医疗器械产品辐照灭菌剂量验证方案与报告.docx

1、医疗器械产品辐照灭菌剂量验证方案与报告XXXXX公司建立医用产品灭菌剂量验证报告送检单位:公司期:序言试验前准备工作方法实施内容结果结论附注参考资料 初始污染菌检测规范确定灭菌剂量 无菌检査序言本实验是对医用产品公司的一次性医疗用品进行了辐射灭菌剂量设定和验证。 实验原理是基于IS011137-2： 2006的方法，即先对辐照前产品的初始污染菌进行 测定，然后选择验证剂量。再用验证剂量对产品进行辐照，并测定辐照后存活微生 物的样品件数，以此来确定所确定的验证剂量能够满足10-6的灭菌保证水平。本 实验从年 月 日开始至年 月 日结束。试验前准备工作一、样品灭菌平皿（9cm）1样品：医用产品，三

2、个批号: 生产企业： 公司。2器具及试剂2. 1器材 试管容量瓶三角烧瓶酒精灯灭菌剪刀、铁子紫外可见分光光度计酸度计生化培养箱立式圧力蒸汽灭菌器恒温培养箱电热恒温干燥箱电热鼓风干燥箱电热恒温水浴锅2.2培养基及试剂：R流体硫乙醇酸盐培养基b） 改良马丁培养基c） 营养琼脂培养基2. 3稀释液、冲洗液及其制备方法R质量浓度为9g/L的无菌氯化钠溶液b） 0. 1%蛋白豚水溶液 取蛋白J冻l.Og,加水1000ml,微温溶解，滤清，调节pH 值至7. 10.2,分装，灭菌。c） pH7.0氯化钠-蛋白腺缓冲液 取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30,蛋白丿冻l.Og,加水10

3、00ml,微温溶解，滤清，分装，灭菌。二、实验前准备2. 1培养基要求：用于培养需（厌）气菌和真菌的培养基的制备、培养基灵敬度检查及其他各项 要求应符合中国药典（二部）附录中无菌检查法的规定。培养基使用按中国药典方生产的符合规定的脱水培养基。制备后采用验证合格 的灭菌程序灭菌。制备好的培养基保存在225C、避光的环境。2.2器具灭菌：与供试液接触的所有器具应采用可靠方法灭菌，置压力蒸气灭菌器 内121C30min,或置电热干燥箱内160C2h。2. 3无菌室要求：无菌室操作台局部符合洁净度100级单向流空气区域要求。无菌 室在消毒处理完毕后，检查空气中的菌落数，方法如下：取直径约90mm培养皿

4、数 支，无菌操作注入融化的营养琼脂培养基约20mL,在30C35C培养48h证明无 菌后，取3只培养皿在无菌室操作台或超净工作台平均位置打开上盖，暴露30min 后盖好，置30C35C培养48h后取出检查，3只培养皿上生长的菌落数平均不得 超过1个。无菌试验过程中检查空气中的菌落数，方法同上。在试验开始进行时打开平皿 盖，至试验结束盖好照上法培养，符合上述要求。2. 4阳性对照：选择金黃色葡萄球菌为对照菌，接种金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养琼脂 培养基中，2328C培养2448小时，将上述培养物用0. 9%无菌氯化钠溶液制成每lml含菌数小于lOOcfu的菌悬液。阳性对照试验的菌液制备方法验

5、证试验，加 菌量小于lOOcfu,供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。阳性 对照管培养4872小时应生长良好。2. 5阴性对照：取相同稀释液、冲洗液同上法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。方法客户提供生产的医用产品，每件医用产品均是一个独立的单元产品，其样品 份额为1。具体步骤如下：1.随机抽取连续三批常规生产的产品，每批10件，共30件做生物负载检测。另 从其中一批随机取5件样品，做回收率实验。2.当每个批平均生物负载都不超过三批总平均生物负载的2倍时，根据三批的总 平均负载的检测结果，选择灭菌保证水平为10-2的灭菌剂量作为验证剂量。3.对以上三批抽样产品连续生产的1

6、10件产品实施验证剂量，实际吸收剂量应在 验证剂量的3%之内。4.对用验证剂量辐照过的100件产品做无菌实验，其余的10件产品做无菌试验的 验证实验。5.根据无菌实验的结果，确定验证剂量是否被接受，即确定的验证剂量是否能够 满足10-6的灭菌保证水平。实施内容一、 回收率测定取5ml洗脱液洗脱5支产品，分别洗脱四次，然后将样品用营养琼脂做琼脂覆 盖，于37C培养箱中，培养482h,记录结果并得出修正系数。二、 初始污染菌测定将随机抽取的30件样品中生物负载进行评佔，编号后，分别用5ml洗脱液洗 脱，吸取lml置于9ml稀释液中，振摇均匀后分别取lml样品液于两个平皿中，记 录编号为101, 1

7、02,代表五十倍样，取lml置于9ml稀释液，振摇均匀后分别取 lml样品液于两个平皿中，记录编号为1001, 1002,代表五百倍样。依次取第二件 样品，至30件样品。倾注营养琼脂，于37C培养箱中，培养482h,记录结果。三、确定验证剂量ISO 11137： 2006医疗器械灭菌的有效性确认和常规控制的要求中规定，若批 次平均生物负载的每一个生物负载数值总的平均生物负载*2,则用总的平均生物 负载，若一批或更多批次的平均生物负载$总的平均生物负载*2,则用最高批次。 本次试验釆用总平均初始污染菌120 (cfu/SIP)确定验证剂量。查IS011137：2006表格得出对应的验证剂量为8.

8、 2kGy,该试验剂量下的无菌保证水平SAL为 10-2。四、 验证剂量辐照结果从产品的单个批次中选出110个单元产品的样本，暴露在XXXXX公司的电子加 速器传送带上辐照，使辐射剂量落在8.25% kGy范围内。辐照后进行无菌试 验。五、 无菌试验5. 1供试液制备及接种取样品按容器内表面积每10cm2加入浸提介质1ID1的比例，振摇数次。收集上 述冲洗液或浸提介质于无菌容器中。5. 2无菌检验培养温度硫乙醇酸盐流体培养基，置3035C培养。改良马丁培养基，置2328C培养。5. 3接种采用直接接种法每管培养基的最低用量一一硫乙醇酸盐流体培养基每管装量不少于15ml,改 良马丁培养基每管装量

9、不少于10 mlo5. 4培养、观察上述含培养基的容器分别置规定温度的恒温培养箱中，除阳性对照管和阴性对 照管培养4872小时外，其余管培养14天。培养期间应逐日观察并记录是否有菌 生长。结果对三批医用产品进行初始污染菌测试后，修正系数为1.08,结果如下：批号 初始污染菌平均数（cfu/件）总平均数因此，根据IS011137-2： 2006建立灭菌剂量的规定，选用总平均生物负载为 120 （cfu/件）来确定验证剂量。根据以上数据查表得验证剂量为 kGy,对以上 批次110件，实测剂量为 kGy （见辐照证明书）。经观察，100件样品经验证剂量辐照后的无菌 检查阳性数为零。结论依据ISO 1

10、1137 : 2006规定，当SAL二10-6时，医用产品的灭菌剂量 为 kGyo在随后的常规辐照灭菌过程中，应通过剂量计监测，证明每一个产品的 最小吸收剂量能够达到 kGy的灭菌剂量，使灭菌保证水平为10-6SALo依据ISO 11137 : 2006标准，为了确保作为10-6SAL的灭菌剂量持续有效，必须按照规定 的周期进行验证剂量审核，通常每三个月进行一次。附注1、 试验样品不可替代批量产品。2、 当批量产品辐照时的剂量确定，必须随机抽取该批量部分产品作初始污 染菌验证。参考资料1、IS011137-1： 2006医疗保健产品的灭菌-一一-辐照-一一第一部分：医疗器械灭菌过程的发展、确认

11、和常规控制要求2、IS011137-2： 2006医疗保健产品的灭菌-一辐照一-一第二部分：建立灭菌剂量3、IS011137-3： 2006医疗保健产品的灭菌-一一-辐照-一一-第三部分：剂量指南4、 IS011737-1： 1995医用器材灭菌微生物学方法第1部分:产品上微生物总数量的测定5、 IS011737-2： 1998医用器材灭菌 微生物学方法 第2部分:灭菌过程确认中的无菌试验初始污染菌检测规范试验方法：1、 初始污染菌检测按IS011737-2006医疗器械的灭菌-微生物方法笫一部分产品上 微生物总数的测定-MRC初始污染菌的测定2、 菌落总数回收率的测定方法同（一）回收率测定结

12、果样品名称： 医用产品生产企业： 型号规生产批号： 格： 样品数量：样本号洗脱次数每次洗脱的细菌数（cfu/SIP）平均菌落数123451234琼脂覆盖全部菌落数回收率平均回收率修正系数初始污染菌检测生产批号： 型号规格： 样品数量： 样本号批号样本号批号样本号批号需氧菌(cfu/SIP)需氧菌(cfu/SIP)需氧菌(cfu/SIP)111212122231323414245152561626717278182891929102030SIP平均初始污染菌SIP平均初始污染菌SIP平均初始污染菌校正后批平 均初始污染菌(*1.08)校正后批 平均初始 污染菌 (*1.08)校正后批 平均初始

13、污染菌 (*1.08)校正后平均初始污染菌确定灭菌剂量每批产品初始污染菌如下：批号平均初始污染菌数(cfu/件)总平均数剂量确定:按照IS011137-2： 2006中关于建立灭菌剂量验证方式1查得120cfu/件的验证剂量为 kGy。再按要求对20090529A03批次110件医用产品采用 kGy的验证剂量进行辐照处理，经无菌检查，阳性数为零。这表明， kGy能够满足 医用产品10-6的灭菌保证水平。无菌检查试验方法：1、 样品接种均应按无菌操作法进行；2、 无菌打开包装用灭菌剪刀、镶子，将产品转移至胰酪腺大豆肉汤中；3、 将置有样品的培养基放30+0. 5C的培养箱中的培养14天； 观察有无细菌生长；结果：无菌试验的验证试验检验结果生产批号试验样品数量培养基温度（C）培养天数阳性数阴性数110胰胳蛋白陈大豆肉汤300. 521010结论：经测试，所有验证试验的结果均为阳性，表明样品中无抑制细菌生长的释出 物，说明无菌试验的结果有效。无菌试验检验结果生产批号试验样品数量培养基温度（C）培养天数阳性数1100硫乙醇酸盐流体培养基300. 5140改良马丁培养基230. 5140结论：经测试，无菌试验结果中，阳性数为0,证明验证剂量被接受，进而说明 以 KGy的剂量辐照产品能满足10-6的灭菌保证水平。实验者： 日期： 审核者： 日期：