1、住宿申请蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室开放仪器室简介本开放仪器室是蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室的组成部分。在满足重点实验室各研究室需求的基础上,面向全院以及全校开放。本仪器室目前是试运行阶段,欢迎大家随时提供意见和建议。开放仪器基本信息如下:(一) 新生物楼E413室负责人:李兰芬老师联系电话:62752292主要开放仪器:(1)ITC仪器名称 等温滴定微量热仪(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)仪器型号 ITC-200生产厂家 MicroCal(现GE公司)启用日期 2009年6月工作原理 通过高灵敏度、高自动化的微量量热仪连续准确
2、地监测和记录一个变化过程的量热曲线,无损伤地同时提供热力学和动力学信息。微量热法本身没有特异性,但由于不同的生物体系本身具有各自的特异性,因此这种非特异性方法有时可以得到用特异方法得不到的结果,有助于发现新现象和新规律,特别适应于研究生物体系中的各种特异过程主要用途 获得生物分子相互作用的完整热力学参数,包括结合常数、结合位点数、摩尔结合焓、摩尔结合熵、摩尔恒压热容,和动力学参数(如酶活力、酶促反应米氏常数)等应用范围 蛋白质-蛋白质(包括抗原-抗体、分子伴侣-底物)、蛋白质-核酸、核酸-核酸相互作用 酶促反应动力学技术指标 灵敏度quotient(TSQ):8-10 nanocal ml响应
3、时间:7 seconds短期噪音水平:0.5 ncal/sec工作温度: 2 - 80 样品池体积: 200 l,滴定针体积: 40 l样品池材质:铪合金, 固定式搅拌速度:可任意选择,可达1000 rpm控温方式:Peltier电子控温方式,快速准确达到控制温度,不需水浴检测方式:功率反馈式,负反馈补偿,直接测定热量软件系统:有多种数据处理模型,可对多个实验数据进行合并处理,可完成系统自动清洗(2)Biomek FX仪器名称 实验室自动工作站仪器型号 Biomek FX生产厂家 BACKMAN COULTER启用日期 2004年9月工作原理 Biomek FX主要由控制系统和加样系统构成。控
4、制系统由计算机及相应软件构成,根据使用目的,对仪器加样速度、方式、稀释样品、移动物品、分析数据等工作过程进行控制。加样系统以机械为中心,配合一系列平台组件,在控制系统的控制下,完成一系列的加样、混合、转移、清洗等操作,达到DNA质粒纯化、药物筛选、ELISA反应、PCR前处理、DNA测序处理、蛋白质晶体生长条件的自动筛选等高通量样品处理的目的主要用途 高通量自动化处理液体分装、加样。可用于PCR产物纯化,miniprep、蛋白质晶体生长条件筛选的自动点样等技术指标 双臂主机,可同时使用两种不同的加样器:8道、96通道;0.5-250l;液面感应功能;平台组件有:震动器、磁力搅拌器、加样头清洗器
5、、条码识别装置;SAMI NT操作控制软件说明: 由于本实验室工作站要求一定的专业知识和训练,除了简单的液体分装处理工作可以在专业人员的指导下由使用者自行操作外,PCR产物纯化、miniprep等过程则需要专人负责进行。有这方面需要的用户请务必事先和负责人联系。(3)AKTApurifier100仪器名称 中压快速液相色谱系统仪器型号 AKTApurifier100生产厂家 Amersham Biosciences(现GE公司)启用日期 2003年6月工作原理 快速分离生物大分子的中压液相色谱系统。通过凝胶过滤、离子交换、疏水层析、反相层析以及亲和层析等分离技术,快速可靠地纯化生物大分子主要用
6、途 快速分离肽、核酸、蛋白和天然产物。应用范围 生物大分子分离纯化。流速范围宽广,可提高分析结果的可靠性和重复性技术指标 0.01-10ml/min,0-10MPa,pH 2-12,190-700nm(二) 生物技术楼(小白楼)102、105、205室负责人:刘敬婧老师,负责仪器(1)-(2)秦跟基老师,负责仪器(3)联系电话:62752409主要开放仪器:(1)Leica SPE(105室)仪器名称 激光共聚焦显微镜仪器型号 Leica SPE生产厂家 Leica启用日期 2008年9月工作原理 激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,使标本上的被照射点
7、在探测针孔处成像,由探测针孔后的光点倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。主要用途 组织断层扫描,组织光学切片的三维立体图像重建,对细胞内物质荧光标记并观察。用于细胞生物学、遗传学、胚胎学及生物化学等方面的研究分析应用范围 细胞形态学分析(观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网、高尔基体、微管、微丝、细胞桥、染色体等亚细胞结构的形态特
8、征);半定量免疫荧光分析;荧光原位杂交研究;基因定位研究及三维重建分析等技术指标 采用棱镜分光,透光率远高于光栅分光。光谱式检测器,检测波长在430750nm范围内任意可选,适用于任何荧光染料和自发荧光的检测及光谱扫描,检测灵敏度高。四个固体激光器:405nm, 488nm,532nm,635nm。倒置荧光显微镜,可以同时采集两个通道的信号(2)Leica LMD7000(205室)仪器名称 激光显微切割仪仪器型号 Leica LMD7000生产厂家 Leica启用日期 2009年12月工作原理 计算机应用专用软件控制高分辨率物镜在显微镜下面寻找到需要分离的各种样品(小至单个细胞或单条染色条)
9、,并控制固体激光器发出一束聚焦的紫外激光自动扫描切割所需的样品边缘。这样,被选定的样品就从组织切片上被分离出来,并在重力的作用下掉入载物台下方的收集管内。主要用途 在显微镜下利用微激光束直接从不同的组织(包括活体组织) 快速切割、分离和纯化生物体的目标组织、细胞及其组分,用于细胞和分子生物学的研究应用范围 样品类型:石蜡包埋,冰冻组织切片,细胞涂片,甩片,细胞簇,活细胞等所有常规的细胞和组织制备技术均可被采用,标本的固定、湿度条件以及染色体等处理不受限制技术指标 智能电动调焦,精度:0.015um,调节范围:25mm,最大调节速度:5mm/s。切割厚度:可达300um,切割面积:可切um2 -
10、 4.5mm2(3)JEOL 6610LV(102室)仪器名称 冰冻扫描电子显微镜仪器型号 JSM 6610 LV生产厂家 JEOL(日本电子)启用日期 (预计2011年上半年)工作原理 用聚焦电子束在试样表面逐点扫描成像。成像信号可以是二次电子。成像信号是二次电子、背散射电子或吸收电子。由电子枪发射的能量为 5 35keV 的电子,以其交叉斑作为电子源,经二级聚光镜及物镜的缩小形成具有一定能量、一定束流强度 和束斑直径的微细电子束,在扫描线圈驱动下,于试样表面按一定时间、空间顺序作栅网式扫描。聚焦电子束与试样相互作用,产生二次电子发射,二次电子发射量随试样表面形貌而变化。二次电子信号被探测器
11、收集 转换成电讯号,经视频放大后输入到显像管栅极,调制与入射电子束同步扫描的 显像管亮度,得到反映试样表面形貌的二次电子像。主要用途 冰冻扫描电镜最常用于生命科学,包括植物学、动物学、真菌学、生物技术、生物医学和农业科学。用于观察物体表面的超微结构和形态应用范围 可将物体放大10万倍,用于快速观察植物或其他样本的表面形态和结构技术指标 1. 分辨率 (Resolution) 二次电子探测器:3.0nm(30kV),8.0nm(3kV),15nm(1kV), 背散射电子探测器:4.0nm(30kV)2. 全自动电子枪 (Fully Automated Electron Gun) 加速电压的提升、
12、灯丝的加热及图像的自动出现全部自动完成。无缝自主栅偏压和消像散的自动记忆功能均自动实现3. 大视野观察范围(Large Field of View) 最低的放大倍数可达5倍,可观测到24 mm见方的样品4. 高精度的变焦聚光镜系统 (Precision Zoom Condenser lens) 探测电流发生变化时,图像的聚焦状态可保持不变。且不需经常清洗5. 超级圆锥形物镜 (Super Conical Objective Lens) 允许样品在较小的工作距离下得到较大的倾斜角6. 高灵敏度半导体背散射探头 (High sensitivity semiconductor detector) 此
13、探头是日本电子的专利产品,提供三种图像:成分像、形貌像和立体像7. 全对中的样品台 (Eucentric Stage) 这种样品台保证样品旋转或倾斜时,被观察点聚焦状态不变8. 大样品室 (Large specimen chamber) JSM-6610LV可对直径为(200 mm)的样品进行直接观察(三)新生物楼E210室负责人:刘朝晖老师联系电话:62755486主要开放仪器:(1)GCMS(6890N Network GC system) 仪器名称 气质联用仪仪器型号 GC-MS(6890N Network GC system,5975B MS)生产厂家 安捷伦科技有限公司启用日期 20
14、07年1月工作原理 利用试样中各组份在气相和固定液液相间的分配系数不同,当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时,组份就在其中的两相间进行反复多次分配,由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同,因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组份的色谱峰。主要用途 小分子可气化化合物的定性、定量检测应用范围 生物体中低含量代谢产物的定性定量检测,不同样品中某类化合物的差异比较等技术指标 柱箱温控范围:室温+4450分流/不分流毛细管柱进样口压力设定范围:0-100psi(可选0-150psi)分流/不分流毛
15、细管柱进样口总流量设定范围:0-200ml/minN2,0-1000ml/minH2或He离子源类型:非涂层惰性EI源质量过滤器:整体双曲面四极杆最大质量:1050 u检测器:电子倍增器,可更换高能打拿电子倍增管扫描速率(电子):最高达10000 u/s泵系统:70L/s或262 L/s分子涡轮泵和2.5 m3/h的机械泵(2)LC-MS(1200 Series)仪器名称 液质联用仪(紫外检测器/单四级杆质谱)仪器型号 LC-UV/MS(1200 Series LC,6100 Series Single Quad MS)生产厂家 安捷伦科技有限公司启用日期 2007年1月工作原理 液固色谱法:
16、流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等),根据物质吸附作用的不同而进行分离。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子和溶剂分子对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附。主要用途 可溶性化合物的定量检测,适用于微径柱、标准柱和半制备应用应用范围 只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制。流动相可选择的范围宽,固定相种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。技术指标 可方便利用四种溶剂进行等梯度或梯度分析,流量范围宽,最高流速 10 ml/min,延迟体积 800-1100 l。内置调谐标样,全自动调谐和质量轴校正离子源:ESI离子导入、传输和CI
17、D:石英毛细管,锥电极,单方向四极杆:双曲面金属可控温四极杆,2种扫描速度选择检测器: HED+EM, 电子倍增器真空:毛细管隔离,四级差分系统,泵油无污染(3)GC-FID仪器名称 气相色谱仪(氢火焰检测器)仪器型号 GC-FID(6890N Network GC system)生产厂家 安捷伦科技有限公司启用日期 2006年2月工作原理 气相原理同(1)。检测器是典型的破坏性、质量型检测器,以氢气和空气燃烧生成的火焰为能源,当有机化合物进入以氢气和氧气燃烧的火焰后,在高温下产生化学电离,电离产生比基流高几个数量级的离子,在高压电场的定向作用下,形成离子流,微弱的离子流(10-1210-8A)经过高阻(1061011)放大,成为与进入火焰的有机化合物量成正比的电信号,因此可以根据信号的大小对有机物进行定量分析。主要用途 主要用于植物激素乙烯的检测应用范围 挥发性有机小分子的定量检测技术指标 检测器:FID检测限5pg碳/s(丙烷)柱箱温控范围:室温+4450分流/不分流毛细管柱进样口压力设定范围:0-100psi(可选0-150psi)分流/不分流毛细管柱进样口总流量设定范围:0-200 ml/min N2,0-1000 ml/min H2或He
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