《畜禽疫病防治》技能训练教案资料.docx

1、畜禽疫病防治技能训练教案资料畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练1授课时数2学时授课内容 实验室常用玻璃器皿的洗刷、消毒和仪器使用教学方式实习一、实训内容：学习实验室常用玻璃器皿洗刷、包装、消毒的方法及常用仪器使用。二、目标要求：熟悉各种玻璃器皿的洗刷和灭菌方法；了解传染病实验室常用仪器的构造，熟悉仪器的使用方法和注意事项。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）玻璃器皿的洗刷 新购入的玻璃器皿的洗刷方法 一般使用过的玻璃器皿的洗刷方法 载玻片的洗刷方法 细菌培养用过的试管、平皿等的洗刷方法 对污染有病原微生物吸管的洗刷方法（2）玻璃器皿的包

2、装：培养皿、试管、三角烧瓶、吸管、乳钵、漏斗、烧杯等（3）玻璃器皿的灭菌：常用干热灭菌法（4）实验室常用仪器的使用电热恒温培养箱、电热干燥箱、高压蒸气灭菌器、电冰箱、电动离心机、电热恒温水浴箱等的使用方法。2学生操作（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体五、作业： 1写出实习报告。2掌握各种玻璃器皿的洗刷和灭菌方法；熟悉传染病实验室常用仪器的使用方法和注意事项。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练2授课时数2学时授课内容 显微镜的构造、使用及保养教学方式实习一、实训内容：学习显微镜的构造、原理、使用方法及保养方法。二、目标要求：认识生物显微镜的一般构造，了解使用原

3、理，并正确掌握其使用方法和保管方法。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）显微镜的一般构造机械部分：镜座、镜体、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器、载物台、推进器、压夹、转换器、集光器升降螺旋光学部分：目镜、物镜（低倍镜、高倍镜、油镜）、光源（2）显微镜的使用方法油镜的识别：3种方法油镜的使用原理：凸透镜原理，香柏油可以减少光线的折射损失。使用方法：放置显微镜 调节视野亮度 放置标本片 镜检 油镜的保养 （3）显微镜使用时的注意事项2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体五、作业： 1写出实习报告

4、。2掌握显微镜的一般构造，正确掌握其使用方法和保管方法。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练3授课时数2学时授课内容 常用培养基的制备教学方式实习一、实训内容：学习各种常用培养基的计算、制备及保存方法。二、目标要求：熟悉各种常用培养基制备的基本程序，会根据不同需求制备适量培养基。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）营养琼脂培养基的制备计算称量溶化倒平板或倒试管灭菌无菌检验备用 计算：根据营养琼脂培养基的说明书了解营养琼脂粉与蒸馏水的比例，一般是1000 mL蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g，再根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。 称量

5、：用普通天平称量出琼脂粉的量，用量筒量出相应的蒸馏水的量。 熔化：将琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热熔化，边加热边搅拌，沸腾后立即从电炉上拿下，等泡沫消失后再放在电炉上加热，反复煮沸23次。注意不能让琼脂溢出。 倒平板或倒试管若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约15mL左右，以刚好覆盖平皿底为易。若做斜面培养基应倒入试管中，约为试管的1/3。 灭菌：用高压灭菌器灭菌，在121.3灭菌2030min。 无菌检验：随机抽取几个平板培养基或试管培养基于温箱中培养24小时，若无菌生长则为合格。 备用：将合格的平板培养基和试管培养基放入冰箱，在04中保存备用。注意：SS琼脂培养基不需要灭菌。（2

6、）血液琼脂培养基的制备（3）肉汤培养基的制备（4）半固体培养基的制备2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练4授课时数2学时授课内容病料的采取、保存、送检教学方式实习一、实训内容：病料的采取、保存、送检及注意事项。二、目标要求：通过实训，使学生初步掌握不同动物传染病病料的选择、采取、包装和送检的方法。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）病料的采取 采取病料的时间 最好死后立即采取，以不超过6h为宜。 采取病料器械的消毒 讲解各种组织脏

7、器病料的采取方法：淋巴结及内脏、脓汁及渗出液、血液、乳汁、胆汁、肠、皮肤、胎儿、禽和小动物、脑、脊髓、管骨等。（2）病料的保存 病料应保持新鲜状态，以免病料送达实验室时已失去原来状态，影响正确诊断。（3）病料的包装和送检方法 病料送检 附病料送检单，该单需复写三份，其中一份留为存根，两份寄往检验室，待检查完毕后，退回一份。 病料的包装和送检 液体病料（如黏液、渗出液、尿及胆汁等）最好收集在灭菌玻璃管中，管口用火焰封闭，封闭时注意勿使管内病料受热。将封闭的玻璃管用棉花包裹，装入较大的试管中，再装盒运送。用棉签蘸取的鼻液及脓汁等物，可置于灭菌试管内，剪除多余的棉签，严密加塞，用蜡密封管口，再装盒送

8、寄。 病料装于容器内至送到检验部门的时间应越短越好。运送途中应避免病料接触高温及日光，以免材料腐败或病原微生物死亡。2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练5授课时数2学时授课内容细菌标本片的制备及染色方法教学方式实习一、实训内容：细菌标本片的制备、染色及常用染色液的配制方法。二、目标要求：能利用不同的材料进行细菌标本片的制备，会进行常规染色，并掌握细菌的不同染色特性。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）涂片标本的制作 涂片 取洁净

9、载玻片一张，用吸管吸取生理盐水少许滴于玻片中央，将接种环在火焰上灭菌，待冷后从固体培养基上挑取少许细菌，置于玻片上的生理盐水中混均匀，并在玻片上涂成直径约为1cm的涂面。 干燥涂片 在室温下自然干燥，必要时将涂面向上，置火焰上方2030cm处微烤使其干燥。 固定涂片 干燥后，将涂面向上，在火焰上快速来回通过23次，其温度以手背接触玻片底面感觉微烫为宜。（2）血液推片的制作 取一张边缘整齐的载玻片，用其一端蘸取少许血液，在另一张干净无油脂的载玻片上，以45角度均匀地推成一薄血膜，以红细胞不重叠为宜。（3）组织抹片的制作 待检尸体经无菌操作切开胸腹腔后，用经火焰灭菌的镊子夹起组织（如肝、肾、淋巴结

10、等），然后用灭菌剪刀剪下小块组织，将组织切面在载玻片上等距离轻触几下，使其留有组织切面的压迹。或用烧后的刀（或烙铁）在病料表面烧烙灭菌后，用灭菌刀挖取组织一小块，以灭菌镊子夹取后作抹片。（4）常用的细菌染色方法 亚甲蓝染色法 滴加适量美蓝染色液覆盖涂面，染色23min，水洗。 革兰染色法 草酸铵甲紫溶液革兰碘液95乙醇稀释石炭酸复红 瑞氏染色法 滴加瑞氏染色液于涂片上以固定标本，13min后，再滴加与染色液等量的磷酸缓冲液或中性蒸馏水于玻片上，混和均匀，5min左右水洗。2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治

11、教案授课顺序技能训练6授课时数2学时授课内容 细菌的分离培养及形态观察 教学方式实习一、实训内容：细菌的分离培养及细菌形态观察。二、目标要求：掌握细菌的分离培养方法，学会观察培养物及病料组织触片中细菌的形态三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）细菌的分离培养：平板划线分离法 右手持接种环于酒精灯上灼烧灭菌，冷却。 无菌操作取病料 若为液体病料，可直接用灭菌的接种环取病料一环；若为固体病料，首先将烙刀在酒精灯上灼烧灭菌，并立即用其烫烙病料表面，并在烫烙面的中央做一切口，然后用灭菌接种环沿切口插入组织中缓缓转动接种环，钩取少量组织或液体。

12、左手持平皿，用拇指、食指及中指将平皿盖打开一侧（角度大小以能顺利划线为宜，但以角度小者为佳，以免空气中细菌污染培养基）。 将已取被检材料的接种环伸入平皿中，并涂于培养基一侧，然后自涂抹处以腕力在平板表面轻轻地分区划线。 划线完毕，接种环烧灼灭菌，将培养皿盖好，用记号笔在培养皿底部注明被检材料及日期，倒置于37温箱中，培养1824h后观察结果。（2）细菌基本形态的观察 纯培养物标本片（葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等） 血片或组织触片（炭疽杆菌、巴氏杆菌等）2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业：写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练7

13、 授课时数2学时授课内容细菌的药物敏感试验教学方式实习一、实训内容：纸片法细菌药物敏感试验的操作及结果判定。二、目标要求：掌握纸片法药敏试验的操作方法，会进行结果判定，为临床上选择有效药物打下良好基础。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）无菌操作钩取大肠杆菌的培养物，以密集均匀划线法，接种于普通营养琼脂平板上。（2）在平皿底部外侧用蜡笔标记将要贴放药敏片的名称（现在多在药敏片的纸片上标记药物的名称或代号）。（3）用灭菌镊子夹取已制备好的药敏片，按标记位置，轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面，一次放好，不能移动，各纸片间的距离要大致相等

14、。（4）置37温箱中培养1824h后取出，观察并记录分析结果。根据纸片周围有无抑菌圈及其直径大小，按下列标准确定细菌对抗生素等药物的敏感度。 细菌对不同抗菌药物敏感度标准药物名称抑菌圈直径（mm）敏感度青霉素10112020不敏感中度敏感高度敏感链霉素及其他抗菌药物10111515不敏感中度敏感高度敏感2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练8授课时数2学时授课内容 鸡新城疫的诊断教学方式实习一、实训内容：学习鸡新城疫的临床诊断和实验室诊断的方法。二、目标要求：掌握鸡新城疫的临床诊断方法和实

15、验室诊断的方法及结果判定。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）鸡新城疫的临床诊断 按家禽尸体剖检程序，首先检查鸡的体表组织，然后检查皮下组织，最后打开体腔，暴露整个胸腔和腹腔器官，检查内脏组织器官。鸡新城疫主要检查消化道病变。 将剖检所见填写于病理剖检记录表内。 根据剖检记录，归纳分析进行初步诊断。（2）鸡新城疫的实验室诊断 病料采集与处理：无菌操作采取脾、脑、肺、肝、肾等器官组织。 鸡胚接种：用911日龄的SPF鸡胚（如果没有SPF鸡胚，也可用非免疫鸡胚） 血疑试验（HA）：一方面判断分离病毒是否具有血凝性，另一方面确定HI试验中所

16、用抗原的HA滴度。 血凝抑制试验（HI）：用上述分离病毒制备4U病毒，再用标准的阳性血清进行HI试验。 2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练9授课时数2学时授课内容马立克病的实验室诊断教学方式实习一、实训内容：马立克病的实验室诊断（琼扩试验）。二、目标要求：掌握琼脂平板的制备方法及用琼扩试验的方法诊断鸡马立克病。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）1%琼脂平板制备 用8%10%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液，电炉加热使充分溶化后，倒

17、入直径90 mm的培养皿，制成厚度为2.53mm琼脂平板；平放，在室温下冷却凝固。（2）打孔 在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔），孔径5mm，孔距25mm，将孔内的琼脂用针头斜面朝上轻轻将琼脂挑出，勿伤边缘或使琼脂层脱离平皿底。（3）封底 用酒精灯轻烤平皿底部至微烫，封闭孔底部，以防侧漏。（4）编号 将周边孔编号为16（5）加样 向中央孔加马立克病阳性血清，向周边1、4孔加标准马立克病琼扩抗原，向周边2、3、5、6孔加待检羽髓浸提液。如果检测血清抗体（被检鸡血清），向中央孔滴加标准琼扩抗原，向周边孔滴加待检血清和有一孔加阳性血清，均以加满而不溢出为度；将加样后的琼脂平皿加盖

18、后倒置平放于加盖的湿盒内，置37温箱中扩散，824h内观察并记录结果。（6）结果分析：被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线，并与周边已知抗原和阳性血清孔的沉淀线互相融合者，判为阳性，不出现沉淀线的判为阴性；已知抗原与阳性血清之间所产生的沉淀线末端变向被检样品孔内侧时，则该被检样品判为弱阳性。有的被检材料可能会出现两条以上沉淀线，其中一条与已知抗原和阳性血清的沉淀线融合者，仍判为阳性。（7）上述方法可用于20日龄以上鸡羽髓马立克病抗原检测和1月龄以上鸡的血清抗体检测。2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案

19、授课顺序技能训练10授课时数2学时授课内容 鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定教学方式实习一、实训内容：利用琼扩试验检测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价。二、目标要求：掌握琼脂平板的制备及利用琼扩试验测定鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价的方法三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）1%琼脂平板制备 用8%10%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液，电炉加热使之充分溶化后，倒入直径90 mm的培养皿，制成厚度为2.53mm的琼脂平板；平放，在室温下冷却凝固后打孔。（2）打孔 在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔），孔径5mm，孔距25mm，将

20、孔内的琼脂用8号针头斜面向上轻轻将琼脂挑出，勿伤边缘或使琼脂层脱离平皿底。一般打孔两组。（3）封底 用酒精灯轻烤平皿底部至微烫，封闭孔底部，以防侧漏。（4）编号 在平皿底用蜡笔编号，第一组编号16，第二组编号712。（5）稀释卵黄：先用微量移液器于96孔血凝板中加生理盐水，每孔50微升，共加12孔；再于第一孔加50微升卵黄，倍比稀释至12孔。（6）加样：中央孔加入鸡传染性法氏囊病（IBD）病毒标准抗原，加样量以“满而不溢”为原则。用微量移液器将96孔血凝板中不同浓度卵黄液小心加至琼扩板的周边孔中，血凝板孔号与琼扩板孔号要一一对应，加样从低浓度开始加样，每加一个浓度，吸嘴尽量喷干净。 （7）反应

21、：将琼扩板静置12min，加盖、倒置于湿盒中，于37的温箱扩散2448h后，观察出现白色沉淀线的孔号，此孔号对应的卵黄稀释度，即是IBD抗体效价。2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练11授课时数2学时授课内容鸡白痢的检疫教学方式实习一、实训内容：学习全血平板凝集试验的原理及鸡白痢检疫的方法。二、目标要求：掌握全血平板凝集试验的原理，学会鸡白痢检疫的方法及结果判定。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教（1）操作方法 先将瓶中抗原充分摇匀，用

22、滴管吸取抗原，于玻片上分别滴三滴，然后使用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，用接种环（或吸管）蘸取血液一满环混入中间一滴抗原内，随即搅拌均匀，并使散开至直径约2cm。左边抗原中再滴加一滴生理盐水搅匀（阴性对照），右边抗原中滴加一滴标准抗体搅匀（阳性对照）。（2）结果判断： 抗原与全血混合，在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性反应。 2min以内不出现凝集，或出现均匀一致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。 在上述情况之外不易判断为阳性或阴性者，判为可疑反应。（3）注意事项： 抗原应在215冷暗处保存，在使用前必须充分振荡，从灭菌之日算起有效期6个月，避免温热及日光曝晒

23、。 本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡，幼龄鸡敏感度较差。 每批鸡检查开始时，必须作阴性、阳性对照。 本试验应在18以上进行，否则影响反应结果。2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练12授课时数2学时授课内容布鲁菌病的检疫教学方式实习一、实训内容：学习布鲁菌病的检疫的不同方法及结果判定。二、目标要求： 初步掌握布鲁菌病的检疫方法。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）试管凝集反应 制备被检血清：马、牛、羊由颈静脉，猪于耳静脉以无菌操作

24、采取血液58mL，盛于灭菌试管中，并立即摆成斜面使之凝固（冬季置于温暖处，夏季置于阴凉处），凝固后即可送实验室，或等1012h血清析出后，分出血清再送。 操作方法：被检血清稀释度 一般情况，牛、马和骆驼用150、1100、1200和1400四个稀释度；猪、山羊、绵羊和狗用125、150、1100和1200四个稀释度。大规模检疫时也可用两个稀释度，即牛、马和骆驼用150和1100；猪、羊、狗用125和150。 结果判定：牛、马和骆驼血清凝集价为1100以上，猪、羊和狗150以上者，判为阳性。牛、马和骆驼血清凝集价为150，猪、羊和狗为125者判为可疑。可疑反应的家畜经34周重检，牛、羊重检时仍为

25、可疑，判为阳性；猪和马重检时仍为可疑，但该场中未出现阳性反应及无临诊症状的家畜，判为阴性。（2）平板凝集反应（3）变态反应试验（4）全乳环状试验2学生操作（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练13授课时数2学时授课内容结核病的检疫教学方式实习一、实训内容：学习牛结核病变态反应的检疫方法。二、目标要求：了解变态反应诊断的原理及意义，掌握结核菌素试验及提纯结核菌素试验的操作和结果判断。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）结核菌素（OT）试验：皮内

26、反应、点眼反应、综合判定与复检（2）提纯结核菌素（PPD）试验注射部位及术前处理 将牛只编号后在颈侧中部上1/3处剪毛（或提前一天剃毛），3个月以内的犊牛，也可在肩胛部进行，直径约10cm，用卡尺测量术部中央皮皱厚度，做好记录。注射剂量 不分牛只大小，一律皮内注射1万U。即将牛型提纯结核菌素稀释成每毫升含10万U后，皮内注射0.1mL。注射方法 先用75%乙醇消毒术部，然后皮内注入定量的牛型提纯结核菌素，注射后局部应出现小泡，如注射有疑问，应另选15cm以外的部位或对侧重做。观察反应 在第72h后观察，对呈阴性及可疑反应的牛只，须在原注射部位，以相同剂量进行第二次注射。第二次注射后应于48h后

27、（即第一次注射后120h）再观察一次。结果判定 阳性反应 局部有明显的炎性反应。皮厚差等于或大于4mm以上者，其记录符号为（+）。对进出口牛的检疫，凡皮厚差大于2mm者，应判为阳性。 疑似反应 局部炎性反应不明显，皮厚差在2.13.9mm，其记录符号为（）。 阴性反应 无炎性反应，皮厚差在2mm以下，其记录符号为（-）。凡判定为疑似反应的牛只，于第一次检疫30d后进行复检，其结果仍为可疑反应时，经3045d后再复检，如仍为疑似反应，应判为阳性。2学生操作：（三）总结、答疑（约10 min）四、教学方法：实验室讲解、示教、多媒体。五、作业： 写出实习报告。畜禽疫病防治教案授课顺序技能训练14授课

28、时数2学时授课内容 常见吸虫、绦虫、线虫基本形态观察教学方式实习一、实训内容：常见吸虫、绦虫、线虫一般形态及基本构造的观察。二、目标要求：通过观察吸虫、绦虫、线虫代表虫种的一般形态，熟悉吸虫、绦虫、线虫的形态构造特征。三、教学过程：（一）导入新课（约10 min）（二）教学内容（约70 min）1讲解示教：（1）吸虫一般形态构造观察示教讲解用显微镜投影仪或多媒体投影仪，以双腔科吸虫（如双腔吸虫、胰阔盘吸虫）为代表虫种，讲解吸虫的共同形态构造特征。外部形态观察学生将代表虫种的浸制标本置于平皿中，在放大镜下观察其一般形态，用尺测量大小。内部形态构造观察在生物显微镜或实体显微镜下，观察代表虫种的染色

29、标本。主要观察口、腹吸盘的位置和大小；口、咽、食道和肠管的形态；睾丸数目、形状和位置；雄茎囊的构造和位置；卵巢、卵膜、卵黄腺和子宫的形状与位置；生殖孔的位置等。（2）绦虫一般形态构造观察 示教讲解用显微镜投影仪或多媒体投影仪，以选定的代表性虫种为例，讲解其头节、成熟节片和孕卵节片的形态构造特征。外部形态观察学生将代表虫种的浸制标本置于瓷盘中，观察外部形态，用尺测量虫体全长及最宽处，测量成熟节片的长、宽度。内部形态构造观察在显微镜下观察代表虫种的染色标本。主要观察头节的构造；成熟节片的睾丸分布、卵巢形状、卵黄腺及梅氏腺的位置、生殖孔的开口；孕卵节片的子宫形状和位置等。 （3）线虫一般形态构造观察示教讲解：示范猪蛔虫的解剖，讲解内部构造；用显微镜或多媒体投影仪，以选定的代表性虫种为例，讲解其形态构造特征。外部形态观察：成虫一般呈线状或纺锤状，而端尖细不分节。整个虫体可分头、尾、 背