药物分析核心考点概述.docx

1、药物分析核心考点概述药物:用于预防、治疗、诊断人的疾病,有目的的调节人的生理机能并规定有适应症或功能主治、用法和用量的物质.药品:由药物经一定处方和工艺制备而成的制剂产品,是可供临床使用的商品.药物分析:利用分析测定手段,发展药物的分析方法,研究药物的质量规律,对药物进行全面检验和控制的科学. 药品标准:系根据药物自身的理化性质与生物学特性,按照批准的来源、处方、生产工艺、贮藏运输条件等所制定的,用以检查药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定. 药典：记载药品质量标准的法典；国家监督、管理药品的技术标准；法律约束力标准品：用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准

2、物质，按效价单位(或g)计，以国际标准品进行标定. 对照品：化学药品标准物质，均按干燥品或无水物质进行计算后使用空白试验：不加供试品或以等量溶剂替代供试液情况下按同法测得的结果恒重：连续两次干燥或炽灼后的重量差异小于0.3mg比旋度偏正光透过长1dm且每1ml中含有旋光性质物质1g的溶液的旋光度、吸收系数吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度.有摩尔吸收系数和百分吸收系数E1%1cm熔点：1.固体融化成液体的温度2.熔融同时分解的温度3.自初溶至全溶的一段温度. 药物纯度融程，熔点一般鉴别试验：依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪. 专属鉴别试验：证实某种

3、药物的依据，是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学性质不同选用某些特有的灵敏的反应来鉴别药物真伪杂质限量:药物中所含杂质的最大允许量叫做杂质的限量.通常百分之几或百万分之几来表示.特殊杂质:特殊杂质是指在特定药物的生产和贮存过程中引入的杂质.滴定度T:每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测物药物的质量重复性:较短时间间隔,相同操作条件,同一分析人员连续测定的精密度.中间精密度:不同时间不同人员不同设备测得.重现性:不同实验室不同人员测得.专属性:鉴别反应,杂质检查,含量测定。LOD检测限:试样中被测物能被检测出的最低浓度或量.信噪比S/N=3或2时相应浓度或注入仪器的量来确定.LOQ

4、定量限:被测物能被定量测定的最低值,信噪比S/N=10时,相应浓度或注入仪器的量确定定量限。范围:达一定精密度,准确度和线性,测定方法适用的高低限浓度。体内分析:体内样品(生物体液,器官或组织)中药物及代谢物或内源性生物活性物质的定量分析. 药品质量标准：国家对药物质量、规格及检验方法所做的技术规定，是药品生产，供应，使用检验和药政管理部门共同遵循的法定依据.药物分析任务:a药物研制过程的眼睛b药品质量标准制定的科学c临床药学研究的手段d常规药品检验手段.药品质量标准分类1)国家药品标准中华人民共和国药典和药品注册标准.a法律保障中华人民共和国药品管理法(2001)b、ChP收载疗效确切，生产

5、成熟，产品稳定的药品.药品标准收载其他为收入Ch-P的药品2)临床实验用药品质量标准：仅在临床试验期间有效3)监测期药品标准4)企业标准(非法定标准)药品质量标准制定原则1)安全有效：毒副反应小 疗效肯定2)先进性 UV，IR，GC，HPLC，TLC，MS，AA；3)针对性：针对不同剂型规定检测项目及确定合理限度4)规范性.药品质量标准主要内容1)名称：1药品名称应科学、明确简短2避免采用可能给患者以暗示的有关药理学治疗学的药品名称3中文名尽量与英文名对应4无机化学药物，如化学名常用且较简单，应采用化学名；如化学名不常用，可采用通俗名5盐类药物，酸名列前，盐基列后.2)性状：1外观与臭味2理化

6、常数.3)鉴别：a、方法要有一定专属性，灵敏性，简便性b、化学法与仪器法相结合，每种药品至少取2至4种；c、尽可能采用ChP中的收载方法d、原料药侧重指纹性的光谱方法，制剂侧重抗干扰的专属性色谱方法4检查：安全性，有效性，均一性，纯度要求a、一条生产线一个检查方案b、对于杂质检查的基本要求是要研究方法的基本原理专属性灵敏性试验条件和最佳化.对于色谱打，还要研究其分离能力5)含量测定：对药品中有效成分的含量测定a、方法选择原则1对西药原料药，作准确性考虑，故首选容量分析法2对制剂分析，作专属性考虑，故首选HPLC 3对酶类药物应首选酶分析法，抗生素类应首选HPLC法及微生物检测法，放射性药物首选

7、放射性药物检测法4上述方法不适用时采用计算分光光度法5对新药研制，其含量测定应选用原理不同的两种方法进行对照性测定b、含量限度的确定：1根据不同剂型一般原料药大于99.0%、片剂90110、注射剂93107 ；2根据生产的实际水平3根据主药的含量多少，含量大，限度为标示量的95105；含量中等，限度为标示量的93107；含量小，限度为标示量的90110或80120 ；4标准太高，生产上难以达到，标准太低，药品质量无法保证.贮藏：1稳定性试验的目的：A影响因素试验 为贮藏处方加工工艺提供资料；B加速试验 确定药品能在临床研究或试生产期间保证质量；C长期试验 考察药品使用期限.药典一部:药材及饮片

8、、植物油脂和提取物，成方制剂和单味制剂,二部:化学和生化药品,三部:生物制品.内容:凡例、正文、附录、索引.药品检验程序:取样、检验、留样、检验报告.药品鉴别方法:化学鉴别法、光谱鉴别法、色谱鉴别法、显微鉴别法、生物学法、指纹图谱和特征图谱鉴别法.药物制剂分析的特点 1)比原料药物分析复杂 2)测定项目和要求不同：若原料中的检查项目在制剂生产.贮藏和使用过程中不再产生，则不在制剂中检查 3)杂质限量要求不同 4)分析方法的要求不同.片剂的常规检查项目1)重量差异：按规定称量方法测得片剂每片的重量与平均片重之间的差异程度 2)含量均匀度 对小剂量口服固体制剂、粉雾剂或注射用无菌粉针剂 每片含量偏

9、离标志量的程度 取10片3)崩解时限：固体制剂在规定介质中，以规定的方法进行检查，崩解溶散并通过筛网所需时间的限度6片4)溶出度的检查(针对难溶性药物)药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速率和程度6份注射剂的检查项目：1)装量：必须保证注射液注射用量不少于标志量2)装置差异3)可见异物4)无菌检查5)热原检查6)细菌内毒素检查7)不溶性微粒.片剂和注射液种药物含量的测定：1)糖类：会干扰氧化还原滴定，可采用弱氧化剂 2)硬脂酸镁：Mg2+会干扰配位滴定法，硬脂酸根离子可干扰非水滴定法：a加掩蔽剂掩蔽Mg2+；b若主药含量大，硬脂酸镁含量小，可不考虑对非水滴定的影响3)抗氧化剂，如亚硫酸钠，

10、焦亚硫酸钠，硫代硫酸钠，Vc等 a、加入掩蔽剂(羰基试剂)如丙酮甲醛；b、加酸分解c、加入弱氧化剂氧化d、改用其他方法避开氧化还原过程，如用UV；e、萃取后UV测定法4)溶剂油：影响以水为溶剂的分析方法：a有机溶剂稀释法；b萃取法；c柱色谱法5)等渗溶液：一般无影响，出现干扰情况少或者干扰物本身为特殊杂质.药物鉴别实验项目:A性状:1外观2溶解度3物理常数:熔点-初熔全熔、比旋度、吸收系数B一般鉴别试验:包括丙二乙酰胺类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类、有机酸盐、无机酸盐.(a)有机氟化物:鉴别方法:取供试品约7mg,照氧瓶燃烧法进行有机破坏,用水20ml与0.01mo

11、l/L氢氧化钠溶液6.5ml为吸收液,燃烧完全后,充分振摇,取吸收液2ml,加茜素氟蓝试液0.5ml,再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml,用水稀释至4ml,加硝酸亚铈试液0.5ml显蓝紫色.反应原理:经氧瓶燃烧法破坏,被碱性溶液吸收成无极氟化物,与茜素氟蓝,硝酸亚铈在pH4.3溶液中形成蓝紫色络合物(b)有机酸盐:水杨酸盐加三氯化铁试液1滴,显紫色.(c)芳香第一胺类:供试品50mg,加稀盐酸1ml,加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴,滴加碱性-萘酚试液,显橙黄色到猩红色沉淀.(d)托烷生物碱类:供试品10mg,加发烟硝酸5滴,水浴蒸干,加乙醇2-3滴,加固体氢氧化钾一小粒,显深紫色.原理

12、:具有莨菪酸结构,vitali反应,水解后生成莨菪酸,经发烟硝酸处理转为三硝基衍生物,再与KOH醇溶液作用,转变成醌型产物而显紫色.(e)无机金属盐焰色反应:钠鲜黄、钾紫、钙砖红、钡黄绿.C专属鉴别试验:一般鉴别基础上,区别同类药物或具相同化学结构部分的各个药物单体.药物中杂质的来源：1生产过程引入；2贮藏过程中受外界条件影响，引起药物理化特性变化而产生.毒性分：有毒杂质；信号杂质-无毒，含量多少可以反映药物的纯度.理化性质分：有机杂质；无机杂质；残留溶剂杂质限量控制方法:1限量检查法-只需检查杂质是否超过限量,对照法,灵敏度法和比较法.杂质限量=(标液浓度C*标液体积V/供试品量)*100%

13、一般杂质的检查方法:一般杂质有:氯化物、硫酸盐、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、重金属、砷盐、铵盐.A氯化物:原理:药物中微量氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应,生成氯化银胶体而显白色浑浊,与标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度进行比较.(氯化物浓度以50ml中含5080ug的Cl为宜.)B重金属:a硫代乙酰胺法:适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物.原理:硫代乙酰胺在弱酸条件下水解,产生硫化氢,与重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液,与标准铅溶液经同法处理后显色比较.方法:取三支纳氏比色管,甲管加入标准铅和缓冲盐,乙管中加入供试品,丙管中加入供试品和标准铅溶液及缓冲液.丙管不浅于甲管,

14、乙管不深于甲管.b炽灼后的硫代乙酰胺法:适合于芳环、杂环,以及难溶于水、稀酸以及乙醇的有机药物.c硫化钠法:适合于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物.C砷盐:a古蔡氏法:原理:金属锌与酸作用生成新生态的氢,与药物中微量的砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢,与溴化汞试纸,产生黄色至棕色的砷斑,与标准砷溶液产生的砷斑比较.(醋酸铅棉花:用于吸收硫化氢.碘化钾与氯化亚锡:用于使五价砷还原为三价砷和抑制锑化氢的生成)b二乙基二硫代氨基甲酸银法Ag-DDC:原理:金属锌与酸作用产生新生态氢,与微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢,还原二乙基二硫代氨基甲酸银,生成红色胶态银,与标准砷溶液产生的

15、颜色比较.药物的含量:药物中所含主成分的量,是评价药物质量的重要指标.含量测定的方法:(1)容量分析法适用于对准确度与精密度要求较高的样品测定，较广泛应用关于化学原料药的含量测定,简便易行,耐用性高,测定结果准确,专属性差.(2)光谱分析法-适用于对灵敏度要求较高,样本量较大的-固体制剂含量相当于标示量的百分数(3)色谱分析法适用于复杂样品的含量测定-复方制剂含量测定的首选方法.含量计算:(1)直接滴定法:含量(%)=V*T/W*100%；T为药典给定,且此时滴定液摩尔浓度与药典规定一致,若滴定液浓度与药典规定不一致,需将T*F(滴定液浓度校正系数)F=实际摩尔浓度/规定摩尔浓度.含量(%)=

16、V*T*F/W*100%药物分析方法的验证与内容:需验证的分析项目:鉴别实验,杂质定量、限度检查,原料药或制剂中有效成分含量测定,以及制剂中其他成分的测定.验证的内容:准确度,精密度(包括重复性,中间精密度,重现性),专属性,检测限,定量限,线性,范围和耐用性准确度-用回收率表示,原料药:回收率(%)=测得量/加入量*100%.制剂:回收率(%)=(测得量-本底量)/加入量*100%.数据要求:至少用9个测定结果进行评价精密度RSD表示,含有三部分-1重复性:较短时间间隔,相同操作条件,同一分析人员连续测定的精密度.2中间精密度:不同时间不同人员不同设备测得.3重现性:不同实验室不同人员测得.

17、专属性:鉴别反应,杂质检查,含量测定。LOD检测限:试样中被测物能被检测出的最低浓度或量.信噪比S/N=3或2时相应浓度或注入仪器的量来确定.LOQ定量限:被测物能被定量测定的最低值,信噪比S/N=10时,相应浓度或注入仪器的量确定定量限。范围:达一定精密度,准确度和线性,测定方法适用的高低限浓度。体内分析:体内样品(生物体液,器官或组织)中药物及代谢物或内源性生物活性物质的定量分析.体内药物分析特点:体内样品需经分离和浓集/化学衍生化处理后才能进行分析,对分析方法的灵敏度及专属性要求较高,分析工作量大,测定数据的处理和结果的阐明较为复杂. 体内样品特点:采样量少,待测无浓度低,干扰物质多体内

18、样品分析前处理:常用方法:(1)去除蛋白质法:溶剂沉淀法,中性盐析法,强酸沉淀法,热凝固法(2)分离与浓集:液液萃取法,固相萃取法,超滤法(3)缀合物的水解:酸水解法,酶水解法,溶剂解法(4)化学衍生化分析方法验证内容:(1)特异性(方法特异性)。(2)标准曲线与定量范围:至少6个浓度点。(3)定量下限(LLOQ)标准曲线上的最低浓度点.测定法:S/N5.限度要求:准确度应在表示浓度的80%120%,RSD20%(4)精密度与准确度:精密度常用QC样品的相对标准差表示；准确度常用QC样品的实际浓度与表示浓度的相对回收率(RR)/相对偏差(RE).测定法:选高、中、低三个浓度进行测定.测批内RS

19、D时,每一浓度连续制备并测定,至少连续三个分析批,不少于45个样品的分析结果.限度要求:RE=(+/-)15%.(5)样品的稳定性:一个分析批内含体内样品和制备样品的短期稳定性和整个分析期间含药体内样品及标准物储备溶液的长期稳定性(6)提取回收率(7)分析过程中的质量控制(8)未知体内样品浓度超出定量范围的处理(9)作为外源性药物使用的内源性物质的测定(10)微生物学和免疫学方法的验证芳酸类非甾体抗炎药物:具有苯环和羧基鉴别试验FeCl3:1.水杨酸反应:中性或弱酸性(pH值46)条件下进行,强酸性溶液中配位化合物分解.阿司匹林加水煮沸.对乙酰氨基酚-显蓝紫色.吡罗昔康(三氯甲烷)-瑰红色;美

20、洛昔康-淡紫红色;烯醇式羟基具有酚羟基性质-红色配位化合物缩合反应:酮洛芬与二硝基苯肼缩合成橙色沉淀重氮化-偶合反应:对乙酰氨基酚酸中水解生成对氨基酚,游离芳伯氨基与亚硝酸钠试液重氮化,重氮盐再与碱性-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。水解反应:阿司匹林,水解得水杨酸钠与醋酸钠,酸化生成水杨酸白色沉淀;并发生醋酸的臭气。特征元素的反应:Cl-与碱共热分解产生氯化物,显氯化物的鉴别反应-双氯芬酸钠与碳酸钠炽灼灰化,加水煮沸,滤过,滤液显氯化物鉴别反应。S-经高温分解产生硫化氢气体,遇醋酸铅生成硫化铅黑色沉淀。美洛昔康:试管中炽灼,产生的气体使湿润的醋酸铅试纸显黑色。光谱法:1紫外-可见分光光度法:最大

21、吸收波长法:双氯芬酸钠溶液276nm有最大吸收；最大与最小吸收波长法:布洛芬及制剂氢氧化钠溶液265,273nm最大吸收245,271nm最小吸收,259nm肩峰；吸光度法:甲芬那酸盐酸-甲醇溶液(20g/ml):279与350nm最大,吸光度分别:0.690.74与0.560.6；吸光度比值法:二氟尼柳盐酸-乙醇溶液251与315nm最大吸光度比值应为4.24.6特殊杂质及其检查法1.游离水杨酸:酚羟基易被空气(氧)逐渐氧化生成淡黄,红棕至深棕色醌型化合物.ChP用水杨酸与Fe3+生成紫堇色配离子的原理,用稀硫酸铁铵溶液显色法检查供试品溶液制备过程中阿司匹林水解。ChP2010采用1%冰醋酸

22、甲醇溶液制备供试品溶液(防阿司匹林水解);并用RP-HPLC检查。2双水杨酯中游离水杨酸:利用水杨酸与Fe3+生成有色配离子的原理,用硝酸铁溶液显色,在530nm的波长处测定吸光度,限度为0.5%;双水杨酯片同法检查,限度为1.5%.含量测定:1直接滴定法:水杨酸,阿司匹林,双水杨酯,二氟尼柳,甲芬那酸,布洛芬,酮洛芬,萘普生,尼美舒利.方法要点:乙醇先用NaOH滴定液滴定至对酚酞显中性用中性乙醇溶解供试样品酚酞为指示剂(pH9粉红色)滴定在不断振摇下稍快进行,防阿司匹林水解.方法缺点:受阿司匹林的水解产物水杨酸及醋酸的干扰2剩余量滴定法:美洛昔康,水及与水混溶的有机溶剂中难溶.原理:美洛昔康

23、含有与羰基共轭的烯醇式羟基,具有羧酸性质,可用氢氧化钠滴定液滴定.本品甲醇,乙醇,丙酮及水中难溶,用定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后,用盐酸滴定液回滴定.方法要点:先加定量过量的NaOH滴定液溶解供试样品加中性乙醇为溶剂(对溴麝香草酚蓝显中性,pH6.0黄色pH7.6蓝色)用盐酸滴定液回滴剩余的NaOH滴定液结果需用空白试验校正3水解后剩余量滴定法:阿司匹林USP,BP,JP方法要点与直接滴定相比,不担心aspirin酯水解带来误差加定量过量的NaOH滴定液,煮沸使水解,放冷酚酞为指示剂,用硫酸滴定液回滴剩余的NaOH滴定液结果需用空白试验校正(碱液加热时易吸收CO2,生成碳酸盐,硫酸滴定液回滴

24、时消耗体积减小,使测定结果偏高)4两步滴定法:阿司匹林片:水解后剩余量滴定法的改进.片剂水解产物水杨酸及醋酸;稳定剂酒石酸或枸橼酸.方法要点:第1步:中和干扰物和阿司匹林的游离羧基,操作方法同直接滴定法,终点时,酚酞由无色粉红色。第2步:在第一步完成后的溶液中加入定量过量的NaOH滴定液,按水解后剩余量滴定法操作计算时需注意,阿司匹林与氢氧化钠反应的摩尔比为1:15非水溶液滴定法:吡罗昔康.原理:吡罗昔康具有吡啶环,显碱性,可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定.测定法:本品约0.2g,精密称定,加冰醋酸20ml使溶解,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将

25、滴定的结果用空白试验校正T=33.14 mg/ml苯乙胺类拟肾上腺素药物鉴别试验：1双缩脲反应:盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱,芳环侧链具有氨基醇结构,可显双缩脲特征反应.方法:取本品1%水溶液1ml,加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1ml,即显蓝紫色,加乙醚1ml振摇、放置,乙醚层显紫红色,水层变为蓝色。2Rimini试验与亚硝基铁氰化钠反应.重酒石酸间羟胺加水溶解,加亚硝基铁氰化钠试液,丙酮数滴,碳酸氢钠少量,红紫色特殊杂质检查:酮体-肾上腺素肾不得过0.05,盐酸去氧肾上腺素不得大于0.20,重酒石酸去甲肾上腺素不得大于0.05,盐酸异丙肾上腺素不得大于0.15,盐酸甲氧明不得大于0.06。

26、含量测定:原料:非水溶液滴定法,溴量法；制剂:比色法,提取容量法,紫外分光光度法,HPLC1非水溶液滴定法:适用范围:pKb8的有机弱碱性药物及其盐类的含量测定(有机弱碱、它们的有机酸盐、氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐、硝酸盐),某些有机弱酸的含量测定。常用溶剂:酸性溶剂:提高有机弱碱的相对碱度-冰醋酸碱性溶剂:提高有机弱酸的相对酸度-二甲基甲酰胺两性溶剂:兼有酸、碱两种性能-甲醇惰性溶剂:无酸、碱性-甲苯,三氯甲烷,丙酮。一般方法:除另有规定外,精密称取供试品适量约消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L)8mL,加冰醋酸1030mL使溶解,加各品种项下规定的指示液12滴或以电位法指示终点,以高氯酸滴定

27、液(0.1mol/L)滴定。终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准,并将滴定结果用空白试验校正。溶剂的选择:pKb8-10冰醋酸,10-12冰醋酸+酸酐,12酸酐。酸根的影响:醋酸介质中的酸性:高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸磷酸有机酸。磷酸盐-可以直接滴定；硫酸盐-只能滴定至硫酸氢盐,醋酐&电位法指示终点；氢卤酸盐-加入定量的醋酸汞的冰醋酸溶液；硝酸盐-电位法指示终点；滴定剂稳定性:高氯酸滴定液配制:无水冰醋酸(750mL)+高氯酸(70%72%,8.5mL),在室温下缓缓滴加醋酐23mL,边加边摇,加完后振摇均匀,放冷,加无水冰醋酸适量使成1000mL,摇匀,放置24h。高氯酸滴定液标定:邻苯二甲酸氢

28、钾。无水醋酸:挥发性&膨胀系数大。终点指示方法:电位滴定法:指示电极-玻璃电极；参比电极-饱和甘汞电极。指示剂法:结晶紫、橙黄,萘酚苯甲醇、喹哪啶红、孔雀绿2溴量法:盐酸去氧肾上腺素,重酒石酸间羟胺。去溴代再用碘量法硫代硫酸钠滴定测定剩余溴量。对氨基苯甲酸酯和酰胺类局麻药物对氨基苯甲酸酯类:苯佐卡因,盐酸普鲁卡因;酰胺类:对乙酰氨基酚,盐酸利多卡因鉴别试验：重氮化-偶合反应:苯佐卡因,盐酸普鲁卡因橙黄到猩红色的沉淀；与FeCl3反应显蓝紫色与重金属离子反应:盐酸利多卡因-加水溶解,硫酸铜碳酸钠蓝紫-加氯仿-氯仿变蓝色；酸性条件下与氯化钴亮绿色沉淀；加硝酸后加硝酸汞煮沸变黄色。盐酸普鲁卡因加浓H

29、2O2/FeCl3,羟月亏酸铁,紫红暗棕。水解产物性质:盐酸普鲁卡因加NaOH普鲁卡因普鲁卡因(油状物)酯键水解对氨基苯甲酸钠加HCl对氨基苯甲酸白过量HCl溶解。制成衍生物后测定熔点:常用衍生化试剂:三硝基苯酚,硫氰酸铵特殊杂质检查:盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查-杂质对照品检查法含量测定：亚硝酸钠滴定法:苯佐卡因,盐酸普鲁卡因。原理:重氮化反应。终点指示:永停滴定法。滴定时注意事项:加入适量KBr加快反应速度加入过量盐酸加快反应速度反应温度1030,15以下滴定结果较准确滴定速度:滴定管尖端插入液面下约2/3处,一次性加入大部分NaNO2滴定液,近终点时,因尚未反应的芳伯胺基浓度极

30、稀,须在最后一滴加入后,搅拌15min,判断是否到终点非水溶液滴定法:盐酸布比卡因。适用范围:pKb8的有机弱碱性药物及其盐类的含量测定。常用溶剂:冰醋酸,冰醋酸-醋酐,醋酐。测定条件溶剂:冰醋酸或冰醋酸/醋酐。滴定液:高氯酸。指示剂:结晶紫巴比妥类药物的分析:5,5-取代:巴比妥,苯巴比妥,司可巴比妥,硫喷妥钠理化性质:白色结晶或结晶性粉末,具有一定的熔点。在空气中稳定,加热多能升华。一般微溶或极微溶于水,易溶于乙醇等有机溶剂；其钠盐则易溶于水,而难溶于有机溶剂。六元环结构比较稳定,遇酸、氧化剂、还原剂时,一般情况下环不会破裂,但与碱液共沸时则水解开环,并产生氨气。鉴别试验：1水解反应:鉴别

31、异戊巴比妥和巴比妥。JP15巴比妥的鉴别:取巴比妥0.2g,加氢氧化钠试液10ml,加热煮沸,产生具氨臭的气体,可使红色石蕊试纸变蓝。2与金属离子的反应:(1)银盐-本类药物的鉴别和含量测定(2)铜盐-巴比妥类药物呈紫堇色或生成紫色沉淀.含硫巴比妥类药物则呈现绿色沉淀。(3)钴盐-巴比妥类药物在碱性溶液中可与钴盐反应,生成紫堇色配位化合物.注意事项:反应在无水条件下比较灵敏,生成的有色产物也较稳定。因此,所用试剂应不含水分.(4)汞盐-巴比妥类药物与硝酸汞或氯化汞溶液反应,可生成白色汞盐沉淀,此沉淀能在氨试液中溶解3与香草醛的反应:巴比妥类药物分子结构中,丙二酰脲基团中的氢比较活泼,可与香草醛

32、在浓硫酸存在下发生缩合反应,生成棕红色产物.BP2009戊巴比妥的鉴别:取戊巴比妥10mg,加香草醛10mg,再加硫酸2ml,混合后,水浴加热2min,显棕红色。放冷,小心加入乙醇5ml,颜色先变为紫色,再变为蓝色。4紫外吸收光谱:特征硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中,均有较明显的紫外吸收。5薄层色谱行为特征BP2010中苯巴比妥的TLC鉴别:取苯巴比妥供试品和对照品各适量,分别加乙醇制成每1ml中约含1mg的溶液作为供试品和对照品溶液,各量取10:l,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以氯仿-乙醇-浓氨水(80:15:5)混合液的下层溶液为展开剂,展开后,晾干,立即于254nm紫外光下检测。供试品溶液的主斑点位置和大小与对照品溶液的均一致。6显微结晶巴比妥类药物可根据其本身或与某种试剂的反应产物的特殊晶型,进行同类或不同类药物的鉴别.特殊杂质检查:苯巴比妥的特殊杂质检查:乙醇溶液的澄清度-控制中间体I杂质的量,利用杂质在乙醇溶液中溶解度小;中性或碱性