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E因子或转录产物3端发夹结构33页.docx

1、E因子或转录产物3端发夹结构33页E.因子或转录产物3端发夹结构要练说,先练胆。说话胆小是幼儿语言发展的障碍。不少幼儿当众说话时显得胆怯:有的结巴重复,面红耳赤;有的声音极低,自讲自听;有的低头不语,扯衣服,扭身子。总之,说话时外部表现不自然。我抓住练胆这个关键,面向全体,偏向差生。一是和幼儿建立和谐的语言交流关系。每当和幼儿讲话时,我总是笑脸相迎,声音亲切,动作亲昵,消除幼儿畏惧心理,让他能主动的、无拘无束地和我交谈。二是注重培养幼儿敢于当众说话的习惯。或在课堂教学中,改变过去老师讲学生听的传统的教学模式,取消了先举手后发言的约束,多采取自由讨论和谈话的形式,给每个幼儿较多的当众说话的机会,

2、培养幼儿爱说话敢说话的兴趣,对一些说话有困难的幼儿,我总是认真地耐心地听,热情地帮助和鼓励他把话说完、说好,增强其说话的勇气和把话说好的信心。三是要提明确的说话要求,在说话训练中不断提高,我要求每个幼儿在说话时要仪态大方,口齿清楚,声音响亮,学会用眼神。对说得好的幼儿,即使是某一方面,我都抓住教育,提出表扬,并要其他幼儿模仿。长期坚持,不断训练,幼儿说话胆量也在不断提高。 考点:转录 这个工作可让学生分组负责收集整理,登在小黑板上,每周一换。要求学生抽空抄录并且阅读成诵。其目的在于扩大学生的知识面,引导学生关注社会,热爱生活,所以内容要尽量广泛一些,可以分为人生、价值、理想、学习、成长、责任、

3、友谊、爱心、探索、环保等多方面。如此下去,除假期外,一年便可以积累40多则材料。如果学生的脑海里有了众多的鲜活生动的材料,写起文章来还用乱翻参考书吗? 解析:转录的终止在原核生物分为依赖Rho因子与非依赖Rho因子两类。Rho因子有ATP酶和解螺旋酶两种活性,因此能结合转录产物的3末端区并使转录停顿及产物RNA脱离DNA模板。非依赖Rho因子的转录终止,其RNA产物3-端往往形成茎环结构,其后又有一串寡聚U。茎环结构可使聚合酶不再前移,寡聚U则有利于RNA不再依附DNA模板链而脱出。 与当今“教师”一称最接近的“老师”概念,最早也要追溯至宋元时期。金代元好问示侄孙伯安诗云:“伯安入小学,颖悟非

4、凡貌,属句有夙性,说字惊老师。”于是看,宋元时期小学教师被称为“老师”有案可稽。清代称主考官也为“老师”,而一般学堂里的先生则称为“教师”或“教习”。可见,“教师”一说是比较晚的事了。如今体会,“教师”的含义比之“老师”一说,具有资历和学识程度上较低一些的差别。辛亥革命后,教师与其他官员一样依法令任命,故又称“教师”为“教员”。 7.下列单股DNA片断中,哪一条在双链状态下可形成回文结构?(北医2019)() A.ATGCCGTAB.ATGCTACG C.GTCATGACD.嘌呤环 E.嘧啶核苷酸 答案:C 考点:回文结构 解析:回文结构的5和3端应该互补。 8.一个mRNA的部分顺序和密码编

5、号如下:CAG CUC UAA CGGUAG AAU AGC 140 141 142 143 144 145 146 以此mRNA为模板,经翻译后生成多肽链含有的氨基酸残基数是:(北医2019)() A.140B.141 C.142D.143 E.146 答案:B 考点:密码子 解析:UAG、UAA、UGA为肽链合成的终止信号。 9.氯霉素的抗菌作用是由于抑制了细菌的(北医2019)() A.细胞色素氧化酶 B.嘌呤核苷酸代谢 C.二氢叶酸还原酶 D.核蛋白体上的转肽酶 E.基因表达 答案:D 考点:蛋白质合成的抑制剂 解析:氯霉素抑制细菌转肽酶活性,使肽链延伸受到影响,菌体蛋白质不能合成。1

6、0.与DNA修复有关的疾病是(北医2019)() A.卟啉症B.黄疸 C.着色性干皮病D.痛风症 E.黄嘌呤尿症 答案:C 考点:DNA损伤修复 解析:正常人的修复系统在皮肤受到紫外线伤害时可以对皮肤进行某种程度的修复,而着色性干皮病患者的修复系统却由于基因出现变异,紫外线对皮肤造成伤害,往往导致皮肤癌的发生。 11.分解代谢基因活化蛋白(CAP)对乳糖操纵子表达是(北医2019)() A.正性调控 B.负性调控 C.正,负性调控 D.无调控作用 E.可有可无 答案:A 考点:操纵子 解析:细菌内葡萄糖缺乏时,cAMP水平升高,cAMP-CAP复合物形成并与CAP结合位点结合,促进RNA聚合酶

7、与启动序列结合并启动转录。 12.DNA复制需要1DNA聚合酶;2解链蛋白;3DNA聚合酶I;4DNA指导的RNA聚合酶;5DNA连接酶,其作用顺序是(北医2019)() A.4.3.1 .2.5B.2.3.4.1.5 C. 4.2.1 .5.3D.4.2.1.3.5 E. 2.4.1 .3.5 答案:E 考点:参与DNA复制的酶类 解析:解链酶可以将DNA双链解开成为单链。引物酶催化合成引物。DNA pol 是复制延长中真正起催化作用的。DNA pol 切除引物。DNA连接酶用于连接双链中的单链缺口。 13.反转录过程中需要的酶是:(北医2019)() A.DNA指导的DNA聚合酶 B.核酸

8、酶 C.RNA指导的RNA聚合酶 D.DNA指导的RNA聚合酶 E.RNA指导的DNA聚合酶 答案:E 考点:DNA的反转录合成 解析:反转录酶属RNA指导的DNA聚合酶,具有三种酶活性,即RNA指导的DNA聚合酶,RNA酶,DNA指导的DNA聚合酶。 14.mRNA5端帽结构为(北医1996)() A. pppmGB.GpppG C.mGpppGD.GpppmG E.pppmGG 答案:C 考点:mRNA转录后加工 解析:mRNA5端修饰主要是指生成帽子结构,即把5-pppG转变为5-pmGpppG。 15.关于mRNA模板功能论述正确的是(北医1996)() A.除5帽外,其余mRNA序列

9、均可被转译 B.除3多聚A外,其余mRNA序列均可被转译 C.除5帽外,3多聚A外,其余mRNA序列均可被转译 D.除5帽外,3多聚A外,大部分mRNA序元旦均可被转译 E.以上论述都不对 答案:E 考点:mRNA转录后加工 解析:mRNA生成后要将内含子剪切掉,翻译起始点之前和终止点之后的区域也不翻译,即5和3末端非翻译区。 16.嘌呤酶素抑制蛋白质生物合成的机制是(北医1996)() A.抑制转肽酶活性 B.可与核蛋白体受位上的氨基酰-tRNA形成肽酰嘌呤酶素 C.抑制氨基酸tRNA合成酶的活性,阻止氨基酰tRNA的合成 D.结构与蛋氨酰tRNA相似,与蛋氨酸竞争结合mRNA E.进入核蛋

10、白体受位,并与给位上的肽酰-tRNA形成肽酰嘌呤酶素 答案:E 考点:蛋白质合成的抑制剂 解析:嘌呤霉素结构与氨酰-tRNA相似,从而取代一些氨酰-tRNA进入核糖体的A位,当延长中的肽转入此异常A位时,容易脱落,终止肽链合成。 17.关于E.coliRNA聚合酶的叙述不正确的是(北医1996)() A.核心酶由组成 B.全酶由核心酶及因子组成 C.亚单位的功能是结合DNA D.全酶对于转录起始、延长必需的 E.全酶功能可被一抗结核菌素抑制 答案:D 考点:RNA聚合酶 解析:转录延长只需核心酶即可,无需全酶。 二、多项选择题 1.真核细胞mRNA的转录后加工方式有(北医2000)() A.在

11、3端加多聚A尾巴 B.去除内含子,拼接外显子 C.合成5端的帽子结构 D.加接CCA的3末端 答案:A、B、C 考点:mRNA转录后加工 解析:mRNA转录后修饰包括首、尾修饰和剪接。tRNA的转录后修饰需要加上3端的CCA序列。 2.需要DNA连接酶参与的过程有(北医2000)() A.DNA复制B.DNA体外重组 C.DNA损伤的切除修复D.RNA逆转录 答案:A、B、C 考点:DNA复制、损伤修复和DNA重组 解析:DNA复制在连接岗崎片段时需要连接酶。DNA损伤修复通过连接酶将修复片段和正常片段连接。DNA重组中将外源基因和载体连接中需要连接酶。 3.蛋白质生物合成需要(北医2000)

12、() A.mRNAB.tRNA C.ATPD.GTP 答案:A、B、C、D 考点:蛋白质生物合成 解析:参与翻译过程的物质:需要20种氨基酸作为原料、三种RNA、蛋白质因子(起始因子IF、延长因子EF及释放因子RF)、酶和ATP、GTP等,共同协调完成蛋白质合成。 三、填空题 1.与一般DNA复制不同,PCR需要的DNA聚合酶具有()性质。(北医2019) 答案:耐热 考点:PCR的概念和原理 解析:PCR要经过变性、退火、延伸的往复循环,DNA聚合酶需要耐94度的高温变性步骤。 2.列举转录因子DNA结合区的两种基本形式:。(北医2019) 答案:锌指结构,碱性-亮氨酸拉链 考点:转录因子

13、解析:与DNA结合的功能域常见有:锌指结构、碱性-螺旋、螺旋-转角-螺旋、螺旋-环-螺旋、碱性-亮氨酸拉链。 3.端粒酶是一种由和组成的酶。(北医2019) 答案:逆转录酶,含重复序列的RNA模板 考点:端粒酶 解析:端粒酶是一种逆转录酶,由酶和含重复序列的RNA分子组成,它以自身的RNA分子为模板从随从链的3端合成端粒的重复序列,使随从链延长,以防止随从链在每次复制时被缩短。 4.除噬菌体,和也是分子克隆最常用的载体。(北医2019) 答案:质粒,病毒 考点:基因工程 解析:常用基因载体包括质粒、噬菌体、病毒等,另外还有可插入大片段外源基因的柯斯质粒载体、酵母人工染色体载体。 5.DNA合成

14、的方向是,多肽合成的方向是。(北医2019) 答案:5端3端,N端C端 考点:DNA合成、蛋白质合成 解析:DNA聚合酶只能催化核苷酸从53方向合成。mRNA密码阅读方向是从5到3,决定翻译的方向性。 6.举出一种常见的顺式作用元件:。(北医2019) 答案:TATA盒 考点:顺式作用元件 解析:例如,真核生物典型的启动子由TATA盒及其上游的GC盒和CAAT盒组成。 7.hnRNA分子形成成熟mRNA的剪接过程包括去除拼接。(北医2019) 答案:内含子,外显子 考点:转录后加工 解析:真核生物基因由内含子隔断编码序列的外显子。内含子一般也出现在转录初级产物hnRNA。剪接加工将切除内含子,

15、把外显子连结在一起。 8.在DNA合成过程中改变DNA分子超螺旋构型的酶是。(北医2019) 答案:拓扑异构酶 考点:DNA复制 解析:拓扑异构酶通过切断并连接DNA双链中的一股或双股,改变DNA分子拓扑构象,避免DNA分子打结、缠绕、连环,在复制的全程中都起作用。其种类有:拓扑异构酶和拓扑异构酶。 9.在原核细胞操纵子调控模式中,阻遏蛋白能与基因结合,RNA聚合酶与结合。(北医2019) 答案:操纵基因,启动基因 考点:原核生物基因表达调控,操纵子 解析:原核操纵子由操纵基因、启动基因和结构基因组成,阻遏蛋白与操纵基因结合,抑制RNA聚合酶与启动基因结合,从而封闭结构基因表达。 10.一种氨

16、基酸可能有个密码子,一个密码子可能代表种氨基酸。(北医2019) 答案:多个,一种或0种 考点:遗传密码的生物特性 解析:大部分氨基酸有多个密码子,以24个居多,可有6个。这种由多种密码编码一种氨基酸的现象称为简并性。AUG可代表起始密码和蛋氨酸,UAG、UAA、UGA为终止信号,其余61个密码子代表20种氨基酸。 11.蛋白质合成的调控,主要是在水平进行。(北医2019) 答案:转录水平 考点:基因表达调控 解析:基因表达可在DNA、染色质、转录、转录后加工、翻译和翻译后加工等水平上调节,但最主要的是转录水平的调节。 12.Cech意外地发现个别核糖酸具有酶的催化活性,叫做。(北医1996)

17、 答案:核酶 考点:核酶 解析:核酶是具有催化功能(酶的作用)的RNA分子。 13.重组DNA技术中常用的限制性核酸内切酶可识别某些特异碱基序列,如AAGCTT(Hind识别位点)等序列者具有结构。(北医1996) 答案:回文结构 考点:限制性内切酶 解析:类限制性内切酶识别DNA位点的核苷酸序列呈二元旋转对称,称为回文结构。 14.tRNA反密码的第一位碱基可出现(次黄嘌呤),它可与之间形成氢键而结合,这是最常见的摆动现象。(北医1996) 答案:U、C、A 考点:密码配对的摆动性 解析:mRNA密码第三位感基与tRNA反密码第一位碱基不严格遵守配对规则,称为密码配对的摆动性。常见有tRNA

18、反密码子与mRNA密码子U、C、A配对。 15.进行DNA碱基序列分析时(双脱氧法),人工合成引物与待测DNA的端互补,由引物按方向延长,形成互补链。(北医1996) 答案:3端,5端向3端 考点:DNA复制的方向性 解析:催化DNA合成的DNA聚合酶只能催化核苷酸从53方向合成。 16.真核基因总长往往与hnRNA一致或接近,但却比编码蛋白质mRNA的长数倍,这是因为真核生物基因往往是。(北医1996) 答案:断裂基因 考点:RNA转录后加工 解析:真核生物基因由内含子隔断编码序列的外显子,是断裂基因。 四、问答题 1.试述PCR的作用原理,并举出四种在实际工作中的应用。(北医2000) 答

19、案: PCR是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5末端和3末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链合成目的DNA的过程。 1.目的基因的克隆可以用特异引物、简并引物或随机引物从基因文库或cDNA文库中克隆基因以供研究。 2.基因突变研究可以通过设计引物引入突变,造成嵌合、缺失或点突变。 3.遗传病的诊断用胎儿羊膜细胞,羊水或甚至母血可以检查胎儿的遗传病,如地中海贫血、镰刀状细胞分血、凝血因子缺乏等。也用于检查有遗传倾向的疾病,如糖尿病、高脂症、肿瘤。 4.致病病原体的检测用PCR、RT-PCR或杂交方法来检测细菌、病毒、原虫及寄生虫、霉菌、

20、立克次氏体、衣原体和支原体等一切微生物的核酸。检测的灵敏度和特异性高,时间短,这对于难于培养的病毒(乙肝),细菌(如结核、厌氧菌)和原虫(如梅毒螺旋体)等来说尤为适用。 5.DNA指纹、个体识别、亲子关系鉴别及法医物证灵敏度已达到一根头发、一个细胞、一个精子取得个体特征图谱,这一领域也已发展到骨髓或脏器移植配型及动物种系的研究中。 6.高科技生物医学领域中的应用在转基因动植物中检查植入基因的存在。PCR技术尚可应用于基因拼接、测序等领域。 考点:PCR原理和应用 2.在生物界DNA合成的方式有几种?大肠杆菌及真核生物中有哪些DNA聚合酶及它们各有何功能?(北医2000) 答案: DNA合成有三

21、种方式:(1)DNA复制。细胞增殖时,DNA通过复制使遗传信息从亲代传递到子代。(2)修复合成。DNA受到损伤后进行修复,需要进行局部的DNA的合成,用以保证遗传信息的稳定遗传。(3)反转录合成。以RNA为模板,由逆转录酶催化合成DNA。原核生物的DNA聚合酶有DNA pol、DNA pol和DNA pol,DNA pol是复制延长中真正起催化作用的,除具有53聚合活性,还有35核酸外切酶活性和碱基选择功能,能够识别错配的碱基并切除,起即时校读的作用;DNA pol具有53聚合活性、35和53核酸外切酶活性,53核酸外切酶活性可用于切除引物以及突变片段,起切除、修复作用。另外,Klenow片断

22、是DNA pol体外经蛋白酶水解后产生的大片段,具有DNA聚合酶和35外切酶活性,是分子生物学的常用工具酶。DNA pol在无DNA pol和DNA pol时起作用,也具有53和35核酸外切酶活性。 真核细胞含有5种DNA聚合酶:、和。除了外,所有DNA聚合酶存在于核内。DNA聚合酶和在复制延长中起催化作用,DNA聚合酶延长随从链,DNA聚合酶延长领头链。DNA聚合酶和在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。DNA聚合酶在线粒体中,用于线粒体DNA的复制。真核细胞还有一种端粒酶,是一种逆转录酶,由酶和含重复序列的RNA分子组成,它以自身的RNA分子为模板从随从链的3端合成端区的DNA,使随从

23、链延长,以防止随从链在每次复制时被缩短。 考点:DNA的生物合成,DNA聚合酶 3.什么叫限制性内切核酸酶?任举一例说明其应用。(北医2000) 答案: 限制性内切核酸酶是能够识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。限制性内切核酸酶存在于细菌体内,与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系,限制外源DNA、保护自身DNA,对细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义。限制性内切核酸酶分为三类。重组DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为类酶,例如,EcoRI、BamH等就属于这类酶。类酶识别DNA位点的核苷酸序列呈二元旋转对称,即回文结构,切断的双链DNA都产生5磷酸基

24、和3羟基末端。 举例(举一例即可):可以识别DNA特定序列,切割DNA片段和载体,产生互补的粘性末端,用于定向克隆。通过单一或两种限制性内切核酸酶酶切插入了外源片段的载体,判断外源片段是正向插入还是反向插入。每种细菌和质粒都有特异的限制性内切核酸酶酶切图谱,可用于粗略判断细菌或质粒的种类。切割染色体DNA,用于构建基因文库。限制性片段长度多态性(RFLP)。检测DNA在限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小。因此凡是可以引起酶切位点变异的突变如点突变(新产生和去除酶切位点)和一段DNA的重新组织(如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化)等均可导致RFLP的产生。 考点:DNA重组的工具

25、酶,限制性内切核酸酶 4.简述PCR技术的基本原理及应用。(北医2019) 答案: 基本原理:聚合酶链反应是一种DNA的体外扩增技术。其基本原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链合成目的DNA的过程。反应体系的基本成分;模板DNA、特异性引物、耐热性DNA聚合酶、dNTP、含镁离子的反应缓冲液。基本反应步骤:变性:反应系统加热至 95 ,使模板DNA双链解离。退火:将温度下降至适宜位置,是引物与模板DNA退火结合;延伸:温度上升至 72 ,DNA聚合酶以dNTP为底物催化DNA的合成反应。 PCR的主要

26、用途:目的基因的克隆;基因的体外突变;DNA的微量分析。 考点:PCR概念原理和应用 5.写出几种DNA合成方式的名称及其生物学意义;E.coli经UV照射后其DNA可能发生哪些形式的损伤?可能通过哪些机制进行修复?(北医2019) 答案: DNA分子在生物体内的合成有三种方式:(1)DNA指导的DNA合成,也称复制,是细胞内DNA最主要的合成方式。遗传信息储存在DNA分子中,细胞增殖时,DNA通过复制使遗传信息从亲代传递到子代。(2)修复合成,即DNA受到损伤(突变)后进行修复,需要进行局部的DNA的合成,用以保证遗传信息的稳定遗传。(3)RNA指导的DNA合成,即反转录合成,是RNA病毒的

27、复制形式,以RNA为模板,由逆转录酶催化合成DNA。 E.coli经UV照射后,同一条DNA链上相邻的嘧啶以共价键连成二聚体,相邻的两个T、或两个C、或C与T间都可以环丁基环连成二聚体,其中最容易形成的是TT二聚体。紫外线照射还能引起DNA链断裂等损伤。 光修复。由光修复酶修复因紫外照射引起的嘧啶二聚体,使其还原。 切除修复。由UvrA、UvrB、UvrC、DNA pol 、dNTP、连接酶参与。首先UvrA、UvrB辨认损伤部位并与之结合,UvrC切除损伤的DNA,DNApol以dNTP为原料,填实切除空隙,最后由连接酶连接缺口,完成修复。 考点:DNA合成、损伤及修复 6.写出真核生物mR

28、NA的结构特点,简明叙述真核生物mRNA前体的加工过程。(北医2019) 答案: mRNA的结构特征:5端有帽,即5-pmGpppG;3端含多聚腺苷酸的尾;不含内含子;个别核苷酸有甲基化修饰。 5端加帽:5端加帽,即把5-pppG转变为5-pmGpppG。其过程需磷酸解、磷酸化和碱基的甲基化。 3端加尾:polyA聚合酶识别mRNA的游离3-OH端,并加上约200个A残基。 剪接:剪接加工能够切除内含子,把外显子连结在一起。剪接加工中,需要由多种snRNA与蛋白质共同组成的并接体,基本过程为二次转酯反应。 甲基化修饰:在mRNA中存在甲基化核苷酸,位于5端和非编码区。 mRNA编辑:插入、删除

29、、或取代某些核苷酸,使mRNA获得正确的翻译功能。 考点:RNA转录后加工 7.解释:ribozyme, molecular disease, cDNA, reverse transcriptase(北医2019) 答案: 核酶:具有催化功能(酶的作用)的RNA分子。核酶通常具有特殊的分子结构,如锤头结构。 分子病:如果DNA分子的碱基发生变化,由它编码的蛋白质结构或量就发生相应的改变,从而引起机体功能障碍的一类疾病称为分子病。例如运输性蛋白病、凝血及抗凝血因子缺乏症、免疫蛋白缺陷病、膜蛋白病、受体蛋白病等。 cDNA:是指以mRNA或病毒RNA为模板,经反转录酶催化合成互补单链DNA,再聚合

30、生成的双链DNA。 反转录酶:属RNA指导的DNA聚合酶,具有三种酶活性,RNA指导的DNA聚合酶:RNA酶;DNA指导的DNA聚合酶。即以RNA为模板,在反转录酶的催化下,合成与RNA互补的DNA单链,形成杂化双链,反转录酶将其中RNA链水解,在以互补的DNA链为模板,合成双链DNA。 考点:核酶,分子病,cDNA,反转录酶 8.原核生物蛋白质合成起始复合物由哪些成分组成?图示该复合物的形成过程。(北医2019) 答案: 原核生物蛋白质合成起始复合物由甲酰蛋氨酰-tRNA(fMet-tRNAfMet)、mRNA和核蛋白体大小亚基组成。步骤如下: 核蛋白体大、小亚基分离。 30S亚基在IF3和

31、IF1的促进下与mRNA的启动部位结合,在IF2的促进与IF1的辅助下与fMet-tRNAfMet以及GTP结合,形成30S起动复合物。30S起动复合物由30S亚基、fMet-tRNAfMet、mRNA和IF1、IF2、IF3、GTP组成。 30S起动复合物形成后,IF3即行脱落,50S亚基与30S起动复合物结合,形成70S起动前复合物。70S起动前复合物由核蛋白体大小亚基、fMet-tRNAfMet、mRNA和IF1、IF2、GTP组成。 70S起动前复合物中的GTP水解释放出GDP和磷酸,IF1、IF2随之脱落,形成起动复合物。完成蛋白质合成的起动步骤。 考点:蛋白质生物合成 9.何谓不稳定碱基对?不稳定碱基对应于反密码子与密码子的哪个碱基配对?(北医2019) 写出E.coli DN

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