提高银狐繁殖力的研究.docx

1、提高银狐繁殖力的研究黑龙江省森工总局科研项目研究报告合同编号K9908提高银狐繁殖力的研究Study of Improving Reproduction Capacity of Silver Fox黑龙江省野生动物研究所HEILONGJIANG WILDLIF INSTITUTE2002-11-18 哈尔滨前言 11 试验地点、材料、内容及方法 31.1 试验地点及材料 31.2 试验内容和方法 31.2.1 试验内容 31.2.2 试验方法31.2.2.1 母银狐发情的鉴定方法31.2.2.2 外源激素的应用方法41.2.2.3 银狐产仔统计方法 52 试验结果 62.1 雌银狐生殖系统解剖

2、生理特点 62.2 影响母狐繁殖力的因素 62.2.1 影响母狐发情与配种的因素 72.2.1.1 遗传因素 72.2.1.2 年龄因素 72.2.1.3 营养因素 72.2.1.4 光照因素 72.2.1.5 其它因素 82.2.2 影响母狐窝产仔数的因素 82.2.2.1 排卵数量 82.2.2.2 受胎率和出生前胚胎的成活92.2.3 影响母狐产仔和产后仔狐成活率的因素102.3 银狐的排卵 102.3.1 排卵102.3.2 超数排卵112.4 外源激素及其选择 112.4.1 生殖激素的种类与主要用途112.5 外源激素对银狐繁殖影响的试验结果 132.6 外源激素的性价对比 172

3、.7 提高银狐繁殖力的经济效益分析 192.8 外源激素对母狐翌年繁殖的影响 202.9 银狐养殖场银狐繁殖情况调查 202 结论 223 讨论 23参考文献 25前 言 狐，属食肉目（Carivora）,犬科（Canidal），其人工饲养的主要两个不同属是狐属（Vulpes）和北极狐属（Alopes）。银狐（Vulpes fulva）又称银黑狐，原产于北美洲北部和西伯利亚东部地区，其体形外貌与赤狐（Vulpes vulpes）极其相似，只是毛色有显著的差异。银狐是著名的珍贵毛皮动物，具有极高的经济价值。银狐的被毛因为色泽黝黑而镶嵌银白毛色，从而形成华美的银雾状，其裘皮制品呈现精美、大方、潇洒

4、流畅，围脖、大衣领或裘皮大衣都倍受国内外女性消费者的欢迎，是长毛高档裘皮的典型代表。狐狸的人工饲养历史悠久，自1860年由加拿大的Dalton和Oaron创办世界上第一个养狐场，使养狐业进入商品生产已有140多年的历史，现已迅速发展，遍及欧、亚、北美等许多国家，其皮张已成为目前国际毛皮行业的三大支柱之一。近年来，银狐被引入我国，进行了较大规模的驯养繁殖，银狐成为我国毛皮兽饲养的重要种类。据统计，1998年，我省的银狐人工饲养种群达到7200只，一等银狐皮的平均销售价格达人民币500元以上，它是毛皮产业主要出口创汇的主流产品之一。由于银狐自身的生物学特性决定了银狐的繁殖特点，其繁殖力较低，一般每

5、胎产24只，偶见5只以上。因此银狐的繁殖速度较慢，饲养成本偏高，严重影响了其养殖业的发展，也是长期困扰银狐养殖业户的首要问题。目前国内外尚未解决此问题，也未见有关的报道。但利用外源激素促使超数排卵而提高家畜、犬类和小型试验动物繁殖力的研究有许多报道（武石昌敬1980、黄利权1995、吴结革2000、孙广忠2000、丰培金2000等）。近年来，国内外学者对狐狸繁殖方面的研究有许多报道（冯怀亮1991、孔庆松1992、邴印忠1998、孙凤俊2000、刘志平2000、等），为了提高银狐的繁殖能力，加快银狐的繁殖速度，降低饲养成本，促进养殖业的发展，应该从科研及生产应用等方面对狐狸的繁殖进行全面地研究

6、，因此，提高银狐繁殖力的研究势在必行。影响银狐繁殖力的因素很多，主要包括年龄因素、营养因素、光照因素、排卵数量、环境因素、疾病因素、个体差异等。本项目是根据银狐繁殖生物学特性，利用外源激素促使母狐超数排卵，并辅助人工授精、添加维生素及调节营养配比提高银狐的繁殖力。本项目2000年由黑龙江省森工总局下达，黑龙江省野生动物研究所承担，历时2个繁殖周期，于2002年10月完成。项目将银狐的平均胎产由4.25只/母增加到5.866.0只/母，平均增加1.611.75只。各项技术指标均达到或超过合同文本要求，取得了突破性进展，全面完成了研究任务。本项目由黑龙江省野生动物研究所葛东宁主持。参加本项目的科研

7、人员还有：松北野生动物养殖实验场李立滨，省野生动物研究所卢向东、孙红瑜、靳玉文，南岔林业局石头河子林场张永喜。在此对松北野生动物养殖实验场、饶河县科学技术委员会、饶河珍贵毛皮动物养殖试验示范基地、绥化经济动物养殖场、南岔林业局石头河子林场等单位的大力支持表示感谢！ 本项目所涉及的内容较多，时间较紧，且水平有限，难免有许多不足和疏漏之处，恳请批评指正。2 试验地点、材料、内容及方法1.1 试验地点及材料本项目试验地点是哈尔滨市松北野生动物养殖实验场。所用试验材料包括银狐繁殖种群、实验药品、实验饲料、实验仪器等。银狐繁殖实验种群是哈尔滨市松北野生动物养殖实验场银狐繁殖种群。实验药品包括南京动物激素

8、厂“促黄体素释放激素类似物A3（促排3号即LRHA3）”、“绒毛膜促性性腺素（HCG）”、“三合激素注射液”、宁波第二激素厂“垂体促卵泡素（FSH）”、“垂体促黄体素（LH）”、内蒙古新生代药业有限公司“孕马血清冻干粉（PMSG）”等。实验仪器包括黑龙江省野生动物研究所研制的狐狸发情鉴定仪，显微镜等。1.2 试验内容和方法1.2.1 试验内容项目试验内容包括：外源激素的应用；外源激素的性价对比，外源激素对母狐第2年繁殖的影响；提高银狐繁殖力的经济效益分析；银狐养殖场银狐繁殖情况调查等。1.2.2 试验方法1.2.2.1 母银狐发情的鉴定方法母狐发情排卵的鉴定方法主要有外阴观察法、试情法、阴道涂

9、片法和狐狸发情测情器法，并参照历年母狐的发情时间。本项试验需在母狐发情排卵的前10天左右对其注射外源激素，需在母狐发情排卵时间确定的基础上往前推算。母狐进入发情期，由于内分泌的变化，外阴部出现明显的变化，通常分为以下4个阶段：第1阶段为发情前期。此时母狐的阴门隐藏在阴毛里，开始有肿胀的表现，阴毛分开，阴门逐渐外露，阴道有分泌物出现，在阴道图片上可以看到白血球占优势，有核角化上皮细胞比较偶见。测情器的电阻数值为150左右，此期一般能持续23天。我们在进入该期时开始实验。第2阶段为发情进展期。此时阴门有明显的肿胀，阴蒂增大，阴道图片上可以看到大量的角化的上皮细胞，测情器的电阻数值为200左右。放对

10、试情时，母狐不抬尾，拒绝交配。进入该期，一般情况下距发情还有一个星期左右的时间。第3阶段为发情期。此时阴门肿胀程度已近圆形，而且向外翻，颜色变深，阴道有乳白色粘液和分泌物，阴道涂片上可以看到无核角化上皮细胞占优势，测情器的电阻数值为300500左右。放对时，母狐温顺，主动将尾摆在一侧。第4阶段为发情后期。此时阴门逐渐恢复正常，阴道涂片上可看到有核角化上皮细胞和红血球细胞。此时雄狐停止对母狐的追逐。1.2.2.2 外源激素的应用方法随机选择健康母银狐2组，每组32只。第一组为实验组，第二组为对照组。将第一组分为A、A1、B、C、D 5小组，每组34只。在母银狐排卵的前10天开始对A、A1、B、C

11、、D 5组注射外源激素。排卵的前9天每天注射第1激素，第10天注射第2激素，每小组的第1激素和第2激素有所不同。A组：前10天的19天，每天注射PMSG 300单位，第10天注射HCG 400单位，第11天人工授精，第12天重复人工授精。A1组：前10天的19天，每天注射PMSG 400单位，第10天注射HCG 500单位，第11天人工授精，第12天重复人工授精。B组：前9天每天肌肉注射兽用三合激素1 ml，第10天注射LRHA3 （促排3号）0.2mg，第11天人工授精，第12天重复人工授精。C组：前10天的19天，每天肌肉注射LRHA3 （促排3号） 0.1mg，第10天注射LRHA3 （

12、促排3号）0.2mg，第11天人工授精，第12天重复人工授精。D组：前10天的19天，每天肌肉注射FSH 200单位，第10天注射LH 300单位，第11天人工授精，第12天重复人工授精。第二组为对照组，按常规方式饲养管理。观察记录实验情况，统计产仔数。第2年重复以上试验。应该注意的是，在前9天的实验过程中，当实验母狐出现明显发情表现时，应注射第2激素，第2天实施人工授精。1.2.2.3 银狐产仔统计方法我们对本次实验组和对照组的银狐产仔数量进行了记录统计，并利用统计学的方法对每个实验组进行了平均数的差异显著性检验及多个方差的齐性检验巴特勒（Bartlett）检验。我们对省内有代表性的松北野生

13、动物养殖实验场、饶河珍贵毛皮动物养殖试验示范基地、绥化经济动物养殖场及周边小规模养殖场几年来的平均产仔数量进行了调查统计，计算出平均产仔数。3 试验结果2.1 母银狐生殖系统解剖生理特点母银狐的生殖系统由卵巢、输卵管、子宫、阴道、及外生殖器官组成，外生殖器官包括阴道前庭、阴唇和银蒂。卵巢位于第3和第4腰椎处肾脏的后缘。左侧卵巢比右侧卵巢稍靠前。卵巢呈扁平状，灰红色，发情期卵巢长2cm，宽1.5cm , 输卵管长57cm。卵巢和输卵管被脂肪组织所覆盖。子宫为双子宫角子宫，子宫角和子宫体由子宫阔韧带吊在腰下部骨盆两侧壁上。子宫角长1013cm ,子宫体长46cm ,子宫颈凸入阴道内。阴道长68cm

14、，前端与子宫颈相连，后部接尿生殖前庭。前庭有两个比较发达的凸起。交配时，前庭受刺激而剧烈收缩，两凸起膨大，与雄银狐阴茎球体共同作用而出现连锁。母银狐的阴门在非繁殖期被阴毛覆盖而不明显，繁殖期（即发情期）有明显的形态变化。2.2 影响母狐繁殖力的因素动物的繁殖力可概括为动物维持正常繁殖机能生育后代的能力。母兽的繁殖力是一个包括多方面的综合性概念，它表现在性成熟的早晚，繁殖周期的长短，每次发情排卵的多少，卵子受精能力的大小，妊娠情况等。2.2.1 影响母狐发情与配种的因素由于母狐的排卵时间较短，所适宜的交配时间就很短，仅为23天，如果母狐在配种季节不发情或错过发情期而未交配，就不能妊娠产仔，影响母

15、狐发情与配种的因素主要有：2.2.1.1 遗传因素遗传性状是影响母狐发情、配种、产仔的主要因素，由于国内生产中采用的隔离笼养保种方法，造成大量近交系，使品种退化，生殖能力降低，空怀率升高和抗病力下降等严重问题，给生产造成严重损失。因此培养繁殖力高的品种，淘汰发情晚、产仔困难、泌乳量小、护仔性差的母狐是对提高狐群质量和繁殖力的有效措施。2.2.1.2 年龄因素银狐一般在911个月性成熟，出生较晚的仔狐到翌年配种季节，部分个体尚未性成熟，因而不能发情配种。出生较晚的银黑狐约有2 0 %到翌年繁殖季节不能发情。2.2.1.3 营养因素在狐狸的生殖器官发育过程中需要有足够的蛋白质、矿物质和维生素等。蛋

16、白质不足, 母狐瘦弱，发育受阻, 不发情。在准备配种阶段不注意调整母狐体况致使母狐到配种期过于肥胖, 也会导致发情推迟或不发情。 饲料品质不佳, 缺乏某些矿物质或维生素时, 会影响母狐发情配种。2.2.1.4 光照因素狐狸生殖器官的发育受自然光周期调节。当秋分后白昼时数逐渐短于黑夜时, 其生殖系统开始缓慢发育；冬至后, 其生殖系统开始迅速发育, 随着白昼时数进一步延长, 银狐进入繁殖季节。如果在狐狸生殖系统发育的关键时期人为任意改变光周期节律, 将会造成母狐生殖紊乱, 对发情配种产生不利影响。以幼狐对光照的反映最为敏感。光周期的季节性变化随着地理纬度的不同, 变化幅度也不相同, 如果 1 2月

17、以后由高纬度地区向中、低纬度地区引种时,由于引入地光周期变化幅度与原引种地差异较大, 致使狐生殖器官的发育受到不良影响, 造成发情迟缓或紊乱, 因而引种母狐当年的发情和受配率较低, 且配种期普遍推迟。2.2.1.5 其它因素一些母狐排卵时发情表现不明显, 若不认真检查, 容易造成失配。有的母狐择偶性较强, 容易当作发情不到位而错过发情期。在配种时, 个别初配母狐站立姿势不好或阴门向外突出等原因很难自行达成交配; 还有的母狐阴道狭窄或阴部被长毛覆盖,或外阴部一侧肿胀等也很难达成交配。在饲养管理或配种过程中粗暴对待母狐的和突然刺激可使其出现拒配现象。2.2.2影响母狐窝产仔数的因素决定母狐胎产仔数

18、多少的主要因素是母狐排卵数目、受胎率、受精卵数和生前胚胎损失情况。2.2.2.1 排卵数量狐狸是自发 (持续性 )排卵动物, 其排卵数主要受遗传决定, 此外, 母狐的体况和环境因素也起着重要作用。遗传对排卵数影响的最典型的例子就是不同属的北极狐(Alopes lagepus) 即蓝狐和银狐间的排卵数差异: 北极狐的排卵数平均为 1 4(1 2 5)枚, 银狐平均排卵数为7(1 1 0 )枚。北极狐发情期长, 可使前后期滤泡成熟机会多, 因而产仔率高; 银黑狐发情期短, 前后期滤泡成熟机会少, 因而产仔少。配种前期和配种期的体况对母狐排卵率也有很大影响。 1岁龄母银狐中等和中下等体况体重指数 (

19、肥度 )分别为 87. 0 94. 5g/ cm和 70 . 6 84. 2 g/cm 的卵巢中黄体数较多, 子宫角内胚胎数也较多。体况过肥或过瘦都严重影响母银狐卵巢卵泡发育, 从而影响排卵数。2.2.2.2 受胎率和出生前胚胎的成活母狐的受胎率实际上就是指排出的卵子受精情况。1岁龄母银黑狐胚胎死亡率为 21 %39%。母狐的受胎率及发育成胚胎的受精卵的数量受配种 (输精 )时间、精液品质、年龄、遗传、环境和营养等因素的影响。不论是本交还是人工授精, 公狐精液品质都非常重要, 只有优质精液才能使母狐卵子很好受精。环境对狐的胎产仔数也有很大影响, 在配种后前两周不良应激可降低受胎率或增加胚胎早期

20、死亡几率。在妊娠的后两周强烈的应激刺激可导致母狐流产。银狐妊娠期患病对其繁殖率影响最为严重, 如人工授精测情器和器材消毒不彻底, 由绿脓杆菌能引起银狐子宫内膜炎 ,导致母狐死亡或流产。阴道加德纳氏菌能使妊娠 20 45天的母狐流产或妊娠中断, 胎儿被吸收。2.2.3影响母狐产仔和产后仔狐成活率的因素难产是导致仔狐生后死亡的常见病、多发病, 极易造成母仔双亡。难产的原因大多是由于胎儿过大, 胎位不正或子宫分娩力不强造成的, 这些往往与妊娠期饲喂不当, 运动量不足有关。在产后 2 4小时以内死亡的仔狐大部分是弱仔, 死因可能是巢穴保温性较差所致; 吃不上母乳也可造成弱仔产后死亡。银黑狐有弃仔现象,

21、 这与其在兽群中等级有关。不管邻近笼中的母狐等级怎样, 具有高兽群等级的母狐断乳时仔兽数显著高于兽群等级低的母狐。笼舍结构对银黑狐产仔数和断乳成活数有很大影响。银狐更喜欢在有狭窄进入通道的产箱中哺育仔兽 ,在这种产箱中产后03周内仔兽死亡率较低。母狐在哺乳初、后期易患乳腺炎, 对哺乳期仔狐的危害极大。在胚胎发育期, VC 供给不足时, 产出的子狐易患红爪病。 如不采取必要措施 ,生后 45天就死亡。哺乳后期仔兽死亡原因主要是中暑和患细菌病等。综上所述，影响银狐繁殖力的因素很多，我们视影响银狐繁殖力的诸多因素为正常情况下，利用外源激素促使母狐超数排卵，并辅助人工授精，提高银狐的繁殖力。2.3 银

22、狐的排卵2.3.1 排卵银狐是季节性单次发情动物，母狐的生殖器官在乏情期（约9个月）处于萎缩状态，从8月末至10月卵泡逐渐发育，至11月黄体消失后，卵泡迅速增长。正常情况下，在1月末至3月中旬出现发情，持续时间35天。银狐是自发排卵，在LH峰值后2天，排出初级卵母细胞，卵泡不是同时成熟和排出，是陆续发育成熟排卵的，最初和最后一次排卵的间隔约为3天左右，然后初级卵母细胞在输卵管内经23天的成熟阶段，受精分裂，在初配后46天进入子宫角继续发育（邴印忠1998）。2.3.2 超数排卵为了获得更多的胚胎，人们模拟体内卵母细胞发育成熟与排放的激素调节模式，通过不同的外源促性腺激素处理，刺激暂时处于休止状

23、态的卵母细胞进入成熟发育期，成熟后排放于输卵管，由此获得比自然排卵时更多的卵母细胞或胚胎。2.4 外源激素及其选择2.4.1 生殖激素的种类与主要用途：生殖激素大致可分为3类：（1）来自丘脑下部的释放激素，可控制垂体合成与释放有关的激素，包括促性腺素释放激素（GnRH）、促乳素释放因子（PRF）、促乳素抑制因子（PIF）、促甲状腺素释放激素（TRH）；（2）来自垂体前叶的促性腺激素，直接关系到配子的成熟与释放及刺激性腺产生类固醇激素，包括促卵泡素(FSH)、促黄体素（LH）、促乳素（LTH）；（3）来自两性性腺睾丸和卵巢的性腺激素，它对两性行为、第二性征和生殖器官的发育与维持以及生殖周期的调节

24、，均起着重要作用，包括雌激素（雌二醇为主）、孕激素（孕酮为主）、松弛素、雄激素（睾酮为主）。除此之外，还有来自胎盘的一些激素，包括与LH作用相似的绒毛膜促性腺素激素（HCG）、与FSH作用相似的孕马血清促性腺素激素。我们根据每种生殖激素的作用机理及其以往在家畜、实验动物的试验结果，并结合激素的性价比和实施的可操作性，选择了 “孕马血清（PMSG）”、“绒促性素（HCG）”、“垂体促卵泡素（FSH）”、“垂体促黄体素（LH）”、“促黄体素释放激素类似物A3”、“三合激素”做为本次实验的外源激素，采用肌肉注射的方式进行试验。我们对所选外源激素的主要特点和作用概括如下：a 促黄体素释放激素类似物A3

25、（促排3号）为人工合成的黄体释放素A3加适宜赋形剂，经冷冻干燥制成的无菌制剂，所含激素（C64H82N8O13）为标准量的85.0-115.0%。能促使动物垂体前叶释放促黄体素（LH）和促卵泡素（FSH）。用于促进动物排卵，治疗动物排卵迟滞，卵巢静止，持久黄体，卵巢囊肿及早期妊娠诊断。b 垂体促卵泡素（FSH）来自猪脑下垂体前叶提取的垂体促卵泡素加适宜赋形剂，经冷冻干燥的无菌制品。在垂体促黄体素协同下，能促进卵巢卵泡生长发育和雌性素分泌，引起正常发情。用于卵巢静止，持久性黄体，卵泡发育停滞等。c 垂体促黄体素（LH） 为自猪脑下垂体前叶提取的垂体促黄体素加适宜赋形剂，经冷冻干燥的无菌制品。在垂

26、体促卵泡素协同下，能促进卵泡最后成熟，诱发成熟卵泡排卵和黄体生成。用于排卵延迟，卵巢囊肿和习惯性流产等。d 孕马血清（PMSG） 选用健康、轻型的孕马适时采收血清，经科学加工而成，其有效成分称为孕马血清促性腺激素（PMSG）。它是一种糖蛋白质，同一分子具有促卵泡素（FSH）和促黄体素（LH）两种活性，而且PMSG在活体中的半存留期，比垂体和其它胎盘促性腺激素都要长。PMSG可用于动物同期发情、超数排卵、多胎多产以及繁殖机能障碍的治疗。e 绒毛膜促性腺素激素（HCG） 使母畜卵泡发育成熟，诱导排卵，在排卵后，使卵汽膜和粒层细胞转变为黄体细胞。适用由于正常排卵性能减少，性欲不振或缺乏性欲冲动, 产

27、后缺奶,卵巢囊肿症。f 三合激素注射液 为丙酸睾丸素、黄体酮、苯甲酸母二醇的灭菌油溶液。用于诱导发情和同期发情等。2.5 外源激素对银狐繁殖影响的试验结果我们将实验银狐和对照组的产仔情况进行了统计，结果见表1：表1 不同激素对实验银狐繁殖影响 组别外源激素组成平均注射次数（次/母）剂 量试验母狐数（只）平均妊娠期（天）产仔数（只）平均产仔数（只/母）比对照组增加的数量（只/母）1PMSG+HCG7.71300dw+400dw753.0415.861.612PMSG+HCG6.81400dw+500dw454.0246.01.753三合激素+ LRHA36.711 ml0.2mg753.0314

28、.430.174LRHA37.611ml0.2mg654.2264.330.085FSH+LH71200dw+300dw752.9375.291.04合计8.2311595.13对照组321364.25由表1可见，本次实验共有4种激素组合，其中PMSG+HCG有2种不同计量，平均每母注射8.2次, 试验母狐31只，产仔159只，平均每母产仔5.13只，试验组比对照组平均每母多产0.88只。其中PMSG+HCG的不同计量组合及FSH+LH组合的平均每母产仔数达到5.29以上，比对照组平均每母多产1只以上，PMSG+HCG的400dw+500dw的激素组合的平均每母产仔数达到6只，比对照组平均每母

29、多产1.75只。利用统计学的方法对每个实验组进行了平均数的差异显著性检验。将每个实验组和对照组的每母产仔数量（Xi）、窝数（n）、产仔平均数（）、仔狐数量和（）、仔狐数量平方和（）、的数值列于表2。表2 平均数的差异显著性检验组别（Xi）n15 5 5 6 6 7 7 75.864124525 6 6 7 46.02414633 4 4 5 5 5 5 74.423114143 4 4 4 5 5 64.332610754 5 5 5 6 6 6 75.2937199实验组合计315.13159对照组2 2 3 3 3 3 3 3 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 5 5 5 6 6 6 6 7324.25136622假设实验组和对照组的每母产仔数无显著差异，即可以视这2个样本来自总体平均数相同的2个总体。由以上数据我们得出 S21= 2450.694同理，S22= 0.500 S230.531， S240.472， S250.490， S2对照组1.375计算第1实验组和对照组的平均数的差异显著性