完整版几丁质对海洋生防酵母抑菌活性的影响及相关机理的研究毕业论文.docx

1、完整版几丁质对海洋生防酵母抑菌活性的影响及相关机理的研究毕业论文工学学士毕业论文几丁质对海洋生防酵母(Rhodosporidium paludigenum)抑菌活性的影响及相关机理的研究A Thesis for the Degree of B. Eng Impact and Mechanism of Chitin on the Marine Yeasts Antibacterial ActivityCandidate：Laifeng LuSupervisor：Guangfeng KanAcademic Degree Applied for：Bachelor of EngineeringSpec

2、ialty：Food Science and EngineeringDate of Oral Examination：June, 2010University：Harbin Institute of Technology毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得 及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作

3、者 签 名： 日 期： 指导教师签名： 日期： 使用授权说明本人完全了解 大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。作者签名： 日 期： 学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和

4、集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名： 日期： 年 月 日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。涉密论文按学校规定处理。作者签名： 日期： 年 月 日导师签名： 日期： 年 月 日摘 要生物防治是采用微生物菌株或抗菌素类物质，通过喷洒或浸渍果实处理，以降低或防治果实采后病害的保鲜方法。本实验通过利用酵母细

5、胞壁组分之一几丁质诱导培养本实验室分离得到的拮抗菌株海洋酵母Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman（经英国国际微生物所菌种保存和鉴定中心CABI Bioscience Identification Services鉴定为Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman）以提高其采后果实病害生物防治效果。结果如下：（1）体内试验结果表明，几丁质诱导后，R. paludigenum的果实采后青霉病害生物防治效果得到显著提高。（2）几丁质诱导提高R. paludigenum生防效力的最佳诱导浓度为1.0%（w/v），最佳诱

6、导培养时间为3648 h。此外，试验结果表明，几丁质诱导培养与NaCl诱导培养之间并不存在协同增效作用。（3）机理实验结果表明，几丁质诱导培养后，R. paludigenum在苹果、梨果实伤口处的生长速度显著提高，菌体数量显著增加。（4）几丁质诱导培养后，R. paludigenum的发酵上清液对苹果果实伤口处扩展青霉的侵染有一定抑制作用。而未经诱导R. paludigenum 的发酵上清液对苹果果实伤口处扩展青霉的侵染没有抑制作用，反而有促进效果。（5）果实诱导抗性试验结果表明，R. paludigenum能激发苹果果实对青霉病害的抗性，而经NYCB诱导培养的酵母能进一步增强这种对果实抗性的

7、诱导作用。其机理可能与激发苹果果实伤口处组织的POD酶活性有关。综上所述，几丁质诱导可以提高R. paludigenum的产后果实生物防治效果，其机理可能与诱导培养后，能促进R. paludigenum在果实伤口处的生长、刺激酵母分泌抑菌物质和增强酵母对果实抗性的诱导有关。关键词： Rhodosporidium paludigenum；几丁质；诱导；生物防治ABSTRACTBiological control is a method that using microbial strains or antibiotic substances, by spraying or dipping, to

8、 decrease postharvest decay of fruits. We planned to use chitin (one of the yeast cell wall components) to co-culture with Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman isolated by our laboratory Colleague in marine yeast (Identified by CABI Bioscience Identification Services as Rhodosporidium paludigen

9、um Fell & Tallman) to enhance the effectiveness of its biological control of postharvest decays of fruits. (1) In vivo test results showed that R. paludigenum induced by chitin can increase its biological control of postharvest diseases (BCPD) effect significantly. (2) The optimal concentration for

10、induction was 1.0% (w/v), the optimal time for induction was 3648 hours. There was no collaborative effect between chitin and NaCl on the BCPD of R. paludigenum.(3) Data showed population and growth speed of R. paludigenum in wounds of apple and pear increased significantly.(4) Data showed that R. p

11、aludigenum cultured in medium with chitin had inhibitory effect to the decay of pears caused by Penicillium expansum， R. paludigenum cultured in NYDB has no inhibitory, but a promoting effect. (5) Through the induction of fruit resistance and associated biological control results showing that R. pal

12、udigenum could stimulate the resistance of fruits against the external infection. Meanwhile, chitin could improve their ability to inhibit the decay incidence and fruit resistance. The ability to stimulate fruits POD activity may be related.In conclusion, R. paludigenum induced by chitin could incre

13、ase its BCPD effect. The promoting of R. paludigenums growth in fruit wounds, secreting of antimicrobial substances and induced resistance of fruit after being induced may be the mechanism.Key words: R. paludigenum; Chitin; Induction; BCPD目 录摘 要 ABSTRACT 第一章 文献综述 11.1 我国水果产业发展概述 11.2 果蔬采后病害的侵染研究 1 1

14、.2.1 采后病原真菌的侵染方式 1 1.2.2 采后病原真菌的致病机理 21.3 果蔬采后病害的控制方法 2 1.3.1 化学杀菌剂的使用 3 1.3.2果实采后病害防治物理方法 3 1.3.3果实采后病害生物防治 41.4 采后拮抗酵母作用机制 4 1.4.1营养和空间的竞争 4 1.4.2重寄生作用 5 1.4.3胞外活性物质的产生 5 1.4.4诱导抗性 6 1.4.5抗生作用 61.5 拮抗菌生理调控及机理的研究 7 1.5.1逆境培养 7 1.5.2拮抗物质的分泌和积累 8 1.5.3 基因工程技术的应用 81.6 本课题研究目的 81.7 应用前景和学术价值 9第二章 海洋酵母R

15、. paludigenum对果实采后真菌病害抑制效果研究 102.1 前言 102.2 实验材料和方法 10 2.2.1 主要仪器 10 2.2.2拮抗菌及其培养 11 2.2.3 病原菌培养和孢子悬浮液的制备 11 2.2.4 试剂 11 2.2.5 果实选择与预处理 12 2.2.6 几丁质对R. paludigenum生防效果的影响 12 2.2.7 数据处理分析与作图 132.3 结果 13 2.3.1 不同浓度几丁质对R. paludigenum生防效力的影响 13 2.3.2几丁质诱导后不同浓度R. paludigenum酵母的生防效果 15 2.3.3 不同培养时间对几丁质诱导下R. paludigenum生防效力的影响 17 2.3.4 几丁质与NaCl结合诱导对R. paludigenum生防效力的影响 182.4 讨论 20第三章 海洋酵母R. paludigenum对果实采后真菌病害抑制机理研究 223.1 前言 223.2 实验材料和方法 22 3.2.1 主要仪器 22 3.2.2拮抗菌及其培养 23 3.2.3 病原菌培养和孢子悬浮液的制备 23 3.2.4 果实选择与预处理 23