1、高考生物一轮复习 专题2 微生物的培养与应用课时提升作业 新人教版选修1微生物的培养与应用(40分钟100分)1.(10分)(2011全国卷节选)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于_培养基。(2)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_。(3)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行,以避免周围环境中微
2、生物的污染。【解析】(1)欲筛选出能高效降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其他碳源,这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基。(2)降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大。(3)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)和高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌技术要求整个实验过程都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围微生物的污染。答案:(1)原油选择(2)强(3)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰2.(12分)(2016济南模拟)下表是某微生物培养基的配方。请分析回答下列问题:编号成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0
3、.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL(1)从培养基的营养成分看,此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是_。利用该培养基培养微生物时,微生物所需要的碳源来自_。(2)此表中含有的微生物的营养成分包括_。(3)若除去该培养基中的后再加入不含氮元素的有机物,则此培养基可培养的微生物种类是_。(4)培养基若加入氨基酸,则它可充当的营养成分是_。(5)若要观察微生物的菌落的特点,培养基中还应添加的成分是_。【解题指南】(1)隐含信息:表格中的成分均为无机物。表格中的成分中不含凝固剂。(2)必备知识:不含有机物的培养基只能培养自养型微生物。无氮培养基可以培养自生固氮微生物。观察菌落的特点需
4、用固体平板培养基。【解析】(1)从培养基的成分看,该培养基无有机物,因此可以培养自养型微生物,微生物所需的碳源只能由空气中的CO2提供。(2)培养基中的成分包括微生物需要的氮源、无机盐和水。(3)培养基中的是该培养基中唯一的氮源,去掉后则成为无氮培养基,可用于培养自生固氮微生物,因为自生固氮微生物可以利用大气中的N2作为氮源。但是自生固氮微生物是异养型生物,因此自生固氮微生物的培养基除不含氮源外,还应含有有机物。(4)在培养基中加入氨基酸,可以为微生物提供碳源、氮源和特殊营养物质。(5)微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长,因此培养基中需要添加凝固剂(琼脂),使液体培养基凝固成固体培养基。答
5、案:(1)自养型空气中的CO2(2)水、无机盐、氮源(3)自生固氮微生物(4)碳源、氮源和特殊营养物质(5)凝固剂(琼脂)【延伸探究】(1)本题(3)中所涉及的微生物和自养型微生物相同吗?为什么?提示:不同。自养型微生物可以利用空气中的二氧化碳作为碳源,培养基中则可以不含碳源;自生固氮微生物则可以利用空气中的氮气作为氮源,培养基中可以不含氮源。(2)添加到培养基中的一种化合物只能作为培养基的一种营养成分吗?举例说明。提示:不一定,如本题中的(NH4)2SO4既可以作为氮源,又可以作为无机盐。3.(12分)(2016太原模拟)水质的细菌检查是应用微生物学的任务之一。其实验步骤如下:(一)采样自来
6、水:打开水龙头,放水35 min,关闭水龙头用酒精棉球灼烧水龙头。再开水龙头12 min后,用无菌瓶取水样。湖水(取样操作略)(二)水中细菌总数测定自来水:吸取1 mL水样注入无菌培养皿加入4550的牛肉膏蛋白胨培养基旋转混匀静置凝固放置培养观察计数。湖水:稀释水样(其他操作同)。请回答下列问题:(1)本实验使用的培养基含有水、碳源、_、_和_等成分。(2)取样时用酒精棉球灼烧水龙头的作用是防止_进入样品,影响实验结果。(3)将培养基加入培养皿时应在酒精灯火焰附近进行操作;在向培养皿加入培养基前,要使装有培养基的容器瓶口迅速通过_。(4)在放置培养操作时,应将平板(培养皿)_放置;对湖水样品的
7、稀释范围以达到培养后每个平板中菌落数在_最为适合。【解析】(1)微生物的培养基中必须含有水、无机盐、氮源和碳源四类营养物质,本实验为固体平板培养基,因此培养基中还应加入琼脂作为凝固剂。(2)水龙头口有大量的杂菌,因此取样时用酒精棉球灼烧水龙头的作用是防止水龙头口的细菌(杂菌)进入样品,影响实验结果。(3)培养基的制作、接种均应严格无菌操作,即在酒精灯的火焰附近进行。在向培养皿加入培养基前,要使装有培养基的容器瓶口迅速通过酒精灯的火焰。(4)微生物的培养应将平板倒置,目的是防止培养皿盖上的水珠污染培养皿;对湖水样品的稀释范围以达到培养后每个平板中菌落数在30300最为适合。答案:(1)氮源无机盐
8、琼脂(凝固剂)(2)水龙头口的细菌(杂菌)(3)酒精灯火焰(4)倒置30300【加固训练】下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离。材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。(1)方法步骤:倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板。制备土壤稀释液:取土样10 g
9、加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至盛有9 mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度。涂布:按照由107103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布_个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布_个。培养:放入恒温箱内,在28 30下培养34 d。细菌的计数:如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌株数是_。(稀释度是105)(2)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数_(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。原因是_。【解题指南】(1)题干关键词:“分离自生固氮菌”“计数”。(2)隐含信息:无氮培养
10、基为选择培养基;牛肉膏蛋白胨培养基无选择功能。(3)必备知识:为增强实验说服力,要设置重复和对照。稀释涂布平板法计数微生物的计算公式。【解析】(1)为了保证结果准确,一般设置35个平板,选择菌落数在30300的平板进行计数,并取平均值,则每克样品中的菌株数为(500.1)105=5.0107。(2)牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,以消除无关变量对实验结果的影响,该培养基适合土壤中几乎所有细菌生存,所以,它比无氮培养基上的菌落数目多。答案:(1)315.0107(2)多于无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存【延伸探究】用稀释涂布平板法来统计样
11、品中活菌的数目,其结果与实际值相比如何?并说明原因。提示:比实际值低。培养基上的一个菌落也可能是相连的两个或多个细菌繁殖形成的,而统计结果一般用菌落数来表示,因此统计的菌落数要少于样品中活菌的实际值。4.(10分)(2016襄阳模拟)人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,回答下列问题:(1)将样液进行一系列的浓度梯度稀释,然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在无菌环境中操作。接种后的培养皿_于37的_中培养。(2)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分
12、该培养基属于_培养基。若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的_使pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以把尿素分解为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力_。(3)与全营养培养基中的菌落相比,以尿素为氮源的培养基中菌落数_(填“多”“少”或“相等”)。【解析】(1)在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在酒精灯火焰附近进行操作,以防止杂菌污染。接种后的培养皿需倒置于37的恒温培养箱中培养,培养皿倒置既可避免培养基中的水分过快地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染;恒温为微生物的快速生长提供了适宜的温度条件。(2)含有酚红指示
13、剂的培养基从功能上划分属于鉴别培养基。尿素被分解后产生的氨使pH升高,酚红指示剂变红;变红区域越大,表明该菌株利用尿素的能力越强。(3)全营养培养基中营养全面,菌落数多而杂;在以尿素为氮源的培养基中只有能分解尿素的微生物才能生长,其他微生物则不能生长,因此以尿素为氮源的培养基中菌落数少。答案:(1)倒置恒温培养箱(2)鉴别氨越强(3)少【加固训练】赤霉病是由雪腐镰刀菌等真菌感染引起的,广泛发生在小麦等粮食作物上。雪腐镰刀菌代谢产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON,分子式为C15H20O6)严重影响禽畜生产和人体健康。请分析回答下列问题:(1)下列微生物与雪腐镰刀菌的细胞结构类似的是_(选填选项前的符号)。A.酵母菌B.醋酸菌C.毛霉 D.乳酸菌 E.大肠杆菌(2)某同学为筛选专一降解DON的菌,配制了下列培养基,在适宜条件下培养:实验步骤取样培养基培养结果土壤样品葡萄糖,(NH4)2SO4,K2HPO43H2O,KH2PO4,NaCl,CaCl2,MgSO47H2O,加水定容培养液a1mL培养液a同上菌落挑取单菌落真菌培养基培养液b为实现筛选目的,步骤所使用的培养基配方中,应去除_并加入_。该培养的目的是_。为实现目的菌的分离和计数,步骤所使用的培养基中还应加入_制成平板。步骤的目的是_
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