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分子生物学试题库.docx

1、分子生物学试题库第2章 染色体与DNA名词解释原癌基因:细胞内与细胞增殖相关的正常基因, 是维持机体正常生命活动所必须的, 在进化上高等保守。 当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。复制:以亲代DNA或 RNA为模板,根据碱基配对的原则, 在一系列酶的作用下,生成与亲代相同的子代DNA或 RNA的过程。转座子(transposon 或transposable element) :位于染色体 DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。半保留复制:以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代 DNA这样新形成的子代 DNA中,

2、一条链来自亲代 DNA而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制。染色体: 染色体是遗传信息的载体,由 DNA RNA和蛋白质构成,其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中,以染色质形式存在。在细胞分裂时,染色质丝经过螺旋化、折叠、 包装成为染色体,为显微镜下可见的具不同形状的小体。核小体:是构成真核生物染色体的基本单位,是 DNA和蛋白质构成的紧密结构形式,包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。填空题1. 真核细胞核小体的组成是 DNA和 蛋白2. 天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接, 这是因为天然染色体末端存在端_结构。3. 在聚合酶链反应中,除了需

3、要模板 DNA外,还需加入引物、 DNA聚合酶、dNTP和镁离子。4. 引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。5. DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶H、 解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。6. 参与DNA切除修复的酶有 DNA聚合酶I、 DNA连接酶、特异的核酸内切酶。7. 在真核生物中 DNAM制的主要酶是 DNA聚合酶3。在原核生物中是 DNA聚合酶川。8. 端粒酶是端粒酶是含一段 RNA勺逆转录酶。9. DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、 DNA的直接修复。选择题1. 真核生物复制起点的特征包括(B)A. 富含G-C区 B. 富含A-

4、T区 C. Z-DNA D. 无明显特征2. 插入序列(IS )编码(A)A.转座酶B.逆转录酶C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶3. 紫外线照射对 DNA分子的损伤主要是(D)A.碱基替换 B.磷酸脂键断裂 C。碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体4. 自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物 DNA的复制方式(C)A.环式B.D环式C.半保留 D.全保留5. 原核生物基因组中没有(A)A.内含子 B.外显子C.转录因子D.插入序列6. 关于组蛋白下列说法正确的是 (D)A.为中性蛋白 B.为酸性蛋白C.进化上不具保守性 D.染色体结合蛋白7. DNA聚合酶1( C)A.是复制酶,但不是修复

5、酶 B.没有模板依赖性 C.有5宀3外切酶活性D. 5 t 3聚合酶活性极强简述DNA复制的过程DNA的复制过程可被分为 3个阶段,即复制的起始、延伸和终止。每个 DNA复制的独立单元主要包括复制起始位点和终止位点。DNA复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段, DNA解旋解链,形成复制叉,引发体组装;在引发阶段,在引发酶的催化下以 DNA链为模板合成一段短的 RNA引物。复制时DNA链的延伸由DNA聚合酶催化,以亲代 DNA链为模板,弓I发体移动,从 5 t 3 方向聚合子代 DNA链。当子链延伸到达终止位点是, DNAM制就终止了,切除 RNA引物,填补缺口,在DNA连接酶的催化

6、下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的 DNA长链。试述真原核生物的 DNA复制的特点的不同之处1 真核生物染色体有多个复制起点, 多复制眼,呈双向复制, 多复制子。原核生物的染色体只有一个复制起点,单复制子也呈双向复制。2 真核生物冈崎片段长约 200bp比原核生物略短。真核生物DNAM制速度比原核慢,速 度为10003000bp/min(仅为原核生物的 1/201/50 )。3 真核生物复制的终止在端粒处,原核生物的复制叉相遇时即终止。4 真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制; 而在快速生长的原核生物染色体DNAM制中,起点可以连续发动复制。 真核生物快速生长时, 往往采用更多

7、的复制起 点。5 真核生物有多种 DNA聚合酶,DNA聚合酶3是真正的复制酶,在 PCNA存在下有持续的合成能力。PCNA称为增殖细胞核抗原,相当于大肠杆菌 DNA聚合酶川的B -夹子,RFC蛋白相当于夹子装配器。原核生物的DNA聚合酶有三种 DNA聚合酶川DNA的真正复制酶:多亚基酶,含十种亚基, 该酶DNA合成的持续能力强。6 真核生物线性染色体两端有端粒结构, 它是由许多成串的重短复序列组成, 端粒功能是稳定染色体末段结构,防止染色体间的末端连接,并可补偿滞后链 5-末段在消除 RNA引物后造成的空缺,使染色体保持一定长度。端粒酶是含一段 RNA的逆转录酶。7 RPA真核生物的单链结合蛋

8、白; RNaseHI和MF-1切除RNA引物,DNA聚合酶&填补缺口。简述半保留复制的生物学意义DNA的复制过程(以大肠杆菌为例)复制起始:(1 )、拓扑异构酶解开超螺旋。(2) 、Dna A蛋白识别并在 ATP存在下结合于四个 9bp的重复序列。(3) 、在类组蛋白(HU ATP参与下,Dan A蛋白变性13个bp的重复序列,形成开链复合物。(4) 、Dna B借助于水解ATP产生的能量在 Dna C的帮助下沿5 t3方向移动,解开 DNA双链,形成前引发复合物。(5) 、单链结合蛋白结合于单链。(6) 、引物合成酶(Dna G蛋白)开始合成 RNA引物。链的延长(冈崎片段的合成):在DNA

9、聚合酶山的催化下,以四种 5-脱氧核苷三磷酸为底物,在 RNA引物的3端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。 DNA链的延伸同时进行前导链和滞后链的合成。两条链方向相反。6、PCR的基本原理?PCR是在试管中进行的 DNA复制反应,基本原理是依据细胞内 DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质, 人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链 DNA变成单链,单链 DNA与人工合成的引物退火,然后耐热 DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链 DNA PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行 DNA模板解链、

10、引物与模板 DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA 的合成,即高温变性、低温退火、中温延伸3个步骤构成 PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的 DNA得以迅速扩增。DNA模板变性:模板双链 DNA单链DNA 94C。退 火:引物+单链 DNA杂交链,引物的 Tm值。引物的延伸:温度至 70 C左右,Taq DNA聚 合酶以4种dNTP为原料,以目的 DNA为模板,催化以引物3末端为起点的 5宀3 DNA链延伸反应,形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的 模板PCR就是如此反复循环,使目的 DNA得到高效快速扩增。第三章启动子:是一段位于结构基因 5,

11、端上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA 准确地相结合并具有转录起始的特异性。 指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段特定的DNA序列。增强子:能强化转录起始的序列称为增强子。转录:以DNA为模板,按照碱基配对原则合成 RNA即将DNA所含的遗传信息传给 RNA形成一条与DNA链互补的RNA的过程。RNA的编辑:是某些RNA特别是mRNA勺一种加工方式,它导致了 DNA所编码的遗传信息的 改变。外显子(Exon):真核细胞基因DNA中的编码序 列,这些序列被转录成 RNA并进而翻译为蛋 白质。内含子(Intron):真核细胞基因 DNA中的间插序列,这些序列被转录成 RNA

12、但随即被剪除而不翻译。复制子:生物体的复制单位称为复制子( replico n),是在同一个复制起点控制下的一段DNA序列。转录单元:是一段启动子开始至终止子结束的 DNA序列。转录起点:是与新生RNA链的第一个核苷酸相对应的 DNA链上的碱基,通常为一个嘌呤。转录开始时模板上的第一个碱基,在原核中常为 A或G而且位置固定。填空1转录的基本过程包括:模 2基因表达包括:转录和翻两个阶段。3RNA的编辑方式:碱基突变,尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中,-35区与-10区之间的距离大约是 1619bp5帽子结构的功能:1在翻译中起识别作用2使mRNA免遭核苷酸的破坏6原核生物只有一种 RNA聚合

13、酶而真核生物有三种,每一种都有其特定的功能。聚合酶I合 成rRNA,聚合酶H合成 mRNA聚合酶川合成 tRNA和5s rRNA。三种聚合酶都是具有多亚基 的大的蛋白复合体。7转录因子通常具有两个独立的结构域:一个结合 DNA 一个激活转录。“尾”由多聚腺嘌呤组成。-10bp处的 区和-35bp处能与b因子相互识别而具高度亲和8在真核细胞mRNA勺修饰中,“帽子”结构由甲基组成, 9原核生物的绝大部分起启动子都存在共同的序列,即位于 的 区,他们都是RNA聚合酶与启动子结合的位点,性。真核生物中,在转录起始位点上游 -25 -35bp处有 区和位于-70-80bp 处的 区。选择题1 3因子的

14、结合依靠(A)A对启动子共有序列的长度和间隔的识别B与核心酶的相互作用C翻译起始密码子的距离D转录单位的长度2下列哪一项是对三元转录复合物的正确描述( C)A3因子、核心酶和双链 DNA在启动子形成的复合物B全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物C全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物D三个全酶在转录起始位点形成的复合物3 3因子和DNA之间相互的最佳描述是(C)A游离和与DNA结合的3因子的数量是一样的,而且3因子合成的越多,转录起始的机会越大B3因子通常与 DNA结合,且沿着 DNA搜寻,直到在启动子碰到核心酶,他与 DNA的结合不需要依靠核心酶C3因子通常与 DNA吉合,且沿着 DN

15、A搜寻,直到碰到启动子,再有核心酶存在时与之结合D3因子加入三元复合物而启动 RNA合成4 3因子专一性表现在(B)A3因子修饰酶催化3因子变构,使其成为可识别应激启动子的3因子B不同基因编码识别不同启动子的3因子C不同细菌产生可互换的3因子D3因子参与起始依靠特定的核心酶5在大肠杆菌的热激反应中,某些蛋白质表达的开启和关闭的机制是( C)A温度升高使特定阻抑蛋白失活B编码热敏感蛋白的基因的启动子区域在较高温度下发生变形C在高温时合成新的3因子,调节热激基因的表达D高温时,已存在的聚合酶3因子与启动子的结合能力强6真核生物中rRNA包括(D)A 28s,23s,5s rRNA B 23s,16

16、s,5s rRNAC 23s,16s,5.8s rRNA D 28s,23s,5.8s,5s rRNA7内含子的剪切位点具有的特征( A)A 5,一GU 3,一AG B 5 ,一AQ 3, GUC 5,一GA 3,一UG D 5 ,一UQ 3, GA8部分原核基因的转录终止子在终止位点前均有( A)A回文序列B多聚T序列C TATA序列D多聚A序列9 mRNA5端帽子结构为(C)A pppmG B GpppG C m 7GpppG D GpppmG简答题1增强子的特点1有远距离效应2无方向性3顺势调节4无物种和基因的特异性5具有组织的特异性6有相位性,其作用与 DNA的构象有关7有的增强子可以

17、对外部信号产生反应。2比较DNA复制和转录的异同点相同点:都以DNA链作为模板,合成方向均为5,端到3,端,聚合反应均遵循碱基配对原则, 通过核苷酸之间形成的 3, 5,磷酸二酯键使核苷酸键延长。不同点:复制转录模板两条链均被复制模板链转录(不对称转录)原料Dn tpNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶产物子代双链DNA(半保留复制)mRNA tRNA rRNA配对方式A-T G-CA-U A-T G-C引物RNA引物不需要引物DNA复制与转录的异同相同点:都需要模板都以三磷酸核苷酸为底物(NTP或dNTP)合成方向都是5宀3不同点转录不需引物;只转录DNA分子中的一个片段(称为转录单位或操纵子

18、,operon); 双链DNA中只有一条链具有转录活性(称为模板链) 哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。 RNA聚合酶无校对功能。原核生物与真核生物 mRNA勺比较(1 )、原核生物 mRNA勺半衰期短;(2) 、许多原核生物 mRNAA多顺反子形式存在;(3) 、原核生物5端无帽子结构,3 或只有短的poly(A)。(4) 、真核生物mRNA5端有帽子结构,(5) 、绝大多数真核生物 mRNA3具有poly(A)尾巴,是转录后加上的,是 mRNA从核到质转移所必需的形式,提高 mRNA勺稳定性。大肠杆菌的转录过程:(1 )、识别阶段:RNA聚合酶在b亚基的引导下结合于启动子上;

19、(2 )、DNA双链局部解开;(3 )、起始阶段:在模板链上通过碱基配对合成最初 RNA链;(4) 、延伸阶段:核心酶向前移动, RNA链不断生长;(5) 、终止阶段:RNA聚合酶到达终止子;(6 )、RNA和RNA聚合酶从 DNA上脱落。论述题1真核生物转录的前体 hn RNA如何加工为成熟的 mRNA真核生物mRNA的结构组成:5,端存在帽子结构,3,端通常具有poly(A)尾巴,无内含子,部分碱基发生甲基化。1 5,端加帽:当RNA聚合酶H聚合的转录产物达到 25碱基长时,在其 5,端加上一个以5,t3,方向相连的7甲基鸟苷帽,防止5,核苷酸外切酶的攻击,有利于剪接、转运和翻译的 进行;

20、3,端加尾:很多真核生物的hnRNA的3,端经过剪切后再加上多聚 A残基即poly(A) 尾巴,这有助于整个分子的稳定;剪接:在真核生物的 mRNA加工过程中,内含子序列被切除,两侧的外显子片段连接。剪接反应在核内进行,需要内含子有 5 GU AU 3以及一段分支点序列。其过程是:内含子先以一个具尾的环状分子或套索状分子形式被删除, 然后被降解,剪接包括snRNP与保守序列结合,形成剪接体,在其内发生剪接与连接反应; 编辑;甲基化修饰:当序列为 5 RRAC 3,时会在第6位N原子位置发生甲基化。2概括细菌细胞的转录过程转录是通过RNA聚合酶的作用,以一条 DNA链为模板产生一条单链 RNA过

21、程。步骤如下: 与RNA聚合酶全酶的结合:一个RNA聚合酶全酶分子与待转录的 DNA编码序列上游的启动 子序列松弛的结合。起始:RNA聚合酶往下游移动了几个核苷酸到达启动子的另一段短序列一 Pribnow框,紧密地与DNA结合。DNA上的启动子区域解链, RNA便从Pribnow框下游的几个核苷酸处开始合成,通常是DNA的反义链作为模板,合成几个核苷酸后,3因子被释放并循环使用, 以下 步骤不再需要3因子。延伸:RNA聚合酶核心酶沿着 DNA模板移动,使 DNA解链,与DNA模板的下一碱基互补核 苷三磷酸聚合到链上。 RNA聚合酶继续在 DNA上移动,RNA链从模板链被释放出来, DNA双螺旋

22、重新形成。当所有编码序列被转录后, RNA聚合酶移动一个终止序列,即终止子。转录复合体解体,RNA聚合酶和新形成的 RNA从 DNA模板上脱落下来。3、复杂转录单位的原始转录产物的加工方式有几种?分别是什么?(1 )剪、利用多个5 端转录起始为点或接位点产生不同的蛋白质。(2) 、利用多个加poly (A)位点和不同的剪接方式产生不同的蛋白质。(3) 、虽无剪接,但有多个转录起始位点或加 poly (A)位点的基因。 第四章 SD序列:在原核生物 mRNA起始密码AUG上游,存在49个富含嘌呤碱的一致性序列,如 -AGGAGG-称为S-D序列。位于原核生物起始密码子上游 7-12个核苷酸处的保

23、守区,该序列与16SrRNA3端反向互补。又称为核蛋白体结合位点( ribosomal binding site , RBS) 正转录调控:负转录调控:填空题1. tRNA的种类有:起始 tRNA和延伸tRNA,同工tRNA,校正tRNA。2. tRNA的二级结构为三叶草型,三级结构为倒_L型。tRNA结构3. 原核生物蛋白质合成的起始 tRNA是甲酰甲硫氨酰一tRNA( fMet-tRNA ),它携带的氨基酸是甲酰甲硫氨酸(fMet),而真核生物蛋白质合成的起始 tRNA是甲硫氨酰一tRNA( Met-tRNA3. 它携带的氨基酸是甲硫氨酸( Met)。4. 新生肽链每增加一个氨基酸单位都要

24、经过 AA-tRNA与核糖体的结合,肽键形成,移位三 步反应。5. 核糖体的作用位点有: A位点、P位点、E位点。5. 在真核生物中蛋白质合成起始时先形成起始因子和起始 tRNA复合物,再和40S亚基形成 40S起始复合物。6. 氨酰tRNA合成酶既能识别氨基酸,又能识别相应的 tRNA。7多肽合成的起始密码子是 AUG而UAA UAG UGA是终止密码子。8遗传密码的特点包括连续性,简并性,摆动性,普遍性与特殊性。 9. 核酸复制时,DNA聚合酶沿模板链3宀5方向移动;转录时,RNA聚合酶沿模板链3 t5方向移动;翻译时,核糖体沿模板链 5宀3 方向移动。10. 原核生物蛋白质合成形成起始复

25、合物时,其 mRNAfc与核糖体的30S亚基结合,然后再 与结合起始因子和 GTP的甲酰甲硫氨酰一tRNA结合,形成30S起始复合物,然后再与 50S 形成70S起始复合物。选择题1在蛋白质合成中催化肽键合成的是( D)A. 延长因子 EF-Ts B. 延长因子EF-Tu C.启动因子IF3 D.转肽酶2 翻译后加工过程的产物是(B)A. 条多肽链 B. 一条多肽链或一条以上的多肽链C.多条多肽链 D. 多肽链的降解产物3. 已知某蛋白质多肽链编码序列为 GGA则其mRNA专录本(A)A. 以5 GGA3为模板,沿转录本 5 3 方向延长B. 以5 GGA- 3为模板,沿转录本 3宀5 方向延

26、长C. 以3 GGA5为模板,沿转录本 5 3 方向延长D. 以3 GGA5为模板,沿转录本 3宀5 方向延长4. 细菌核糖体RNA中大亚基由以下物质组成(C)A. 5S rRNA , 18S rRNA, 5.8S rRNA 和 49 种蛋白质B. 5S rRNA , 28S rRNA, 5.8S rRNA 和 49 种蛋白质C. 5S rRNA , 23S rRNA 和 34 种蛋白质 D. 5S rRNA , 16S rRNA 和 34 种蛋白质5. 肽链生物合成时信号肽序列(B)A.决定糖类残基的附着点 B.将新生肽链导入内质网C.控制蛋白质分子的最终构象 D. 具有疏水性6. 真核生物

27、的翻译起始复合物在何处形成( B)A.起始密码子AUG处 B. 5 端的帽子结构C. TATA框 D.CAAT 框7. 蛋白质生物合成的终止信号由( D)A. tRNA识别 B.EF 识别 C.IF (或elF )识别 D.RF 识别8. 能编码多肽链的最小 DNA单位是(A)A.顺反子 B.操纵子C .启动子 D.复制子9. 参与原核生物肽链延长的因子是(C)A. IF1 B. IF2 C.EF-Tu D.RF110. 参与真核生物肽链延长的因子是( D)A. eRF B. eIF1 C.EF-Tu D.eEF1 a简答题:1. 简述核糖体的结构及功能特点:答:核糖体的结构:真核生物:由60

28、S大亚基和40S小亚基组成的80S的核糖体;原核 生物:由50S大亚基和30S小亚基组成的70S的核糖体功能特点:合成蛋白质 。在单个核糖体上,包括至少 5个功能活性中心,在蛋白质合成过程中,各有专一的识别作用和功能:mRNA勺结合部位一一小亚基,结合或接受AA-tRNA 的部位 大亚基 A位,结合或接受肽基 tRNA部位 大亚基,肽基转移部位 大亚基P位,形成肽键部位(转肽酶中心) 大亚基 E位。2. 简述氨基酸的活化过程答:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量,才能参与蛋白质的合成,活化反应由氨酰tRNA合成酶催化。活化分两步:活化: aa + ATP+ E宀氨基酰-AMP释放出PPi2 转

29、移:氨基酰-AMP转移到tRNA 并释放出AMP。3、论述蛋白质的翻译过程。答:蛋白质的翻译即合成过程可分为四个阶段:氨基酸的活化、肽链合成的起始、 延伸和终止。1 氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量,才能参与蛋白质的合成,活化反应由氨酰tRNA合成酶催化,最终氨基酸连接在 tRNA的3端合成氨酰-tRNA。2 肽链合成的起始:核蛋白体大小亚基分离 ,mRNAfe小亚基上定位结合,起始氨基酰tRNA与小亚基结合,核蛋白体大亚基结合。3 肽链的延伸:肽链的延长是在核蛋白体上连续性循环式进行,每次循环增加一个氨基酸,分为以下三步:(一)进位:根据mRNAF组遗传密码指导,使相应氨基酰

30、 -tRNA进入核蛋白体A位。(二)成肽:肽酰转移酶将相邻的两个氨基酸相连形成肽键, 该过程不需要能量的输入;(三)转位:移位酶利用 GTP水解释放的能量使核糖体沿 mRNA移动一个密码子,释放 出空载的tRNA并将新生肽链运至 P位点。3 肽链合成的的终止与释放:释放因子识别并与终止密码子结合,水解 P位上多肽链与tRNA之间的二脂键,接着,新生肽链和 tRNA从核糖体上释放,核糖体大、小亚基解体,蛋白质合成结束。4、 原核生物翻译的起始过程(1) 核糖体大小亚基分离(2) 30s小亚基通过SD序列与mRNA莫板相结合(3) 在IF-2和GTP的帮助下fMet-tRNAfMet进入小亚基的 P位,tRNA的反密码子与 mRNA 上密码子配对。(4) 带有tRNA、mRNA和三个翻译起始因子的小亚基起始复合物与 50s的大亚基结合,GTP 水解释放翻译起始因子。5、 以大肠杆菌为例简述蛋白质合成的过程从以下四个方面详细论述(1 )氨基酸的活化:(2) 肽链合成的起始:(3) 肽链的延生:(4) 肽链合成的终止:乳糖操纵子模型内容(1) Z、Y A基因产物由同一条多顺反子 mRNA分子所编码。(2) 乳糖操纵子 mRNA分子的启动区(P)位于阻遏基因(I )与操纵区(O)之间

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