应用滤袋技术测定纤维的方法.docx

1、应用滤袋技术测定纤维的方法应用滤袋技术测定粗纤维(CF 的方法ANKOM A200i 型半自动纤维分析仪A 试剂(a硫酸溶液 0.2550.005N 。 1.25g 硫酸 /100mL 蒸馏水 (溶液浓度需要通过滴定核查 。(b氢氧化钠溶液 0.3130.005N 。 1.25g 氢氧化钠 /100mL 蒸馏水。B. 安全注意(a丙酮易燃,操作时应在通风橱中进行,避免吸入或与皮肤接触。将滤袋放入烘箱之前, 要确保滤袋完全干燥,丙酮完全挥发。(b操作浓硫酸时要带橡胶手套和面罩。配制硫酸溶液时一定注意将硫酸倒入水中。如果酸 接触到皮肤,请用大量水冲洗。C. 设备(a消化装置 ANKOM A200i

2、 纤维分析仪。(b滤袋 ANKOM F57滤袋。如果样品非常细,可选用 F58滤袋(见注 1(c封口机(d干燥器(e分析天平 -精确至 0.1mg(f电热干燥箱(g耐溶剂记号笔D. 步骤(a用耐溶剂的记号笔给滤袋编号,称重 (m1 。(b直接准确称取 1.0(0.1 g 制备好的样品 (m 于滤袋中。样品需要粉碎过 1mm 筛。(c在距离滤袋上边缘大约 4mm 用封口机封口。然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。(d至少取一个空白滤袋 (C1,同时做空白测定。(e脂肪含量高的样品需要脱脂。将装有样品的滤袋放入玻璃容器中,加丙酮使滤袋完全浸 没,浸泡 10min 。倒掉溶剂,将滤袋放在网筛上凉干。(

3、f一次最多可以在滤袋架上放 24个滤袋。无论放置滤袋数量多少, 9层滤袋架上托盘要全部 使用,每层放三个滤袋。层与层之间错开 120度。然后将装有滤袋的支架放入纤维分析仪消 煮器中,然后在顶部将金属压锤放上,以确保消煮过程中不浮起。(g当处理 24个样品袋时,加入 1900-2000mL 已配好室温酸溶液 。如果处理样品少于 20个 滤袋,按照每个滤袋加 100mL 酸溶液,但不能少于 1500mL ,确保滤袋托盘能完全浸没。 (h打开搅拌和加热开关,确保滤袋支架搅拌正常。盖上盖子并完全密封好。 仪器将加热并 维持溶液温度 100C 。 设置处理时间 40min ,包括加热升温时间。(i消煮结

4、束,关上加热和搅拌开关,打开排液阀(开始要慢一点 ,在打开盖子之前一定将 热的溶液排完。*警示:消煮器中的溶液是有压力的。在打开盖子之前一定将废液阀打开以释放压力。 (j溶液排完后,打开盖子,关闭排液阀,加 2000mL (5090C 蒸馏水,搅拌 5min 。盖上 盖子并打开加热开关,或打开盖子并关闭加热开关。重复一次,共淋洗两次。(k当处理 24个样品袋时,加入 19002000mL 室温碱溶液 (0.313M 氢氧化钠溶液 。如果 处理样品少于 20个滤袋,按照每个滤袋加 100mL 碱溶液,但不能少于 1500mL 。(l打开搅拌和加热开关,确保滤袋支架搅拌正常。盖上盖子并完全密封好。

5、 仪器将加热并 维持溶液温度 100C 。设置处理时间 40min ,包括加热升温时间。(m消煮结束,关上加热和搅拌开关,打开排液阀(开始要慢一点 ,在打开盖子之前一定将 热的溶液排完。*警示:消煮器中的溶液是有压力的。在打开盖子之前一定将废液阀打开以释放压力。 (n溶液排完后,打开盖子,关闭排液阀,加 2000mL (5090C 蒸馏水,搅拌 5min 。盖上 盖子并打开加热开关,或打开盖子并关闭加热开关。重复一次,共淋洗两次。(o将滤袋从滤袋支架上取下来,轻轻挤压去掉多余的水。然后将滤袋放入 250mL 烧杯中, 加丙酮至覆没滤袋,浸泡 35min ,然后取出并轻轻挤压去掉多余的丙酮。(p

6、在通风橱中展开滤袋,让其自然干燥。完全干燥后放入 102C 2C 烘箱烘干 4小时。 *警告:在丙酮完全挥发掉之前不能把滤袋放入烘箱中。(q从烘箱中取出滤袋,直接放入干燥器中冷却至室温,然后称重(m 2 。(r将滤袋放入已经知道质量(m 3的坩埚中在 600C 15C 条件下灰化 2小时,干燥器中 冷却,称取质量,计算灰分质量(m 4 。D. 计算试样中粗纤维的质量分数按以下公式计算。CF (%=(m2-m1x C1-(m4-m3x 100/m其中:m 1为空袋质量, g ; m 2为提取烘干后滤袋 +样品质量, g ; m 3为坩埚质量, g ; m 4为坩埚 +灰分质量; C 1为空白袋子

7、校正系数 (烘干后质量 /原来质量 ; m 为样品质量, g 。 E. 注解有些粉碎非常细的样品需要用 F58滤袋替代 F57滤袋,以避免样品流失。应用滤袋技术测定中性洗涤纤维(NDF 的方法 ANKOM A200i 型半自动纤维分析仪A. 试剂(a称取 30.0g 十二烷基硫酸钠(USP ; 18.61g 乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA ; 6.81g 四硼 酸钠(Na2B4O7十水; 4.56g 磷酸氢二钠(Na2HPO4 -无水; 10.0ml 三甘醇 C6H14O4; 全部溶解在 1L 水中,适当的搅拌和加热有助于溶解。检查适当的 pH 在 6.97.1。(b-淀粉酶 (Alpha-

8、amylase 热稳定细菌 -淀粉酶:活性为 17,400单位 /mL 。 1个活性单位 表示能将 1mg 可溶性淀粉用 30min 水解。(c无水亚硫酸钠(Na 2SO 3 。(d丙酮:无色,并且蒸发后无残渣。B. 安全注意(a丙酮易燃,操作时应在通风橱中进行,避免吸入或与皮肤接触。将滤袋放入烘箱之前, 要确保滤袋完全干燥,丙酮完全挥发。(b十二烷基硫酸钠对黏膜有刺激,因此操作时要带防尘口罩和手套。C. 设备(a消化装置 -ANKOM A200i 纤维分析仪。(b滤袋 -ANKOM F57滤袋。(c封口机(d干燥器(e分析天平 -精确至 0.1mg(f电热干燥箱(g耐溶剂记号笔D. 步骤(a

9、滤袋和样品的准备1 用耐溶剂的记号笔给滤袋编号,称重 (m1 。2 直接准确称取 0.5g (0.05g 制备好的样品 (m 于滤袋中。样品需要粉碎过 1mm 筛。3 在距离滤袋上边缘大约 5mm 用封口机封口。然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。4 至少取一个空白滤袋 (C1 ,同时做空白测定。5 一次最多可以在滤袋架上放 24个滤袋。无论放置滤袋数量多少, 9层滤袋架上托盘要 全部使用,每层放三个滤袋。层与层之间错开 120度。然后将装有滤袋的支架放入纤维分 析仪消煮器中,然后在顶部将金属压锤放上,以确保消煮过程中不浮起。6 样品含有大豆产品或脂肪超过 5%,将装有样品的滤袋放入带盖玻璃容器

10、中,加丙酮 使滤袋完全浸没,盖好盖子。摇动容器 10次,浸泡 10min 。然后更换新的丙酮,重复上述 操作一次。最后将滤袋取出,放在网筛上凉干。例外:烘烤大豆,由于烘烤大豆的特殊性,需要采用改进后的下面脱脂方法。将装有 样品的滤袋放入带盖玻璃容器中,加丙酮使滤袋完全浸没,盖好盖子。摇动容器 10次,然 后更换新的丙酮,浸泡 12h 。取出滤袋,放在网筛上凉干。(b当处理 24个滤袋时, 向 2000mL 中性洗涤剂溶液中加无水亚硫酸钠 20g (0.5g/50mL ND 溶液 和 4.0mL 热稳定 alpha-amylase 。 让无水亚硫酸钠在溶液中充分溶解。向容器中加 入该溶液。如果处

11、理样品少于 20个滤袋,按照每个滤袋加 100mL 酸溶液,但不能少于 1500 mL ,确保滤袋托盘完全浸没。(c打开搅拌和加热开关,确保滤袋支架搅拌正常。盖上盖子并完全密封好。 仪器将加热并 维持溶液温度 100C 。 设置处理时间 75min ,包括加热升温时间。(d消煮结束,关上加热和搅拌开关,打开排液阀(开始要慢一点 ,在打开盖子之前确保废 液排放管与废液容器安全连接,一定将热的溶液排完。*警示:消煮器中的溶液是有压力的。在打开盖子之前一定将废液阀打开以释放压力。 (e溶液排完后,打开盖子,关闭排液阀,加 2000mL (70C90C 蒸馏水,并且第 1和第 2次淋洗时同时加 4.0

12、mL -淀粉酶,放下盖子,但不旋紧。打开搅拌开关(不打开加热开关 搅拌 35min 。排掉废液,重复 2次,共淋洗 3次。(f最后一次淋洗后,加冷的自来水以操作和使冷却容器,为下轮测定做好准备。排干水, 从 容器中取出带滤袋的支架。 将滤袋从滤袋支架上取下来, 轻轻挤压去掉多余的水。 然后将滤 袋放入 250mL 烧杯中,加丙酮至覆没滤袋,浸泡 35min ,然后取出并轻轻挤压去掉多余 的丙酮。(g在通风橱中展开滤袋,让其自然干燥。完全干燥后放入 102C 2C 烘箱烘干 4小时。 *警告:在丙酮完全挥发掉之前不能把滤袋放入烘箱中。(q从烘箱中取出滤袋,直接放入干燥器中冷却至室温,然后称重(m

13、 2 。E. 计算试样中中性洗涤纤维质量分数按以下公式计算。NDF (%=(m2-(m1x C1 x 100/m其中:m 1为空袋质量, g ; m 为样品质量, g ; m 2为提取处理后样品残渣 +滤袋质量, g ; C 1为空白袋子校正系数 (烘干后质量 /原来质量 。应用滤袋技术测定酸性洗涤纤维(ADF 的方法 ANKOM A200i 型半自动纤维分析仪A. 试剂(a酸性洗涤剂溶液:称取 20g 十六烷三甲基溴化胺(CTAB ,溶于 1000mL 已标定过的 1.00N 硫酸溶液中,加热搅拌使其溶解。(b丙酮:无色,并且蒸发后无残渣。B. 安全注意(a丙酮易燃,操作时应在通风橱中进行,

14、避免吸入或与皮肤接触。将滤袋放入 烘箱之前,要确保滤袋完全干燥,丙酮完全挥发。(bCTAB对黏膜有刺激,因此操作时要带防尘口罩和手套。C. 设备(a消化装置 -ANKOM A200i 纤维分析仪。(b滤袋 -ANKOM F57滤袋。(c封口机(d干燥器(e分析天平 -精确至 0.1mg(f电热干燥箱(g耐溶剂记号笔D. 步骤(a滤袋和样品的准备1 用耐溶剂的记号笔给滤袋编号,称重 (m1 。2 直接准确称取 0.5g (0.05g 制备好的样品 (m 于滤袋中。 样品需要粉碎过 1mm 筛。3 在距离滤袋上边缘大约 4mm 用封口机封口。然后将样品在滤袋中展平, 均 匀分布。4 至少取一个空白

15、滤袋 (C1 ,同时做空白测定。5 一次最多可以在滤袋架上放 24个滤袋,每层放三个滤袋。层与层之间错开 120度。然后将装有滤袋的支架放入纤维分析仪消煮器中,然后在顶部将金属 压锤放上,以确保消煮过程中不浮起。6样品含有大豆产品或脂肪超过5% -将装有样品的滤袋放入带盖玻璃容器中， 加丙酮使滤袋完全浸没，盖好盖子。摇动容器10次，浸泡10 min。然后更换新 的丙酮，重复上述操作一次。最后将滤袋取出，放在网筛上凉干。 例外：烘烤大豆 由于烘烤大豆的特殊性，需要采用改进后的下面脱脂方 法。 将装有样品的滤袋放入带盖玻璃容器中， 加丙酮使滤袋完全浸没， 盖好盖子。 摇动容器10次，然后更换新的丙

16、酮，浸泡12 h。取出滤袋，放在网筛上凉干。 (b当处理24个滤袋时，向容器中加入2000 mL 酸性洗涤剂溶液。如果处理样品 少于20个滤袋，按照每个滤袋加100 mL 酸溶液，但不能少于1500 mL，确保滤 袋托盘能完全浸没。 (c打开搅拌和加热开关，确保滤袋支架搅拌正常。盖上盖子并完全密封好。 仪 器将加热并维持溶液温度100C。 设定处理时间60 min，包括加热升温时间。 (d消煮结束，关上加热和搅拌开关，打开排液阀（开始要慢一点），在打开盖 子之前确保废液排放管与废液容器安全连接，一定将热的溶液排完。 *警示：消煮器中的溶液是有压力的。在打开盖子之前一定将废液阀打开以释放 压力。

17、 (e溶液排完后，打开盖子，关闭排液阀，加2000 mL(70C90C 蒸馏水， 关 闭盖子并打开加热开关，或打开盖子并关闭加热开关。搅拌5 min。排掉废液， 重复2次，共淋洗3次或洗涤至中性。 (f将滤袋从滤袋支架上取下来， 轻轻挤压去掉多余的水。 然后将滤袋放入250 mL 烧杯中，加丙酮至覆没滤袋，浸泡35 min，然后取出并轻轻挤压去掉多余的丙 酮。 (g在通风橱中展开滤袋， 让其自然干燥。 完全干燥后放入102C2C 烘箱烘干4 小时。 *警告：在丙酮完全挥发掉之前不能把滤袋放入烘箱中。 (q从烘箱中取出滤袋，直接放入干燥器中冷却至室温，然后称重（m 2）。 E.计算 试样中酸性洗

18、涤纤维质量分数按以下公式计算。 ADF (% = (m2- (m1 x C1 x 100 / m 其中： m1为空袋质量，g；m 为样品质量，g；m2为提取处理后样品残渣+滤袋质量，g； C1为空白袋子校正系数(烘干后质量/原来质量。 F几点说明 如果样品同时测定 NDF 和 ADF，可以先测定 NDF，然后将测定完装有残渣 的滤袋放在样品架子上，直接加酸性洗涤溶液，然后按照 ADF 测定程序测定。 ADL 滤袋技术测定酸性洗涤木质素（ADL ADL）的方法 ANKOM A200i 型半自动纤维分析仪 A. A.试剂 (a 72%硫酸溶液：取734.69 mL 浓硫酸，倒入200 mL 水中，

19、冷却后稀释1000 mL。 B. B.安全注意 (a丙酮易燃，操作时应在通风橱中进行，避免吸入或与皮肤接触。将滤袋放入烘箱之前， 要确保滤袋完全干燥，丙酮完全挥发。 (b操作浓硫酸时要带橡胶手套和面罩。配制硫酸溶液时一定注意将硫酸倒入水中。如果酸 接触到皮肤，请用大量水冲洗。 C. C.设备 (a滤袋- ANKOM F57滤袋。 (b封口机 (c干燥器 d）2 L 或3 L 烧杯 D. D.步骤 (a滤袋和样品的准备 1用耐溶剂的记号笔给滤袋编号，称重(m 1。 2直接准确称取0.5g ( 0.05 g 制备好的样品 (m 于滤袋中。样品需要粉碎过1 mm 筛。 3在距离滤袋上边缘大约5 mm

20、 用封口机封口。然后将样品在滤袋中展平，均匀分布。 4至少取一个空白滤袋(C1，同时做空白测定。 5先按照 ADF 测定方法进行处理。 (b ADF 测定之后，将干燥后的滤袋/样品放入3 L 烧杯中，加足量72%硫酸将滤袋浸没（大 约250 mL）。 重要：滤袋必须完全干燥，并冷却至室温后加入浓酸。如果滤袋有水分存在，加硫酸后 产生热，容易使袋子中样品烧焦，影响测定结果。 (c将2 L 烧杯放到3 L beaker 中使滤袋浸没。开始时搅拌滤袋，并在30分钟内将2 L 烧杯上、 下提起大约30次。 (d 3小时后将硫酸倒掉，然后用水淋洗除掉酸。重复淋洗至 pH 为中性。然后用250 mL 丙

21、酮淋洗3 min 除掉水。 (e在102C 烘箱中干燥 4 h，然后放入干燥器中冷却至室温，称重（m 2）。 *警告：在丙酮完全挥发掉之前不能把滤袋放入烘箱中。 (f将滤袋放入已知重量（m3）30或50 mL 坩埚中，在600C15C 条件下灰化2小时，冷却， 称重（m 4） E.计算 试样中酸性洗涤纤维质量分数按以下公式计算。 ADL (% = (m2- m1 x C1- (m4- m3 x 100 / m C1-（(m4其中： m1 为空袋质量，g；m2 为提取烘干后滤袋+样品质量，g；m3 为坩埚质量，g； m4 为坩埚+灰分质量；C1 为空白袋子校正系数(烘干后质量/原来质量；m 为样品质量， g