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1、酶工程各章试题酶工程各章试题 作者： 日期： 酶工程第一章测试试题卷一 填空 (每空1分,共20分)1. 1878年,_首次将酵母中酒精发酵的物质称为酶.2. 1913年,Michaelis 和Menten根据中间产物学说,推导出酶催化反应的基本动力学方程-米氏方程,可用公式表示为_.3. 1982年Thomas Cech等人发现四膜虫的 rRNA可以在没有蛋白质存在的情况下自身催化切除内含子,完成加工过程.这一具有催化活性的 RNA的发现改变了传统的酶的化学本质是_的概念。4. 对同一种酶可同时采用系统命名和_命名两种方法.5. 乳酸脱氢酶可标识为EC1.1.1.2,其中EC代表_.6. 催

2、化L-谷氨酸 D谷氨酸的酶属于_酶.7. 核酸类酶的基本组成单位是_.8. 酶的有机辅助因子在催化过程中起_的作用.9. 在酶的二级结构片状折叠中,_式结构更稳定.10. 酶的绝对专一性又称为_专一性.11. PH对酶的影响主要是影响到了氨基酸的_状态.12. 在测酶活力时,为了使酶反应速度不受底物浓度底限制,反应系统应使用足够高的底物浓度,一般要求:_.13. 酶分离纯化整个工作包括三个基本环节:抽取 纯化和_.14. 工业应用的三大酶制剂是蛋白酶 _和脂肪酶.15 核酸类酶催化反应的类型,可以将R-酶分为三类:剪切酶,剪接酶和_酶.16、具有不同分子形式但却催化相同反应的酶称为_.17、每

3、毫克蛋白或RNA中所具有的酶活力数称为酶的_.用u/mg表示.18、酶制剂可分为液体酶制剂,固体酶制剂,纯酶制剂和_酶制剂.二. 选择题 (每题2分,共10分)1. 谷氨酸脱氢酶可有以下四种底物,由Km推断它的最适底物是( ).A. 谷氨酸Km= 0.12 B. -酮戊二酸Km=2.0 C. NAD氧化形 Km=0.025 D. NAD 还原形 Km=0.0182. D EA B C F G图示抑制模式属于:( )A 累积反馈抑制无分支途径中酶活性反馈抑制C 顺序反馈抑制 D 协调反馈抑制3有A.B两种蛋白酶样品,A样品32mg,酶活力单位数为180U.B样品52mg ,酶活力单位数为190U

4、,则两样品纯度为:A A B B. A 5Km 13.制剂. 14淀粉酶 15多功能酶16同工酶 17酶的比活力.18固定化酶制剂二. 选择题 (每题3分,共15分)1.D 2.D 3.A. 4D 5.C三. 名词解释 (每题5分,共15分)1. 调节酶: 在代谢途径和物质转化体系中起调节作用的关键酶. 2. 别构效应:一种化合物与酶的活性中心以外的部位结合,引起酶的构象发生变化的现象. 3. 固定化酶:在一定空间内呈闭锁状态存在的酶,能连续地进行反应,反应后酶可以回收重复使用.四. 判断题(每题2分,共14分)1. 正确 2.错误 3. 正确 4. 错误 5. 错误 6. 正确 7. 正确五

5、、图示说明题(共12分)2. 图示并说明竞争性抑制和非竞争性抑制的区别.(6分)竞争性抑制剂结构往往与正常底物非常相似,从而与底物竞争酶分子上同一个结合部位(活性中心),阻止底物和酶的结合.因而酶不能与抑制剂和底物同时结合.ESI复合物缺乏反应活性基团不能继续分解成产物,形成死端复合物.(图4分,解释2分)不论底物分子是否与酶结合, 非竞争性抑制剂都能与酶分子结合产生死端复合物. 非竞争性抑制剂与活性中心以外的基团结合,其结构肯与底物分子毫无相关之处,两者没有竞争作用,但ESI不能进一步分解成产物. (图4分,解释2分)七. 简答题 (共26分)1. 请比较说明吸附层析、离子交换层析、凝胶层析

6、、亲和层析分离酶的原理.(16分)层析类型原理吸附层析利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物各组分分离离子交换层析利用离子交换剂上的可解离基团对各种离子的亲和力不同而达到分离目的.凝胶层析是以各种多孔凝胶位固定相,利用溶液中各组分的相对分子质量不同而进行分离的技术.亲和层析利用生物分子与培基之间所具有的专一而又可逆的亲和力使酶等生物大分子分离纯化.2. 固定化酶的制备原则是什么?(10分)(1)维持酶的催化活性和专一性.(2)应有利于生产自动化.连续化.(3)与载体牢固结合(4)载体不与底物.产物和反应物发生化学反应.(5)成本要低,利于工业使用.第二、 三章 酶的生物合成法生产 测试题填

7、空题1、SOD是_酶，具有_的功效。2、依据在体外培养时对生长基质依赖性差异，动物细胞可分为两类：_、_。3、动物细胞培养的PH应控制在_；温度控制在_,允许波动_。判断题谷草芽孢杆菌是应用最广泛的产酶微生物。大多数产酶微生物采用淀粉或其水解产物为碳源,植物细胞一般以蔗糖为碳源。植物细胞培养要求的氮源一般为有机氮源。动物细胞培养主要用于各种功能蛋白质的生产。动物细胞传代培养时可以用胃蛋白酶分散细胞。简答题：1、固定化原生质体产酶有何特点？2、植物细胞培养产酶的工艺流程？3、酶的生物合成有哪几种模式？各有何特点？P36-384、影响酶生物合成的主要因素有哪些？结合酶的生物合成模式，分析说明怎样提

8、高产酶效率。P39答案：填空题1、抗辐射、抗氧化、抗衰老 2、贴壁依赖型细胞，非贴壁依赖型细胞 3、7.07.4 微碱性，36.5 ，允许波动范围在0.25简答题1、(1)、变胞内产物为胞外产物 固定化黑曲霉原生质体生产葡萄糖氧化酶，使细胞内葡萄糖氧化酶的90以上分泌到细胞外。(2)、提高产酶率 固定化枯草芽孢杆菌原生质体生产碱性磷酸酶，使原来存在于细胞间质中的碱性磷酸酶全部分泌到发酵液中，产酶率提高36。(3)、稳定性好(4)、易于分离纯化2、外植体 诱导愈伤组织 细胞培养 分离纯化 酶第四章 酶的提取与分离纯化 测试题填空题1、酶在结晶之前，酶液必须经过纯化达到一定的纯度。通常酶的纯度应当

9、在_以上，方能进行结晶。2、酶结晶的主要方法有：_、_、_、_。3、酶的剂型有：_、_、_和固定化酶制剂；通常用作分析试剂或用作医疗药物的酶制剂要求是_ 。4、注射用的医用酶应设法除去_。判断题1、一般采用稀盐溶液进行酶的提取，盐的浓度一般控制在0.020.5 molL 。2、常用硫酸铵盐析沉淀酶蛋白。3、盐析沉淀酶蛋白时，溶液的pH值应调节到远离酶的等电点。4、等电点结晶是通过缓慢改变浓酶液的pH值，使之逐渐远离酶的等电点，而使酶析出结晶的过程。名词解释：1、选择性变性沉淀法 2、酶的提取3、亲和层析简答题：1、酶的分离纯化工作的基本原则？2、举例说明细胞破碎的几种方法及原理。 3、稳定酶的

10、方法有哪些？答案：填空题1、50。2、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、透析平衡结晶法、等电点结晶法。3、固体酶制剂、液体酶制剂、纯酶制剂、固定化酶制剂；纯酶制剂。4、热源物质名词解释1、选择性变性沉淀法：选择一定的条件使酶液中存在的某些杂蛋白等杂质变性沉淀，而不影响所需的酶，这种分离方法称为选择性变性沉淀法2、酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂中的过程，也称为酶的抽提。3、亲和层析是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力，使酶等生物分子分离纯化的技术。简答题1、（1）、防止酶变性失效 凡用于预防蛋白质变性失效的方法与措施都应考虑用于酶的分离纯化。A

11、、除少数例外外，所有操作都必须在低温条件下进行，特别是在有机溶剂存在的情况下更应小心。B、大多数酶在PH10的情况下稳定，应控制整个系统不要过酸、过碱，同时要避免在调整PH时局部过酸或过碱。C、重金属能使酶失效，有机溶剂能使酶变性，微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破坏，所有这些都应周全考虑。可以加入蛋白酶抑止剂，杀菌剂，稳定蛋白质构象和酶活性的还原剂。（2）、酶活性测定贯串纯化过程的始终也就是说，从原理开始，整个过程的每一步都要进行比活力与总活力的检测与比较，以便知道每一步骤中可采用什么方法与什么条件，分别使酶的纯度提高了多少，回收了多少酶，从而决定其取舍。（3）、选择有效的纯化方法凡用

12、于蛋白质纯化的一切方法同样适用于酶。应根据目的酶的物理、化学性质选取。（4）、原料来源要方便，成本要低2、举例说明细胞破碎的几种方法及原理 方法举例原理酶降解溶菌酶处理细菌消化细胞壁化学破碎甲苯抽提酵母化学溶解细胞壁细胞溶解红细胞渗透破碎细胞膜手动匀浆器肝组织迫使细胞通过窄缝撕开细胞膜超声波细胞悬浮液破坏细胞膜3、稳定酶的某些方法（1）、添加底物、抑止剂和辅酶（2）、添加SH保护剂 如谷胱甘肽、二巯基乙醇（3）、低温（04）（4）、添加某些低分子无机离子 Ca2保护淀粉酶，Mn2+能稳定溶菌酶，CL能稳定透明质酸酶等（5）、固体酶制剂稳定性高 可保存数月或几年以上；热敏性酶多用冷冻干燥法，例如

13、注射用酶等。（6）、固定化酶也是提高酶的稳定性的好方法。第四章 酶的提取与分离纯化 测试题填空题1、酶在结晶之前，酶液必须经过纯化达到一定的纯度。通常酶的纯度应当在_以上，方能进行结晶。2、酶结晶的主要方法有：_、_、_、_。3、酶的剂型有：_、_、_和固定化酶制剂；通常用作分析试剂或用作医疗药物的酶制剂要求是_ 。4、注射用的医用酶应设法除去_。判断题1、一般采用稀盐溶液进行酶的提取，盐的浓度一般控制在0.020.5 molL 。2、常用硫酸铵盐析沉淀酶蛋白。3、盐析沉淀酶蛋白时，溶液的pH值应调节到远离酶的等电点。4、等电点结晶是通过缓慢改变浓酶液的pH值，使之逐渐远离酶的等电点，而使酶析

14、出结晶的过程。名词解释：1、选择性变性沉淀法 2、酶的提取3、亲和层析简答题：1、酶的分离纯化工作的基本原则？2、举例说明细胞破碎的几种方法及原理。 3、稳定酶的方法有哪些？答案：填空题1、50。2、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、透析平衡结晶法、等电点结晶法。3、固体酶制剂、液体酶制剂、纯酶制剂、固定化酶制剂；纯酶制剂。4、热源物质名词解释1、选择性变性沉淀法：选择一定的条件使酶液中存在的某些杂蛋白等杂质变性沉淀，而不影响所需的酶，这种分离方法称为选择性变性沉淀法2、酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂中的过程，也称为酶的抽提。3、亲和层析是利用生物分子与配基

15、之间所具有的专一而又可逆的亲和力，使酶等生物分子分离纯化的技术。简答题1、（1）、防止酶变性失效 凡用于预防蛋白质变性失效的方法与措施都应考虑用于酶的分离纯化。A、除少数例外外，所有操作都必须在低温条件下进行，特别是在有机溶剂存在的情况下更应小心。B、大多数酶在PH10的情况下稳定，应控制整个系统不要过酸、过碱，同时要避免在调整PH时局部过酸或过碱。C、重金属能使酶失效，有机溶剂能使酶变性，微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破坏，所有这些都应周全考虑。可以加入蛋白酶抑止剂，杀菌剂，稳定蛋白质构象和酶活性的还原剂。（2）、酶活性测定贯串纯化过程的始终也就是说，从原理开始，整个过程的每一步都要

16、进行比活力与总活力的检测与比较，以便知道每一步骤中可采用什么方法与什么条件，分别使酶的纯度提高了多少，回收了多少酶，从而决定其取舍。（3）、选择有效的纯化方法凡用于蛋白质纯化的一切方法同样适用于酶。应根据目的酶的物理、化学性质选取。（4）、原料来源要方便，成本要低2、举例说明细胞破碎的几种方法及原理 方法举例原理酶降解溶菌酶处理细菌消化细胞壁化学破碎甲苯抽提酵母化学溶解细胞壁细胞溶解红细胞渗透破碎细胞膜手动匀浆器肝组织迫使细胞通过窄缝撕开细胞膜超声波细胞悬浮液破坏细胞膜3、稳定酶的某些方法（1）、添加底物、抑止剂和辅酶（2）、添加SH保护剂 如谷胱甘肽、二巯基乙醇（3）、低温（04）（4）、添

17、加某些低分子无机离子 Ca2保护淀粉酶，Mn2+能稳定溶菌酶，CL能稳定透明质酸酶等（5）、固体酶制剂稳定性高 可保存数月或几年以上；热敏性酶多用冷冻干燥法，例如注射用酶等。（6）、固定化酶也是提高酶的稳定性的好方法。第五章 酶分子的修饰与应用 测试题填空题1、酶分子修饰的意义是：_,_,_。名词解释1、酶分子修饰通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的过程称为酶分子修饰。2、金属离子置换修饰3、酶分子的物理修饰简答题：1、什么是酶分子的侧链修饰？酶分子侧链修饰有何意义？2、请举例说明酶分子修饰的应用答案填空题：1、提高酶的活力；增强酶的稳定性；降低或消除酶的抗原性

18、。名词解释1、酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的过程称为酶分子修饰。2、把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子，使酶的功能和特性发生改变的修饰方法称为金属离子置换修饰。3、通过各种物理方法使酶分子的空间构象发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的方法称为酶分子的物理修饰。简答题1、采用一定的方法（一般为化学法）使酶的侧链基团发生改变，从而酶分子的特性和功能的修饰方法称为侧链基团修饰。意义：（1）、通过酶分子侧链基团修饰，可以研究各种基团在酶分子中的作用及其对酶的结构、特性和功能的影响，并可以用于研究酶的活性中心的必须基团。如果某基团修饰后不引起酶

19、活力的显著变化，则可以认为此基团属于非必须基团。（2）、通过酶分子侧链基团修饰，可以测定某一种基团在酶分子中的数量，例如，采用三硝基苯磺酸测定氨基的数量；用对汞苯甲酸测定巯基的数量；用碳二亚胺测定羧基的数量；用四唑重氮盐测定咪唑基的数量等。（3）、酶分子侧链基团修饰，在酶工程方面可以提高酶的活力、增加酶的稳定性、降低酶的抗原性，并且可以引起酶催化特性和催化功能的改变，以提高酶的使用价值。（4）、酶分子侧链基团修饰，还可以获得自然界原来不存在的新酶种，例如，某些抗体酶和人工改造的核酸类酶。第六章 酶、细胞、原生质体固定化与应用测试题填空题1、固定化酶的制备方法主要有：_、_、_、_。2、 交联法

20、常用的双功能试剂是：_。判断题1、酶经固定化后，其作用的最适pH值往往会发生一些变化。2、固定化酶的最适作用温度与游离酶相比没有变化。3、一般来说，用带负电荷的载体制备的固定化酶，其最适pH值比游离酶的最适pH值为高（即向碱性一侧移动）；用带正电荷载体制备的固定化酶的最适pH值比游离酶的最适PH为低（即向酸性一侧移动）4、一般说来，催化反应的产物为酸性时，固定化酶的最适pH值要比游高酶的最适PH低一些；产物为碱性时，固定化酶的最适pH值要比游离酶的最适pH值高一些。5、固定化酶的底物特异性变化与底物分子量的大小有一定关系。名词解释1、交联法2、载体活化3、固定化细胞。简答题1、 什么是固定化酶

21、？有何显著优点？2、 请举例说明固定化（酶、细胞、原生质体）技术的应用答案填空题1、吸附法、包埋法、结合法、交联法和热处理法等。名词解释1、交联法：借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。2、载体活化：要使载体与酶形成共价键对酶进行固定化，必须首先使载体活化，即借助于某种方法，在载体上引进一活泼基团。然后此活泼基团再与酶分子上的某一基团反应，形成共价键。3、固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞。简答题1、什么是固定化酶？有何显著优点？固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。固定化酶既保持了酶的催化特性

22、，又克服了游离酶的不足之处，具有增加稳定性、可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显著优点。2、略第七章 酶非水相催化 测试题判断题1、有机溶剂往往会使酶变性失活，因此只有在水溶液中酶才有催化活性。2、在有机介质中，由于酶分子活性中心的结合部位与底物之间的结合状态发生某些变化，致使酶的底物特异性发生改变。3、许多酶在有机介质中的热稳定性比在水溶液中的热稳定性更好。4、目前世界上化学合成药物中的40左右属于手性药物。在这些手性药物中，大多数仍然以外消旋体形式使用。5、常用的消炎解热镇痛药萘普生(Neproxen)的两种对映体中，S (+)-萘普生的疗效是R-()-萘普生疗效的28倍。6、镇静剂

23、反应停的S-构型有镇静作用，R-构型也有镇静作用，但疗效甚微。7、一些消旋体药物可以在有机介质体系中用酶法进行拆分，获得单一对映体。 名词解释1、酶的对映体选择性2、手性化合物第八章 酶定向进化 复习题一、填空题：酶基因随机突变的方法有：_、_、_。二、名词解释：酶定向进化 易错PCR技术三、简答题：1酶定向进化的特点？ 2.酶随机突变的三种方法是什么？请解释并比较分析。3.举例说明酶定向进化技术的应用。第九章 酶反应器 复习题各种酶反应器及其特点反应器类型适用的操作方式适用的酶特点搅拌罐式反应器分批式,流加分批式连续式,游离酶固定化酶反应比较完全，反应条件容易调节控制。填充床式反应器连续式固

24、定化酶密度大，可以提高酶催化反应的速度。在工业生产中普遍使用。流化床反应器分批式流加分批式连续式固定化酶流化床反应器具有混合均匀，传质和传热效果好，温度和pH值的调节控制比较容易，不易堵塞，对粘度较大反应液也可进行催化反应。鼓泡式反应器分批式流加分批式连续式游离酶固定化酶鼓泡式反应器的结构简单，操作容易，剪切力小，混合效果好，传质、传热效率高,适合于有气体参与的反应。膜反应器连续式游离酶固定化酶清洗比较困难 喷射式反应器连续式游离酶通入高压喷射蒸汽，实现酶与底物的混合，进行高温短时催化反应，适用于某些耐高温酶的反应简答题：P240复习题1、2、5第十章 1 酶在医药方面的应用 测试题一、 填空

25、题1、指示肝功能异常的常用酶有：_、_、_。2、_酶可以检测癌细胞。3、治疗消化不良、食欲不振的酶有：_、_、_。4、具有抗癌作用的酶有：_、_、_、_。5、_酶可以治疗各种出血。6、_酶可以治疗龋齿。7、_酶可以溶血栓。8、_酶可以治疗白血病。9、_酶用于制造抗肿瘤人参皂苷。10、_酶可用于制造人胰岛素。二、判断题1、乳酸脱氢酶广泛存在于各种组织以及红细胞中，在正常情况下，血清中乳酸脱氢酶的含量很低，但是在肝癌、急性肝炎、心肌梗塞等疾病的患者血清中，该酶活力显著升高。2、蛋白酶可用于治疗多种疾病，是在临床上使用最早、用途最广的药用酶之一，它可作为消化剂、消炎剂并可用于治疗高血压。三、请写出以

26、下药品的酶法生产反应式6氨基青霉烷酸（6-APA）多巴四、分析说明题1、 请分析说明尿糖试纸检测尿糖的原理2、 绘图并说明血液透析装置及装置中酶法除去尿素的原理。3、 举两例分析说明酶在药物制造方面的应用价值。4、 请分析说明溶菌酶的应用价值5、 请分析说明SOD的应用价值答案 填空题1、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、胆碱酯酶2、端粒酶3、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶4、L-精氨酸酶、L-组氨酸酶、L蛋氨酸酶、谷氨酰胺酶5、凝血酶 6、右旋糖酐酶 7、溶纤酶 8、L- 天冬酰胺酶 9、D葡萄糖苷酶 10、无色杆菌蛋白酶请写出以下药品的酶法生产反应式1、6氨基青霉烷酸（6-APA）青霉素 青霉素酰化酶 6氨基青霉烷酸（6-APA）2、多巴酪氨酸 酪氨酸酶 多巴邻苯二酚丙酮酸氨 酪氨酸酶 多巴分析说明题4、溶菌酶主要