常用内分泌试验方法.docx

1、常用内分泌试验方法第一节：腺垂体和神经垂体生理功能检查一 生长激素（GH）测定 1原理：GH由腺垂体GH细胞分泌，正常情况下GH呈脉冲式分泌，大部分是在夜间睡眠时分泌，受下丘脑神经内分泌细胞分泌的生长激素释放激素和生长抑素调节。 2标本采集：早晨安静状态下，空腹不抗凝静脉血2ml。 3正常参考值 (化学发光免疫分析法)： 空腹基础状态下 0.065.0g / L (0.1613.0 mIU / L) 4注意事项和影响因素： GH减少的因素有肥胖、甲减、雌激素、生长抑素、脂肪酸、急性葡萄糖负荷。 GH增加的因素包括抑制生长抑素、受体阻滞剂、多巴胺能激动剂、胆碱能激动剂、受体激动剂、生长激素释放激

2、素、低血糖，此外，大手术、紧张、胰高血糖素、输入氨基酸等也可引起GH增加。 5临床应用和分析： 评价腺垂体功能。 用于 GH瘤引起的肢端肥大症或巨人症的诊断和疗效观察，由微腺瘤引起的肢端肥大症，GH水平不一定升高，异位肿瘤分泌的GH或生长激素释放激素（少见）可引起GH水平升高。 正常GH空腹基础值较低，与GH分泌缺乏有重叠，了解GH分泌减少和储备情况需要做激发试验，注意排除各种因素对生长激素分泌的影响，如药物、紧张、应激等。生理状态下，GH呈脉冲式分泌，这种分泌与垂体、下丘脑、神经递质以及大脑结构和功能的完整性有关，有明显个体差异，并受睡眠、运动、摄食和应急的影响，故单次测定血GH的水平不能真

3、正反应机体GH分泌情况，需要结合GH刺激试验诊断。经典的GH刺激试验包括生理刺激试验(睡眠、运动)和药物刺激试验。 3.1生理刺激试验正常人于沉睡时或于进食、运动以后血清GH较原来增加，故可利用生理因素做l临床筛查试验。 3.1.1运动刺激试验：若小儿能合作，选择运动刺激最为方便，即令患儿空腹34 h后，先安静30 min，然后平地散步15 min，接着上下跑一层楼梯(约20级梯)上下跑动1020个往返(5 min)。运动前抽血，运动后再抽血。80%90%的正常儿童于运动后血浆GH浓度高峰56/g/L，垂体性侏儒症患儿往往不增加或3 g/L，可进一步作确诊试验。 3.1.2深睡眠刺激试验：深睡

4、眠试验必须在脑电图的监测下，于睡眠的第三期或第四期采血测GH才能得到正确的结果。 运动试验必须达到规定的强度，才能产生促进GH分泌的作用，而且由于年龄和运动强度的差异，有效率仅为70%左右。睡眠试验要求一定的条件和设备，因此生理试验在儿童中难以获得可靠的诊断依据。3.2药物刺激试验是借助胰岛素、精氨酸、可乐定、胰高血糖素、左旋多巴、吡啶斯的明等药物可促进GH分泌而进行的。为排除外源性因素的影响，刺激试验前应禁食、卧床休息，于试验前放好留置针头，在上午810点进行。 3.2.1盐酸精氨酸：作用机制为兴奋肾上腺素能受体，促进生长激素释放激素(GHRH)分泌。盐酸精氨酸0.5 g/kg(最大量不超过

5、30 g)，按10%浓度溶于注射用水中，于基础状态下静脉滴注30 min以上，滴注前及滴注后30，60，90，120 min采血。本试验一般无副作用，但也可有迟发性低血糖。 3.2.2胰岛素：作用机制为诱发低血糖，促进GH分泌，抑制生长激素释放抑制激素(GHRIH)分泌。胰岛素0.050.1 U/kg.加生理盐水12 ml静脉推注，注射前及注射后30，60，90，120 rain采血，分别测定血糖和GH，当血糖下降至40 mg/cU或为空腹血糖值的1/2时，刺激生长激素的分泌。此试验在年幼儿童易诱发低血糖抽搐，试验时必须有医务人员密切观察并及时处理低血糖反应。 3.2.3左旋多巴：机制为介导神

6、经递质多巴胺能途径的兴奋或促进GHRH释放。左旋多巴10 ms/kg顿服，采血时间为0、30、60、90、120 min。副作用有恶心、呕吐、头痛和头晕。 3.2.4可乐定：机制为兴奋a肾上腺素能受体，促进GHRH分泌。可乐定4 g/kg或0.15 mg/m2顿服，采血时间为0、30、60、90、120 min。副作用有低血压和疲乏。 3.2.5吡啶斯的明：机制为减少GHR/H分泌量，激发GH分泌。吡啶斯的明2 ms/kg口服，采血时间为0，30，60，90，120 min，副作用为腹痛、呕吐、头疼、面部和四肢肌肉震颤。 3.2.6 GHRH：可用来区别GH缺乏系下丘脑性或垂体性，垂体性者GH

7、无明显升高反应，而下丘脑性者则GH显著升高。机制为促进GH分泌。12 g/kg，正常儿童在注射GHRH后30min出现GH峰值，而生长激素缺乏症(GHD)的患儿出现峰值时间延迟。副作用为颜面潮红。 3.2.7黄体生成素释放激素(LHRH)兴奋试验：对骨龄超过12岁者可作LHRH兴奋试验。 3.2.8生长激素释放肽(GHRP)：GHRP在体内可促进GH分泌，对其它垂体激素的分泌几乎没有影响。 由于各种药物激发GH反应途径不同，各种试验的敏感性和特异性有差异，不同的刺激试验间都有一定的假阳性，任何一种激发试验均有15%失败的可能性，故对同一患者应采用至少两种作用途径不同的药物进行激发试验才能作为判

8、断的结果。一般认为两种试验GH峰值均5 g/L为GH完全缺乏；59 g/L为部分缺乏；10/g/L即为GH不缺乏。 3.2.9多种药物联合激发试验：一般认为两种药物激发试验不能连续进行，这样需多次静脉取血给患儿带来诸多不便。近年来有作者报道可采用联合激发试验。联合激发试验的准确度、精确度明显的高于单药激发，敏感度与单药相近，可减少患儿的采血次数和减轻痛苦。胰岛素、黄体生成素释放激素、可乐定垂体复合刺激试验：采用胰岛素0.075 U/kg、黄体生成素释放激素2.5 g/kg静脉注射，可乐定100g/m2口服复合刺激，在0、15、30、60、90 min采血。吡啶斯的明与左旋多巴联合激发试验：吡啶

9、斯的明1 ms/kg，左旋多巴10 mg/kg同时口服，于O、30、60、90、120 min静脉采血测GH。 生长激素激发试验在矮小儿童的诊断中具有重要价值，在临床中一直被广泛应用。但药物刺激不是生理过程，存在一定的缺陷，如假阳性反应、假阴性反应、可重复性差、部分药物刺激试验有一定的副作用。目前国内外将10 g/L作为GHD的诊断阈值，但这一标准是人为制定的，在正常儿童和部分GHD患儿之间存在GH峰值重叠现象，约1525%正常儿童对GH刺激试验的反应10 gg/L，而被误诊为GHD。部分GH轴功能异常的患儿也可出项刺激试验结果正常，因此刺激试验在一定程度上也缺乏准确性甚至与临床相矛盾。目前还

10、没有一个诊断生长激素缺乏症统一的“金”标准。近年来很多研究都在寻找儿童矮小症的最佳诊断方法，如生长激素-胰岛素样生长因子轴功能的检查。胰岛素样生长因子-I(IGF-I)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)与GH测定的综合分析可近一步提高诊断的准确度。血循环中IGF-I和IGFBP-3分泌模式呈非脉冲性分泌，昼夜波动少，在血中浓度稳定，并与GH水平呈一致关系，因此单次测定IGF-I和IGFBP-3能较好的代表内源性生长激素分泌状态，目前认为刺激试验联合血清IGF-I和IGFBP-3检测是临床诊断生长激素缺乏症的最佳手段。 正常人IGF-I和IGFBP-3受年龄和性别的影响，应根据不同年

11、龄和性别建立正常参考值范围。如IGF-I和IGFBP-3降低，GH刺激试验反应10g，应疑为生长激素不敏感综合症(GHIS)，需进行IGF-1生成试验，进一步除外生长激素受体缺陷(GHRD)和生长激素神经分泌功能障碍。二 胰岛素低血糖兴奋试验 1原理：静点胰岛素可以使血糖水平下降，导致低血糖，低血糖可以通过兴奋生长激素释放激素和抑制生长抑素使生长激素（GH）分泌增加，同时可刺激促肾上腺皮质激素的分泌，使皮质醇水平增高。低血糖对下丘脑-垂体是一种非常强的应激因素。正常人当血糖降至2.2mmol/L以下时，即显著兴奋GH、ACTH-皮质醇、TSH和儿茶酚胺的分泌。本试验是利用一种标准量的胰岛素引起

12、低血糖，以检测GH的储备功能，亦同时测定垂体-肾上腺轴、垂体-甲状腺轴的功能。2试验方法：在过夜空腹状态下，静注常规胰岛素0.0750.1 U/ 公斤体重，有垂体功能低下的病人0.05U / 公斤体重，有（肥胖、肢端肥大症、柯兴综合征、糖尿病）的病人0.150.3 U/ 公斤体重，分别在0、30、60、90和120分钟抽血查血糖、GH和皮质醇，血糖要求下降到空腹血糖的50%以下，或降至50mg/dl（2.8mmol/L，部分观点认为2.2mmol/L阳性率更高），或有低血糖的症状。如不能达到上述要求，需要增加胰岛素用量，重复试验。当低血糖出现时抽血测ACTH。 3正常参考值：注射胰岛素后任何一

13、次GH水平上升超过5g / L以上，或GH水平大于10g / L。正常值正常人血清GH升高5ug/L，GH峰值7.5ug/L，提示GH严重缺乏。4注意事项和影响因素： 禁用于有癫痫和已知有心脑血管疾病的病人，在试验的全过程对病人进行监护，并准备好50%葡萄糖，病人出现明显的低血糖时，在及时处理的同时继续采血。冠心病、癫痫，未经纠正的严重甲减和Addison氏病，糖尿病，空腹血糖8.3mmol/L者不宜作此试验。 有原发或继发性肾上腺皮质功能减退者需先补充生理剂量的肾上腺皮质激素，以免出现严重的低血糖。 注意排除其他应激情况和药物对GH和皮质醇的影响。（4）试验结束后，立即饮用20克葡萄糖水，然

14、后进早餐，如病人有垂体功能低下之可能，应加服强的松5mg，当天每4小时进餐一次。（5）试验过程中出现心绞痛、休克或意识丧失者，应立即终止试验，静注50%葡萄糖60ml（同时另臂抽血查血糖），如病人还不能恢复，静注胰升糖素0.5-1mg。试验期间最好心电监护脉搏，血压，神志变化。 5临床应用和分析： 用于怀疑腺垂体功能低下，特别是储备功能不足的病人，有10-20%的正常人可能有损伤反应。 肥胖、甲状腺功能异常、性腺功能低下、库欣综合征等可使反应迟钝。三 葡萄糖抑制试验 1原理：正常情况下高血糖可抑制生长激素（GH）分泌，而GH瘤自主分泌GH，不受高血糖抑制。 2标本采集：夜间禁食，早晨口服100

15、克葡萄糖，分别在基线、服糖后1小时、2小时取血，测GH，可在取血前事先留置肝素抗凝导管。 3正常参考值：在服糖后2小时GH 2g/ L。 4注意事项和影响因素：见GH测定。 5临床应用和分析：用于GH瘤的诊断和治疗后评价，GH瘤病人服糖后2小时GH5g/ L，但某些GH瘤病人服糖后GH水平可抑制到5g/ L，一些急慢性疾病和应激患者，GH不受抑制。四 催乳素（PRL）测定 1原理：PRL由腺垂体细胞分泌，主要受催乳素释放抑制激素的调节，许多因素可以影响 PRL的分泌。 2标本采集：空腹不抗凝静脉血2ml，病人要求在清醒、安静和没有紧张以及乳腺检查之前采血，为避刺激可于采血前1小时预先留置肝素抗

16、凝静脉导管。 3正常参考值 (化学发光免疫分析法)： 成年女性 1.925g / L 成年男性 2.517g / L 4注意事项和影响因素： PRL释放呈脉冲式分泌，存在一个与睡眠相关的波动，睡眠时PRL水平升高，醒后几个小时下降到最低点，因此，为避免睡眠醒觉时的高峰，建议在9am至中午采血，取三次血清PRL的平均值（每次间隔3060分钟）。此外，性别（女男）、乳头刺激、性交、紧张、运动、低血糖、全身麻醉、脱水和进食均是引起PRL升高的病生理因素。妊娠时PRL水平增加1020倍，分娩后降至正常（非哺乳状态下3周内），哺乳状态下PRL水平下降缓慢。 引起高PRL血症的药物因素有H2受体阻滞剂、雌

17、激素、三环类抗抑郁药、利血平、甲基多巴、氯丙嗪、甲氧氯普胺（胃复安）等。 垂体损伤、受压或阻断：垂体柄受压或断裂（外伤、手术、放疗等）、垂体侵润性疾病（结核、垂体肿瘤、结节病等）、垂体炎、空泡蝶鞍、动静脉畸形、脑积水可使PRL水平升高。 其他使PRL水平升高的因素包括肝脏疾病、肾衰竭、原发甲减、多囊卵巢综合征、肾上腺皮质功能减退、抽搐、胸部外伤和刺激。 5临床应用和分析：诊断PRL瘤以及疗效评定，注意排除其他原因引起的高PRL血症，一般肿瘤越大，PRL水平越高，PRL200g/ L时，PRL瘤的可能性很大。五 抗利尿激素（ADH）测定 1原理：ADH主要由视上核和室旁核合成，经神经垂体分泌，主

18、要受血液渗透压和容量的调节，作用于肾小管和集合管，促进水的重吸收。 2标本采集：空腹不抗凝静脉血2ml，或在禁水加压素试验开始时(基础)与注射加压素前分别采静脉血。 3正常参考值：基础状态 1-1.5 ng / L 。 4注意事项和影响因素： 血浆渗透压是生理情况下调节 ADH 分泌的主要因素，高渗和低血容量可刺激ADH分泌，此外，引起ADH升高的其他因素包括从卧位改为立位、老年人。 某些药物可刺激ADH释放，如尼古丁、吗啡、三环类抗抑郁药、长春新碱、环磷酰胺、安妥明、氯磺丙脲。抑制ADH释放的药物有苯妥英钠、氯丙嗪、乙醇等。 5临床应用和分析： 用于尿崩症的诊断和鉴别诊断，在禁水加压素试验，

19、部分性中枢性尿崩症病人禁水后ADH仍在低水平或轻微上升，原发性烦渴基础ADH水平低，常测不到，禁水后ADH升高到正常范围。肾性尿崩症基础ADH是增加的（一般达4ng/L以上）。 ADH还可用于异位ADH分泌综合征和ADH分泌异常综合征的诊断，在这些情况下，ADH是升高的。六 禁水加压素试验 1原理：正常人禁水后渗透压升高，血容量下降，刺激抗利尿激素（ADH）的分泌，结果尿量减少，尿渗透压升高，血渗透压保持基本不变。 中枢性尿崩症因缺乏ADH和肾性尿崩症对ADH不反应，禁水后仍排出大量低渗尿，血渗透压升高。ADH分泌能力完全或部分丧失引起的尿崩症分别称为典型尿崩症和部分尿崩症。禁饮加压素试验是鉴

20、别正常人、精神性多饮、部分性尿崩症和尿崩症的最重要的试验。试验的原理为，当长时间的禁饮后（16-18小时），ADH的分泌反应达到极限，表现为尿渗透压值达到平高，此时注射外源性ADH，正常人的ADH不能作出进一步的分泌反应，尿渗透压不再升高；而精神性多饮和部分性尿崩症有不同的反应，典型尿崩症有良好的反应。通过分析禁饮后血渗透压和尿渗透压及注射加压素后尿渗透压的相互关系，可将上述几种病理情况分开。2试验方法：禁水时间视病情轻重而定，一般在6小时或更长，试验前查体重、血压、血渗透压和尿渗透压，可同时采血测ADH，试验从清晨开始，禁水后每小时查体重、血压、尿渗透压和记尿量，当两次尿渗透压差30 mmo

21、l/(kgH2O)时（表明体内抗利尿激素分泌已达最大量），查血渗透压（可同时查ADH），皮下注射垂体后叶素5单位，再观察2小时，每小时查血、尿渗透压和记尿量。方法 1、轻度多尿者，于试验前晚6时后（812小时）禁水，多尿严重者可于试验日清晨起（4小时）禁饮。 2、试验方法与前述禁饮试验相同，从早晨8时开始排空膀胱，测体重、尿量和尿渗透压，以后每1小时收集尿1次，测尿量和尿渗透压，待尿渗透压逐步升高达平衡状态（连续2次尿渗透压相差不超过30mOsm/L）时，抽血测定血浆渗透压（有条件或必要时测血ADH），并皮下注射水剂加压素（或垂体后叶素5单位）。 3、注射加压素后1小时，收集尿测尿量、比重和渗

22、透压。 临床意义 1.正常人禁饮后血渗透压正常290 mOsm/L左右，尿渗透压可高达1000mOsm/L左右，注射加压素后 尿渗透压不能进一步升高，往往还稍微降低，仅少数人有增加，增高程度不超过5%。 2.部分性尿崩症患者，在禁饮后血渗透压正常偏高，尿渗透压升高，可超过血渗透压。在注射加压素后尿渗透压可进一步增高，最大增高值10%。 3.完全性尿崩症患者，在禁饮后血渗透压偏高，尿渗透压不能显著增高，仍明显低于血渗透压。在注射加压素后，尿渗透压升高，且超过血渗透压。 4.精神性多饮患者，禁饮后血渗透压正常，尿渗透压高于血渗透压，注射加压素后尿渗透压可稍微增加，但10%。 3.完全性尿崩症患者，

23、在禁饮后血渗透压偏高，尿渗透压不能显著增高，仍明显低于血渗透压。在注射加压素后，尿渗透压升高，且超过血渗透压。 4.精神性多饮患者，禁饮后血渗透压正常，尿渗透压高于血渗透压，注射加压素后尿渗透压可稍微增加，但10%。试验结果 时间体重（Kg）血压(mmHg)尿量(ml)血渗透压(mOsm/L)尿渗透压(mOsm/L)8:0065100/702902979:0064.5100/6012028637410:0064.5100/6017028927911:0064.5100/6515030012:0065.590/6010041813:0065.1100/658542914:0064.995/601

24、1037415:0064.8100/6012039916:0064.7105/6540297507结果分析：患者禁饮后血渗透压正常，尿渗透压升高，并且超过血渗透压。尿渗透压高达平顶状态后，注射加压素，尿渗透压进一步增高，增高值约为25%。因此该患者禁饮加压素联合试验结果支持部分性尿崩症的诊断。 附注 1、在部分性尿崩症患者中，有部分人可显示一种特殊的现象，即尿渗透压水平呈现明显波动现象，禁饮后，尿渗透压逐步上升，甚至可超过血浆渗透压，而在继续禁饮过程中，尿渗透压反而逐步降低，下降到血浆渗透压以下，而在注射加压素后，明显上升，有个例报道可上升超过50%。这种现象说明患者ADH储备能力有限。在开始

25、禁饮的刺激下，还能释放一些ADH，但在继续禁饮时，分泌ADH的能力即耗竭，由部分尿崩症转为完全性尿崩症。 2、注意事项同禁饮试验。 血渗透压=2(Na+K)+BUN+BG 以上公式中的单位均为mmol/L七TRH兴奋TSH、PRL试验（TRH Stimulating TSH、PRL secretion test）完整 原理TRH是谷、组、脯三个氨基酸组成的小肽，具有兴奋垂体分泌TSH和垂体泌乳素细胞分泌PRL的双重作用。注射一定剂量的外源性TRH，观察TRH、PRL的分泌反应，可评价垂体TSH细胞、PRL细胞的储备功能。 方法 1、 受试者不需作特殊准备。 2、 将TRH200ug溶于2ml生

26、理盐水中，快速静脉推注。 3、 分别于0、30、60和90min在前臂采血1.5ml，分离血清检测TSH。 正常值正常人的TSH水平为0.3-5mIU/L，平均1.3mIU/L，TRH兴奋后TSH、PRL升高到基础值的3倍以上峰值在30MIN出现。 临床意义 1、原发性甲减患者的TSH基础水平显著高于正常人，TRH兴奋后TSH升高的倍数和正常人接近，但升高绝对值显著增高。 2、垂体肿瘤患者中的40%的患者TSH对TRH兴奋的反应减低，或无反应，但是无甲减临床表现。 3、垂体前叶功能减退患者的反应程度与TSH细胞受损的程度有关，可为低弱反应或无反应。 4、下丘脑病变引起的甲减多为延迟反应，反应高

27、峰在60或90分钟出现。产生延迟反应的原因是垂体细胞虽然完整，但平时得不到TRH的兴奋，处于功能静息状态。 5、内分泌性突眼患者TSH对TRH兴奋可无反应。 试验结果 时间(min)0306090TSH (mU/L)3.59.86.44.9时间 (min)0153045PRL(ug/L)4.67.36.75.2结果分析：该患者试验结果示TSH兴奋后升高到接近基础值3倍，提示垂体-甲状腺轴储备功能尚可；PRL兴奋后升高不明显，提示患者垂体-性腺轴储备功能较差。 附注测定PRL分别于0、15、30和45分钟采血，余同上。PRL基础值正常男子为2-16，女子为3-21ug/L，兴奋后上升3倍以上，峰

28、值在15-30分钟出现。临床意义：1、90%的垂体PRL腺瘤患者基础水平增高，TRH兴奋反应减低。2、各种原因引起的垂体前叶功能减退症可呈减低反应。3、单纯性高泌乳素血症TRH兴奋试验反应一般正常，少数反应减低。八灭吐灵（MCP）兴奋PRL试验结果分析 原理 下丘脑分泌一种抑制因子（PIF）抑制PRL的分泌，PIF就是多巴胺，MCP是一种多巴胺受体拮抗剂，能对抗多巴胺对PRL的抑制作用，而促进PRL的分泌。 方法 1、MCP10mg，在一分钟内静脉注射完毕（口服法剂量不变）。2、分别于0、15、30、45分钟在前臂采静脉血2、0ml分离血清测定PRL（口服法分别于0、30、60、90和120分采血）。 正常值 正常人峰值比基础值升高3倍（一般为5-10倍），女性的反应比男性高。高峰在15-30分钟出现（口服法的高峰在30-60分钟出现）。 临床意义 单纯性或功能性泌乳症为正常反应。部分性垂体功能减退和垂体泌乳素瘤为低弱反应，峰值