方法间可以有较好的相关性，并能为临床提供有用的信息。目前在美国进行的糖尿病控制和并发症临床研

14、究（diabetes control and complications trial, DCCT），表明了糖尿病患者病程的发展和合并症与血糖控制的密切关系，及血浆葡萄糖水平与HbA1c水平间的关系。在此基础上，美国糖尿病协会（American Diabetes Association）提出了糖尿病治疗的建议，指明测定HbA1c重要性，并在世界范围内被广泛应用。为了更好地应用DCCT的结果治疗糖尿病人，为临床医生提供准确的实验室数据，美国临床化学协会（AACC）在1993年成立分委会进行GHB测定的标准化工作，使不同实验室（方法）的结果可溯源至DCCT的参考结果。标准化工作由美国国家糖化血红蛋白

15、标准化计划（National Glycohemoglobin Standardization Program, NGSP）指导委员会于1996年完成。这一工作使得美国临床实验室间GHB测定的结果有了大的变化：2000年，90%实验室以HbA1c报告糖化血红蛋白的结果，所有参加NGSP活动实验室测定结果的室间C小于5%，HbA1c结果与靶值的偏差小于0.8%。目前，美国绝大多数实验室报告的结果，均可溯源至DCCT结果，使对糖尿病及其并发症的治疗和预防工作有了统一的参考标准。美国临床实验室标准委员会（NCCLS）采纳了NGSP的GHB测定的标准化模式。一、NGSP实验室网络NGSP由执行委员会和实

16、验室网络组成（图1）。实验室网络中包括管理核心（NETCORE），一级中心参考实验室（CPRL），一级参考实验室（PRLs）和二级参考实验室（SRLs）。管理核心（NETCORE）负责直接与执行委员会联系，分析全部网络监测数据并转送执行委员会审批，向合格的实验室或厂家颁发证书。一级中心参考实验室依据在DCCT项目中使用的方案5，使用Bio-Rex 70树脂HPLC方法测定HbA1c，建立基准。虽然，采用的方法有一定缺限（如受HbF、变异血红蛋白的干扰，且测定速度较慢），但长期稳定性（Cs3%）是NFSP考虑其作为参考方法的主要依据。一级参考实验室作为中心参考实验室的后备支持，采用相同的实验方法

17、，并确保结果可溯源至CPRL。其他网络实验室为SRLs，可使用不同的实验方法，但必须溯源至CPRL方法。每个SRL都应得到NGSP相应的证书，并可直接参与生产厂家的校准工作。NGSP实验室网络中的各实验室都必须依据NCCLS EP5-A文件进行方法精密度评估，并每月参加用新鲜血样本进行的实验室间比对（n=100）和依据NCCLS EP9-A文件进行的偏差评估（表1）。NGSP实验室网络与各临床实验室和生产厂家协同工作，完成校准、颁发证书和能力验证工作。二、标准化计划的应用GHB测定标准化计划的目的是：校准实验室测定方法、为检测方法和实验室颁发证书、及指导常规实验室开展室间质量评价活动。在检测方

18、法获得证书前，生产厂家必须确保他们的检测结果与实验室网络的结果具有可比性，厂家可在网络实验室的帮助下，达到以上目的。同时，必须按规定的程序进行方法精密度检测和室间比对。在全部数据经管理核心评审合格后，可获得合格证书。检测实验室也可按相同程序获得相应证书，参加网络实验室比对检验的实验室可获得“水平1”证书，否则，为“水平2”证书。GHB标准化计划的效益，临床实验室可以通过参加能力验证活动获得，这种活动通常使用由网络实验室定值的新鲜血样本，评估结果的偏差和实验室间及方法间的可比性。标准方法的使用，让实验室检测结果与DCCT实验结果结合起来，从而更好地服务于临床医生和糖尿病患者。三、GHB测定方法的

19、选择为保证实验室结果可以溯源至DCCT的结果，且在实验室具有可比性，美国糖尿病协会（ADA）建议只使用NGSP验证的GHB实验方法6，除具可比较性外，这些方法还具有较好的精密度，通常总不精密度5%。GHB实验的方法原理不同，各有优缺点，影响因素亦不相同。临床实验室可根据所用的方法，明确易受的干扰因素：如不同血红蛋白组分、高HbF; 餐后急性产生的可逆性葡萄糖血红蛋白中间产物（不稳定GHB或pre-A1c），同时，样本的保存对某些实验方法有较大的影响。四、GHB测定国际标准化1995年国际临床化学组织（IFCC）建立了工作组，以研发HbA1c测定的原级参考物和参考方法为目的，在其建立的实验室网络

20、中，使用纯化的HbA1c和HbA0进行校准，并致力于建立与NGSP网络结果间的联系。实验结果显示，IFCC的HbA1c结果略低于NGSP结果。在NGSP的中心参考实验室内将建立IFCC参考方法。糖化血红蛋白测定方法简述糖化血红蛋白测定（glycosylated hemoglobin A，GHb）成人红细胞中的血红蛋白有HbA（占9597以上），HbA2（占2.5），HbF（占0.2）。当HbA中的部分血红蛋白被糖基化后，其中由于HbA的链N末端的缬氨酸分子与葡萄糖等己糖分子相结合而使其在血红蛋白电泳中成为HbA之前的快泳、HbA1组分，在离子交换柱层析中亦在HbA之前首先被洗脱，糖化Hb可分为

21、HbA1a（其中与1，6-二磷酸果糖结合的为HbA1a1；与6-磷酸葡萄糖结合的为HbA1a2），HbA1b（尚无明确定义，包括HbA1b1，HbA1b2，HbA1b3），HbA1e（与葡萄糖结合）和HbA1d（链和链内氨基以及链的N末端基团上的烯化血红蛋白；包括HbA1d1，HbA1d2，HbA1d3）共九种。最重要的是HbA1c.HbA1e的生成量取决于血糖的浓度，正常人约占46。由于红细胞的半寿期是60天，所以GHb的测定可以反映测定前8周左右病人的平均血糖水平。GHb测定方法很多，两种最基本的方法是：测定HbA1组分和仅测定HbA1c.高压液相色谱（HPLC）法可精确分离HbA1各组分

22、；并分别得出HbA1a、HbA1b、HbA1c、HbA1d的百分比，CV3，是参考方法，其次还有低压液相色谱（LPLC），目前二者均有高精度的自动化仪器，作为常规方法用于临床；硼酸亲和柱层析法CV（14.7），阳离子交换柱层析法CV（216），测定的血红蛋白类型为HbA1.前者在样本量不大的实验室仍可使用；后者在分离过程中对pH和温度的要求极高，HbF是其干扰因素。电泳法CV（410），分离Hb类型和干扰因素与阳离子交换柱层析法相同；比色法可用于自动生化仪，无血红蛋白分离步骤，干扰因素小，具特异性和敏感性，但CV较大（418），且样品用量大，用浓度单位报告的方式还未被广大临床医师接受。一些医院

23、用的糖化设备1.糖化血红蛋白分析系统 型号:HLC-723 G7 HLC-723 G7 是由最新出品的全自动糖化血红蛋白分析仪。离子交换HPLC 法是HbA1c 检测的金标准，得到 NGSP 认证。检测结果准确精密 CV1%。G7 的检测速度相当快，每个测试只需1.2分钟，它的操作也相当简便，原始试管即可上机测试，无需人员看护。更有急诊插入功能。日常维护全部自动进行，所有的设计确保最大程度上的解放人力。 快速检测 从开机到报告第一个结果，仅需3.6分钟。检测时间为1.2分钟。 设计精巧 该仪器体积，其长、宽、高均在50cm左右，重量仅为50Kg。 操作简便 标本无需前处理，只需放好样本架，轻轻

24、一按启动键。 维护简单 机器自动进行日常维护。 可选性强 不同型号的原始管均可连续进样，带条型码的原始管与不带条型码的二级管均可置于试管架上应用。 功能强大 具备急诊插入优先检测功能，主机查询功能，试剂量监测直观。 准确精密 对稳定的HbA1c进行直接测定，其CV小于1%。2.全自动糖化血红蛋白分析装置HS-12 HS-10性能特点： 采用“金标准”离子交换高效液相层析法 最新开发的非多孔离子交换HPLC常光特有的即插式层析柱，装卸时不需要工具，使部件更换简单易行 全自动高速检测 90秒/样本 常光通过光感原理，开发出独特的可变稀释倍率功能，可智能地随样品浓度改变稀释倍率，大大提高了检测范围

25、采用离子交换高压液相层析法，对稳定的HbA1c进行直接测定，C.V.0.5%、共存干扰物影响极小 完美的自动进样系统 ：自动添加、自动搬送试管、代条形码的采血管与不带条形码的样本管均可检测，100个样本自动进样器 人性化的急诊优先装置 通过 NGSP 认证、日本糖尿病学会Lot2标准做GHb定标 彩色触摸式液晶显示屏，可视报警提示，自动报告工作状况 自动化程度高，自动感应试剂量的状况、自我诊断、自动进行日常维护等3.美国Bio-Rad D-10糖化血红蛋白仪、美国Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白仪。 仪器介绍：糖化血红蛋白是反映血液中葡萄糖水平的一个中长期指标，国际上通常将其作为糖尿

26、病血糖控制的“金标准”，对预示微小血管病变，评估糖尿病并发症的发生与发展有着重要的临床意义。同时糖化血红蛋白可作为轻症、2型及“稳性”糖尿病的早期诊断指标，尤其对于糖尿病的筛选普查具有早期提示价值。伯乐（Bio-Rad）监测糖化血红蛋白的产品均已经通过了美国全国糖化血红蛋白标准化项目（NGSP）认证，并且是NGSP的溯源试验美国糖尿病控制与并发症临床试验（DCCT）的唯一产品供应商，适用于不同测试量的医院临床试验室。检测原理：D-10TM糖化血红蛋白检测系统使用高压液相色谱原理（HPLC）。全血样本经历一个自动两步骤稀释过程并引导入分析流通道。预稀释样本则省略了自动稀释步骤，预稀释样本被直接吸

27、入并被引导入分析流通道。根据血红蛋白与其他物质的离子强度的差异，分离出血红蛋白，然后通过过滤器光度计，在415nm波长处测定吸光度。系统软件对数据校正后，产生一个样本报告和每个样本的色谱图，从而计算出HbA1c的浓度比值。江苏省人民医院临床检验科 也在使用这种设备。4.拜耳 Bayer DCA2000+ 糖化血红蛋白仪HbA1C检测“金标准”-尿微量白蛋白分析检测项目：尿微量白蛋白 糖化血红蛋白HbA1C长期监控糖尿病 临床实验室 HbA1C对过去三个月监控糖尿病提供十分重要的指标HbA1C对总死亡率的预测价值超过胆固醇浓度、体重指数和血压 临床实验室 HbA1C下降1%导致微血管并发症危险性

28、减少35% 临床实验室 严格控制血糖水平可使眼睛病变、神经病变、心血管病变和肾脏病变降低尿微量白蛋白-发现、检测糖尿病肾病约30%的胰岛素依赖性的糖尿病患者将发展为糖尿病肾病Microalbuminuria的早期发现将指示可能发展为肾衰的糖尿病肾病的患者的晚期发展 Microalbuminuria也是冠心病和其他脉管疾病的指标 可靠的HbA1C结果只需6分钟 最近的研究指出“DCA2000+提供的及时反馈导致6-12月随访HbA1C显著下降.” 尿微量白蛋白结果只需7分钟 A：C的比值被用来校正尿浓度造成的差别，提高了结果的临床意义 允许任何尿样的测试 无比的方便 诊室内即得结果，无需等待，无

29、需不必要的再诊 检测HbA1C只需1uL血，节省时间，减少患者的不适 测定仪自动计算A：C比值，您可以任何时间使用任意标本 小巧、轻便、移动方便杰出的准确性和精确性单克隆抗体方法检测HbA1C保证了杰出的准确度和精密度，避免了血球蛋白因子的干扰相关性研究显示和HPLC（高压液相）检测法的一致性达到99% 2.6%*的变异系数（CV）意味着化验结果的可靠性国家糖化血红蛋白标准化项目（NGSP）注册方法，美国糖尿病学会（ADA）*推荐方法 （*正常范围内的患者的CV值，*最近的文件上的数据证明）操作简单只需三步：插入试剂盒、拔掉尾部、关上门 全部自带试剂盒，无需试管，试剂，混合和手工操作 友好的操

30、作界面三步快速检测HbA1C 长期、准确的糖尿病检测器 发现糖尿病肾病的早期指标 提供立即的治疗方案5.产品名称：韩国i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪(糖化血红蛋白） 产品价格：80000 ￥ 规格：免疫荧光定量法 产地：韩国 详细说明 1.通过FDA、CE、SFDA、KFDA,SKUP认证2.完善的POCT检测系统、多项目的检测平台 设计精巧、便于携带、界面友好，可快速定量检测全程CRP（含超敏CRP、常规CRP）、HbA1c、MAU、PSA、AFP、CEA、cTnI等7个项目3.先进的检测技术、第三代POCT产品采用先进的免疫荧光定量技术。方法学先进、检测灵敏度可达到pg/ml

31、、具备内置质控，整体检测系统的CV5%。4.超宽线性范围、项目整合的完美体现全程C-反应蛋白检测项目，同时包含hsCRP和常规CRP检测，一卡双项，一次检测同时出具两个检测结果；有效降低检测成本。5.快速、准确、大批量、低成本的检测所有检测项目均在315分钟内完成，仪器内的检测速度13秒/测试，可以满足大批量检测的要求。无隐蔽性成本；如定标液、冲洗液等，成本核算直接、可靠。6.内置质控的模式，强大的项目扩展功能7.具备储存、查询、打印功能；可与LIS系统连接。6. Ultra2 全自动糖化血红蛋白分析仪 顺德第一人民医院检验科最近引进一台美国Ultra2全自动分析仪。Ultra2全自动分析仪是美国Primus 公司生产的一款全自动的基于亲和层析检测技术的分析仪，该仪器主要用于糖化血红蛋白的分离和定量分析。它主要由以下四部分组成： 1、Ultra2液相系统由两个高压泵系统和可变波长检测系统组成。2、自动加样器可配置多种型号的采血管，每批最多可放置475个样品。3、该系统由电脑控制并自动存储数据。4、 基于Windows 操作系统的软件提供实时的层析图，并进行系统状态监测，可通过键盘输入或扫描条形码来实现样品的识别。 Ultra2分析仪运用硼酸盐亲和高效液相色谱原理(HPLC) ，采用枸橼酸纳抗凝，糖化血红蛋白