葡萄糖的旋光性及变旋现象.ppt

1、实验 十二 葡萄糖的旋光性及变旋现象,一、实验目的,1、了解糖的旋光性及变旋现象；2、学习旋光度的测定方法。,二、实验原理,1.定义：,手性化合物使平面偏振光偏振面旋转的性质称为旋光性。具有旋光性的物质称为旋光物质，或称为光学活性物质。,若手性化合物能使偏振面右旋(顺时针)称为右旋体，用(+)表示；而其对映体必使偏振面左旋(逆时针)相等角度，称为左旋体，用(-)表示。,偏振面被旋转的角度称为旋光度，用表示。,手性化合物旋光度与溶液浓度、溶剂、测定温度、光源波长、测定管长度有关。因此旋光仪测定的旋光度并非特征物理常数，同一化合物测得的旋光度就有不同的值。因此为了比较不同物质的旋光性能，通常用比旋

2、光度来表示物质的旋光性，比旋光度是物质特有的物理常数。用 表示。,2.测定方法：,手性化合物的旋光度可用旋光仪来测定。实验室常用目测或自动旋光仪。,自动旋光仪基本构造,仪器采用20瓦钠光灯作光源，由小孔光栏和物镜组成一个简单的点光源平行光管，平行光经偏振镜（一）变为平面偏振光，当偏振光经过有法拉弟效应的磁旋线圈时，其振动平面产生50赫兹的角往复摆动，该偏振光通过检偏镜投射到光电倍增管上，产生交变的光电讯号，当检偏镜的透光面与偏振光的振动面正交时，即为仪器的光学零点，此时出现平衡指示。而当偏振光通过一定旋光度的测试样品时，偏振光的振动面转过一个角度，此时光电讯号就能驱动工作频率为50HZ的伺服电

3、机，并通过涡轮杆带动检偏镜转动角而使仪器回到光学零点，此时读数盘上的示值即为所测物质的旋光度。,三、仪器和试剂,仪器：WZZ-3自动旋光仪、容量瓶（20ml）试剂：葡萄糖,WZZ-3自动旋光仪,四、仪器使用,1、先打开电源开关（power），至少等待5分钟后，后将光源开关向（light）上拨至直流位置,此时可使钠灯启动。关闭时则是先关闭（light）再关闭（power）。,2、按enter键，显示出厂默认值：mode1;L:2.0;C:0;n:1。Mode1:表示测旋光度 L:2.0：表示试管的长度 C：表示样品的浓度 n:表示自动复测的次数,3、如不需修改，按 enter 键，显示“0.00

4、0”作一般旋光仪使用。4、如需修改，注意光标的位置，可做修改，输入数字后，按enter键。,5、在测量的过程中，要改变模式，可按键。6、每次在放入样品前，按“校零”键。,五、实验步骤,1、将放样管洗好，左手拿住管子把它竖立，装上蒸馏水，使液面凸出管口。2、将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好，不能带入气泡，旋上螺丝帽盖，不要过紧。3、将蒸馏水管擦干，放入旋光仪内盖上盖子，开启钠光灯，按清零键，读数盘显示0.000即可。,（一）旋光仪零点的校正：,（二）旋光度的测定：,1、准确称取2.0g葡萄糖样品，放在20ml容量瓶中配成溶液，倒入样品管，放入已调零的旋光仪内，待读数稳定读出读数。,2、每隔20min测定1次葡萄糖溶液的旋光值，至少测定4次，根据公式计算葡萄糖溶液的比旋光值。,六、注意事项,1、试样溶液必须澄清，不应浑浊或含有混悬的小颗粒，否则，应预先过滤。试样溶液不能含有其它的光学活性杂质，如有机酸、蛋白质、核酸、生物碱。2、每次测定之前应以溶剂做空白实验，校正零位。,