血液学及血液学检验教案docx.docx

1、血液学及血液学检验教案docx2005年级检验专业 课程：血液学及血液V检验 2008年8月23 口授课形式 理论 授课时数2小时 授课日期2008、9、2中心课题造血器官教学目的 掌握出生后造血、骨髄造血，骨髄、脾造血、滤血的关系 熟悉胚胎期造血了解血液学概况教学中重点、难点和关键重点：骨髓造血难点：脾与滤血的关系教学过程及主要教学内容、方法、时间分配内 容方法时间组织教学清点人数起立上课5分复习旧课 教师H我介绍导入新课 第一篇：绪论15分授课要点；第二篇：造血检验第三章：造血检验的基础理论 笫一节造血器官一、 胚胎期造血器官（一）中胚叶造血（二）肝造血二、 出生后造血器官（一）骨髓造血（

2、二）淋巴造血多媒体10分15分20分20分总结新课造血器官3分布置作业 (指出重点)名词：血岛RBC造血岛、造血器官 2分脾脏是怎样滤血的? 北华大学医学检验学院 任课老师：高丽君第一篇 绪论第一章 血液学概述及发展史第一节 血液学概述血液学(hematology)是医学科学一个独立分支，以血液及造血组织为研究对彖。 包括血细胞形态学新领域：血细胞生理学 血细胞生物学血液生化学 血液分子生物学血液免疫学遗传、流变学临床血液学(clinical hematology)以疾病为研究对彖，是基础理论与临床实 践紧密结合的综合性临床学科。重点研究 原发血液病：白血病 再障 血友病 继发血液病：肝、肾等

3、疾病引起血液学异常。新动态：利用分子标志物对白血病进行免疫学分型和血栓前状态诊断。 血液学及血液学检验(hematology and hematologic examanations)以血液学 理论为基础，以血液病为研究对象，以检验方法为手段，创建了理论、检验疾病 相互结合，紧密联系的新体系。故三个学科均属于血液学范畴，只是侧重点、分工、研究对象有所不同。第二节 血液学发展史屮国古代早在黄帝内经中即有关于血液记载，但系统科学研究开始于显 微镜问世之后。镜下可观察到红细胞、白细胞、及血小板三种有形成分，无形成 分则指血浆。一、血细胞的认识血细胞包括红细胞与门细胞。血细胞形态学是血液学研究一个重要

4、组成部 分。染色技术不断改进，血细胞形态观察更加清晰。19世纪小期开始了解骨髓, 血细胞产生于骨髓，成熟后进入外周血。特殊显微镜：暗视野显微镜、位相显微镜、偏光显微镜、干涉显微镜、电子显微 镜。(-)血细胞数量检测手工：血细胞计数、血红蛋口定量、血细胞分类。机器:1953年，美国库尔特发明第一台血细胞自动计数仪。现已有各种半、全 自动分析仪相继问世，广泛应用于临床。(2)红细胞认识18711876年开始认识红细胞，了解到红细胞具冇携氧能力，后知红细胞 可使二氧化碳转化为碳酸根离子，与酸碱平衡有密切关系。红细胞ABO血型发 现后，输血才安全开展。20世纪40年代血库建立起来。(3)白细胞的认识1

5、、粒细胞18921930年，已知屮性粒细胞具冇趋化、吞噬和杀菌作用。1986年后知 杀菌依赖于细胞内的过氧化物酶。嗜酸、嗜碱细胞也有了一定的了解。2、 单核细胞1910年后其吞噬功能才有报道。当吋称之为清道夫（细菌、寄生虫、较大 真菌），依赖于内部溶酶体。单核巨噬细胞系统（单核细胞短暂存在于血液中， 后进入各种组织转变为组织细胞，吞噬物质后称为吞噬细胞。3、 淋巴细胞与浆细胞以前认为淋巴细胞为淋巴系最末一代细胞，而现在认为受抗原刺激后增殖分 裂。淋巴细胞虽形态相似，但功能却显著不同。TLC 杀伤、辅助、抑制诱导B-LC受抗原刺激形成浆细胞，分泌免疫球蛋白。二、血栓与止血的认识1842年发现血小

6、板1882年发现止血作用，后知血小板具粘附聚集功能。 60年代“瀑布学说”凝血机制，现对PC、PS、ATIII等也进行了深入研究。分 子标志物的检测成为诊断血栓前状态的重要依据。第二章 血液学与临床关系第一节 血液学与疾病关系（）非血液系统疾病合并血液病（二） 血液病合并非血液系统疾病（三） 血液制品临床应用第二节 血液学与检验的关系血液学检验是临床检验一个分支，利用各种实验室技术，对血系及非血系疾 病诊治研究。检验医师应除掌握血液方面各项实验外，还应具有一定血液病临床 知识，对疾病能初步诊断。第二篇 血细胞形态学检验第三章 造血基础理论第一节 造血器官造血器官：能够生成并支持血细胞分化、发育

7、、成熟的组织器官称为造血器官 （hematopoitic organ） o如骨髓、肝、脾及淋巴结等。造血： 造血器官生成各种血细胞的过程称为造血。正常人在发育不同时期造血器官不断转移。造血分为胚胎期造血和岀生后造血。 一、胚胎期造血（一）中胚叶造血期（人胚2周末一9周）又称卵黄囊造血期。造血细胞产生于屮胚层卵黄囊壁上的血岛，有的可移行 到体蒂和胎盘等处.1、 血岛：卵黄囊壁上的胚外中胚层是一些未分化的、具有自我更新能力的 细胞，这些细胞聚集成团称为血岛。血岛是一个实心的细胞团，细胞增 殖、分化出现间隙，周围细胞形成血管内皮细胞。2、 人体内的唯一的血管内造血。3、 产生巨幼型幼稚红细胞：不能脱

8、核冇三种 Hb： Hb PortlandHb gower IHb gower II 和少量 Hb F第六周后，逐渐被肝造血代替。（二） 肝脏造血期（人胚6周一7个月）1、 肝造血：由卵黄囊血岛造血干细胞迁移至肝脏所致。造血以红细胞为主，4个月后可形成粒细胞。4个月造血最旺盛。2、 脾造血：（人胚3个月一出生后）接受肝造血细胞最初产生RBC粒细胞5个月LC、Mo出生后LC、Mo3、 胸腺造血：6周7周产生LC,后诱导分化T-LCo4、 淋巴结造血：开始产生RBC, 4个月后产生LC和浆细胞。（三） 骨髓造血期（人胚5个月一出生后）骨髓腔五个月时形成，提供造血环境。从此骨髓造血功能逐渐增加，肝 脾

9、造血功能逐渐减弱。二、出生后造血器官包括骨髓造血和淋巴器官造血。正常情况下，出生后造血主要是骨髓， 其次是淋巴器官。（一）骨髓造血骨髓是出生后正常情况下唯一产生粒、红、血小板的场所，也产生淋巴 细胞和单核细胞。骨髓腔内充满骨髓，分红、黄骨髓。红骨髓有活跃的造血功能，黄骨髓则无。 人类出生后至四岁，全身骨髓均为红骨髓。以后随年龄增长，红骨髓向心性 减少，被脂肪细胞取代，称为黄骨髓。成年后，红骨髓仅限于扁骨、短骨、 长骨近心端。1、 红骨髓的构造由结蒂组织、血管、神经及实质细胞组成。血管系统 血窦 内有成熟血细胞 造血索各阶段造血细胞按一定部位分布2、 造血细胞分布（岛状分布）1红细胞造血岛概念：

10、骨髓内各阶段幼稚红细胞成群存在，其屮心为12个巨噬细胞，此结构 称红细胞造血岛特点：a岛中央12个巨噬细胞，周围同心圆排列不同发育阶段幼红细胞，内 层较外层幼稚。b中心巨噬细胞的胞浆发出许多膜状突起，绕在幼稚红细胞表面起看护 作用，称“mirse”细胞，它可供应幼稚红细胞营养、铁及储存铁， 吞噬红细胞的裸核、滤血。c位于血窦附近，成熟后进入血窦。2粒细胞造血岛中心有一个巨噬细胞，远离血窦，位于造血索中央，分化到晚幼粒后，移向血窦进入血流O3巨核细胞贴血窦壁，胞浆伸入窦内，血小板成熟后直接入血。4单核细胞散在于造血细胞Z间，小动脉附近。5淋巴细胞以淋巴小结形式散在分布于造血索中。（二）淋巴造血1

11、、 胸腺：产生TLC,出生后功能终止，青春期后萎缩。2、 淋巴结：出生后负责淋巴细胞的第二次増殖，是造淋巴细胞的器官。3、 脾结构：被膜、实质部分实质红髓脾窦 脾索白髓脾动脉周围淋巴鞘月卑小结 边缘区红白髓过渡区域功能：出生后脾脏只产生淋巴细胞，也是其接触抗原后再增殖场所，同时 可对血液起储存滤过作用。教 案 用 纸 （一） No： 2授课形式 理论 授课时数2小时 授课口期2008、9、3中心课题造血干细胞、祖细胞教学目的 掌握造血干细胞概念及特点，祖细胞熟悉髄外造血、造血祖细胞、更新的造血理论。 了解骨髄间质细胞，研究造血干细胞、祖细胞意义。教学中重点、难点和关键重点：造血干细胞难点：更新

12、的造血理论教学过程及主要教学内容、方法、时间分配内 容方法时间组织教学 清点人数-起立上课1分2005年级检验专业 课程：血液学及血液学检验2008 年 X 月 25 FI复习旧课造血器官9分导入新课 三、髄外造血5分授课要点；第二节造血干细胞、祖细胞一、 造血干细胞(-)概念及特点(二)更新的造血理论二、 造血祖细胞三、 骨髓间质细胞四、 研究造血干细胞、祖细胞意义多媒体15分15分20分20分总结新课造血干细胞、祖细胞3分布置作业 (指出重点)名词：造血干细胞、祖细胞、骨髓间质细胞2分造血T细胞的特点是什么？更新的造血理论是什么？北华大学医学检验学院 任课老师：高丽君三、髓外造血1、概念：

13、岀生后两个月后，在某些应激状态下，骨髓以外组织或器官重新参与粒、红、巨三系细胞的产生过程。2、特点：6多发于婴幼儿，身体发育快，骨髓腔发育慢，代偿能力小。2成人在恶性贫血、口血病时可能出现某一部位造血灶。3血片上易见幼红、幼粒细胞。第二节造血干细胞、祖细胞胚胎干细胞(embryonic stem cell ,ESC)是指从早期胚胎的内细胞团中分离 出来的具有高度分化潜能的细胞系，它具有高度分化潜能，可以无限增殖并分化 成为全身多种细胞类型，从而可以进一步形成机体的任何组织和器官，因此也称 全能干细胞。胚胎干细胞组织干细胞血液组织干细胞造血干细胞非造血干细胞间逅干细胞I血管干细胞一、造血十细胞(

14、hematopoietic stem cell, HSC)(一)概念：造血组织中的一类具冇高度自我更新能力，又冇向各系祖细胞 分化的潜能，在造血组织屮含量极少，形态上难以辨认的类似于小淋巴细胞样的 一群异质性细胞群。其无形态特点，只能通过细胞培养知其存在，外部形态和淋 巴细胞相似。特征：1、多数细胞处于Go期或静止期。间期细胞有三种去向：分化进入分裂期 进入静止期BP： Go期2、大多数表达 CD34 和 Thy 1 (CD34+ Thy-1+). CD34是造血干、祖细胞分选的标志。Thy-1 (CD90)比CD34出现更早，介导负增殖信号。3、 低表达或不表达CD38和HLA-DRo4、

15、缺乏系特异性系列抗原表面标志。(-)造血理论的更新1、 内容各种血细胞均起源丁造血多能干细胞2胚胎期各造血器官的造血功能，是由于卵黄囊血岛产生的造血干细胞, 通过血流依次传递种植而来的。2、 实验：脾集落形成 1961年a小鼠x线全身照射骨髓造血功能衰竭而死亡b小鼠x线照射(小部分骨髓未照射)生存形成脾结节骨髓 中存在血细胞祖先c小鼠x线全身照射，再将另一鼠骨髓或血液生存说明造血干细 胞存在以上实验说明骨髓及血液中存在血细胞祖先。在特殊情况下，此种细胞可 形成脾结节，称为脾集落形成单位。二、 造血祖细胞(hematopoietic progenitor cell HPC)概念：指一类曲造血干细

16、胞分化而來，但部分失去自我更新能力的过渡性、增殖 性细胞群。特点：有单向和多向分化能力分为：红、粒、单、巨核系祖细胞，其对血细胞数量起主要的放大作用。三、 骨髓间质干细胞i间质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)是骨髓基质细胞的祖细胞,进一步形成的骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成成分，其在造血调控屮起十 分重要的作用。MSC具冇干细胞的共性，即具有多向分化潜能和自我更新能力，可在不同 环境中分化成不同的种类的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和血管内皮 细胞等。现有研究表明：骨髓间质干细胞可在一定条件下向心肌细胞转化，且移 植于梗死心肌后与宿主细胞之间形成缝隙连接

17、，成为有功能的心肌细胞，从而修 复心肌组织。目询临床治疗应用的骨髓单个核细胞，是包含骨髓间质干细胞在内 的一组混合细胞群。MSC大约占骨髓有核细胞的0.001%0.01%,在无造血细胞和分化刺激存在的情况下贴壁生长。MSC屮大约冇20%的G0期细胞，表明其强大的增殖能力。 作为干细胞中的一种MSC具有自我更新能力和多向分化能力，可形成多种组织细 胞。MSC在体外经20次25次传代后，其表型和分化潜能不会发生明显的改变。MSC是骨髓造血微环境的重要成分，对造血起十分重要的作用。由于它具有向骨、软骨、脂肪、肌肉及肌腱等组织分化的潜能，因而利用它进 行组织工程学研究有如下优势：（1） 取材方便且对机

18、体无害。间质干细胞可取自自体骨髓，简单的骨髓穿刺 即可获得。（2） 曲于间质干细胞取自自体，出它诱导而來的组织在进行移植吋不存在组 织配型及免疫排斥问题。（3） 由间质干细胞分化的组织类型广泛，理论上能分化为所有的间质组织类 型：将它分化为骨、软骨或肌肉、肌腱，在治疗创伤性疾病中具有应用价值。将它 分化为心肌组织，则有可能构建人工心脏。四、研究干细胞、祖细胞意义1、 干细胞移植2、 研究某些血液病的发病机制：再障3、 白血病的疗效预后等4、 约敏实验教 案 用 纸 （一） No： 32005年级检验专业 课程：血液学及血液学检验 2008年8月25 口授课形式 理论 授课时数2小时 授课日期2

19、008、9、5中心课题 血细胞的发育成熟、造血调控教学目的掌握血细胞的发育规律、造血微环境概念及组成；熟悉造血调控；了解细胞凋亡。教学中重点、难点和关键重点：造血干细胞难点：更新的造血理论教学过程及主要教学内容、方法、时间分配内 容方法时间组织教学清点人数起立上课1分复习【口课 造血T细胞、祖细胞9分导入菊f课 第三节血细胞的发育成熟5分授课要点 血细胞的增殖、成熟、发育规律第四节造血微环境一、 骨髓微血管系统二、 基质细胞及其分泌的因了 第五节造血调控一、 微环境调控二、 基因调控三、 体液调控第六节细胞凋亡多媒体15分15分25分15分丿总结新课造血干细胞、祖细胞3分布置作业（指出重点）名

20、词：造血微环境、细胞凋亡 2分血细胞的发育规律是什么？正向和负向调节造血的因子有哪些？匕华大学医学检验学院 任课老师：高丽君笫三节 血细胞的发育与成熟一、 血细胞的增殖增殖方式：有丝分裂无丝分裂血细胞与其他细胞一样，是通过分裂方式增殖的，但只有一定的幼稚细胞才有分 裂能力。发育到一定阶段后失去増殖能力。大多数血细胞増殖方式是有丝分裂。 分裂相出现常见于早幼及小幼阶段细胞，晚幼阶段失去此能力。正常情况下，骨髓中分裂相占有核细胞1%,增高见于异常现象，外周血屮不见 分裂相。二、 血细胞的成熟1、命名六大系统三个阶段系 系系系胞 系系核巴核细 红粒单淋巨浆多能干细胞各系祖细胞2增殖特点（1） 红系

21、原 中 经4一5次分裂，最终一个原红可形成3264个成熟红细胞（2） 巨核系原巨幼巨产板巨裸核3血细胞发育成熟一般规律血细胞发育是一个连续过程，人为划分，二级Z间划分下一阶段。疾病时会出现核浆发育不平衡。如：老核幼浆IDA,老浆幼核MA规律： 胞体原f幼一成熟大f小核浆比 大一小胞浆量少f多染色兰一红深蓝一浅蓝颗粒无一冇红无非特异f特异大一小圆一凹陷一分叶 圆、椭圆不变 人- 小- 无 细致一粗糙 疏松f致密 淡紫一深紫胞核核大小核形粒系 淋、浆 红系 核染色质色不明显f明显显著可见一模糊一不见核膜核仁第四节 造血微环境(hematopoitic microenvironment,HIM)概念

22、：指由骨髓基质细胞(stromal cell)和细胞外基质(extracellular matrix,ECM) 构成。包括微血管系统、末梢神经、基质及基质细胞所分泌的细胞因子，是造 血干细胞赖以生存的场所。一、 骨髓微血管系统1、 骨髓血管特点动脉血进入髓腔后分支一一毛细血管注入膨人的静脉窦沟通成网 汇成集合窦一一注入中心静脉静脉窦与集合窦统称血窦，窦内是成熟细胞，窦间为造血索，具有造血功能。2、 血管与造血1血窦壁为连续性细胞构成，血细胞通过时形成临时通道。2窦壁细胞起支架作用和调节造血量的作用。3骨髓微血管调节进出微血管各种成分(营养、能量、酸碱度)二、 基质细胞及其分泌的因子造血微环境的

23、主要成分是基质细胞，能粘附造血干细胞，并直接支持其增殖分化, 又町分泌细胞因子，是造血细胞生长所依赖的。1、 基质细胞是由成纤维细胞、内皮细胞 脂肪细胞巨噬细胞等多种细胞构成，是造血微环境的主要成分。能粘附造 血干细胞并支持和调控其增殖和分化。有分泌细胞因子的作用。2、 细胞外基质包括胶原层粘连蛋口纤维结合蛋白这些蛋口多糖、氨基葡聚糖与粘附造血干细胞有关。3、基质细胞分泌的细胞因子GMCSF （粒单集落刺激因子）SCF （stem cell factor 干细胞因子）Ils （白细胞介索）LIF （Leukemia inhibitory factor 口血病抑制因 了）TGF-P （化生长因子

24、）这些细胞因子不仅直接作用于干细胞、祖细胞，也作用于基质细胞本身，改变增殖分泌状态、诱导其他因子 生成。第五节 造血的调控血细胞不断衰老死亡，耍求骨髓不断生成血细胞，以保持其数目恒定。血细 胞的生成主要靠造血祖细胞増殖、分化。当造血严重障碍，单靠祖细胞增殖不能 满足需要时，多能干细胞才增殖分化。这就需要机体有严密调节系统。一、 微环境调控在多种因素调控屮，微环境调控山冇重要地位。造血微环境屮基质细胞特异、 非特异地粘附多能干细胞，多能干细胞受刺激后进入细胞周期，作出增殖反应， 同时还应有单向分化因子作用，方可完成单向分化。骨髓基质细胞产生造血因子, 又具有细胞因子受体，可聚集外部的因子于局部，

25、形成不同高浓度因子分布区二、 造血的基因调控造血调控是一个多基因调控过程，主要通过细胞内外的一些信号传递（包括 信号传导、基因表达、蛋白合成等多个环节）启动或关闭一系列相关基因，正、 负调控基因表达产物参与对造血的止向、负向调控。机制：1、诱导或抑制细胞因子及其受体的表达2、参与造血细胞凋亡的调节等方式参与调控。原癌基因（proto-oncogen）如 ras、c-myc c-kit c-abl bcl-2这些原癌基因在化学、物理、生物、等因素的作用卞，发生点突变、染色体 重排、基因扩增等途径引起结构或调控的异常从而有致癌性。抑癌基因：P53、WT1、PRB、NF1介导细胞负增长、诱导细胞凋亡

26、。三、 造血的体液调控参与造血调控的细胞因子可分为二类：30多种促进造血细胞增殖、分化的因子称为造血生长因子CSF （集落刺激因子）IlsEPOTPO FL抑制造血的因子包括 TGF-PTNF-aINF- Y PGI2（一）造血的正向调控 造血细胞生长因子分为二类：1)主要作用丁早期造血干细胞的(earli-acting-factor)1、 干细胞因子(SCF)：是癌基因ckit产物的配基,又称钢因子(steel factor)产生细胞：基质细胞 12q22成纤维细胞癌细胞作用：1)与IL2或IL3协同刺激干细胞生长2)与IL3协同刺激祖细胞生长3)与EPO协同刺激BFU-E形成4)与IL7协

27、同刺激前B细胞生长5)与G-CSF协同刺激CFU-G形成6)与GMCSF、IL6协同刺激巨核集落形成等2、 FL 19ql3基质细胞合成只作用于早期干、祖细胞增殖、分化，对定向、成熟的几乎不起作用。FL可动员干、祖细胞由骨髓进入外周血及脾，可有效升高外周血CD34细 胞含量。3、多系集落刺激因了或IL3： 5q23-31 T细胞或肥大细胞生物效应是在细胞发育的早期作用丁造血细胞，刺激生长和分化，在体内捉高 中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和网织红细胞水平。2)主要作用于晚期造血干细胞的1、 促红细胞生成素(EPO erythropoietin)主要由肾脏产生，属一种糖蛋白，现人工可

28、制成。作用：多能干细胞受EPO的刺激，产生红系祖细胞及以后的细胞。干细胞培养 后，加入EPO可获得两种集落，即红细胞爆发集落形成单位BFU-E和红细胞 集落形成单位CFU-Eo前者较后者集落大，可爆散成后者。二者区别：前者史接近丁造血干细胞，红细胞集落形成单位介于前者与原红之间, 属红系祖细胞。综上可知，EPO对红系各阶段细胞都有作用，促使幼红细胞成熟，利于脱核， 及早进入血液。2、 集落刺激因了(CSF colony stimulating factor)GCSF促进CFUG形成中性粒细胞集落2MCSF促进CFUM形成单一巨集落3GM-CSF是一个多集落刺激因子，但以形成粒细胞一单核巨噬细胞

29、集落为 主。3、 巨核细胞集落刺激因子(MegCSF)能促使形成巨核细胞集落，也可在TPO协助下促使巨核细胞生成血小板。 造血细胞生长因子共性：均为糖蛋口2具有高效生物活性3经刺激分泌4口J由多种细胞产生4、 口细胞介素(interleukin)白细胞介素也参与调节，屈于淋巴因子主要对TB淋巴细胞成熟、活化进行调节，并在造血中起协同作用。5、 白血病抑制因了 22ql2抑制白血.病细胞HL60、U937集落形成促进胚胎干细胞增殖6)其他：血小板衍生生长因子胰岛索类生长因子等(2)造血的负向调控造血生长因了刺激细胞增殖和分化的作用可以被另外一些细胞因了所抑制，这 些因子称为造血的负向调控因子。1

30、、 转化生长因子B(TGFB) 大多数止常细胞和肿瘤细胞分泌作用：阻止细胞进入S期，维持干、祖细胞的非增殖状态对干细胞直接抑制对祖细胞增殖高度选择性抑制抑制多种细胞因子产生的正向调节信号2、 肿瘤坏死因子u (TNF-a ) 单核、巨噬细胞产生与其他因了协同抑制造血3、 肿瘤坏死因子a、B (TNFa、B) T细胞、NK细胞产生。作用同上4、 干扰素(a、B、)：抗病毒，抑制细胞生长、分化5、 趋化因子6、 其他：PGI2等四、神经、体液因子的调控神经和体液的调节作用也是较有意义的，在应激状态下，这种调节是一个造血 捷径。三种体液因子：B 肾上腺素能兴奋剂胆碱能受体兴奋剂雄激素第六节 细胞凋亡细胞凋亡(apoptosis)是