CFX系列快速操作指南及注意事项.docx
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CFX系列快速操作指南及注意事项
CFX™系列Real-TimePCR检测系统快速操作指南
1.确认系统数据线和电源线连接正常后,打开CFX96电源开关,系统进入自检。
2.自检完成后启动CFXManager
,软件将自动搜索设备,完成连接后“DetectedInstruments”列表出现设备名称,PCR仪器屏幕显示红色“Underremotecontrol”文字。
3.点击“Experimentsetup
”弹出实验设置选项。
4.
标签下,“CreateNew”可新建热循环程序,“SelectExisting”可调用已有热循环程序,“Expressload”下拉菜单中可选择各种标准热循环程序,“EditSelected”可对选中的热循环程序进行编辑。
5.4.1 新建或编辑热循环程序时,可在图形或文字区域输入各步骤设定温度、时间值。
6.4.2
:
插入一个普通温控步骤;
7.4.3
:
插入温度梯度步骤;
8.4.4
:
插入热循环范围,须在插入后输入循环起始步骤和循环次数;
9.4.5
:
插入熔解曲线分析步骤;
10.4.6
:
插入荧光采集步骤;
11.4.7
:
对当前温控步骤的变温速率及方式进行调节;
12.4.8
:
删除当前温控步骤;
13.4.9
里应输入PCR反应液体积(此例为25微升)
14.4.10编辑好热循环程序后点击OK保存。
15.确定热循环程序后点击“Next”或
标签进入样品位置及类型设定。
“CreateNew”可新建样品设置,“Select”可调用已有样品设置,“Expressload”下拉菜单可选择各种标准样品设置,“EditSelected”可对选中的热循环程序进行编辑。
新建和编辑按下面步骤进行:
16.5.1从
里选择荧光扫描模式,“SYBR/FAMOnly”为单通道快速扫描模式,适用于仅使用核酸染料或/和FAM标定探针的情况。
“AllChannels”为全通道扫描模式,适用于任何检测情况。
“FRET”模式使用于特殊的FRET探针的情况。
17.5.2点击
,可在弹出的对话框里选择与检测方法一致的荧光素。
注意“SYBR/FAMonly”模式下只有FAM/SYBR可用。
18.5.3选择欲使用的样品孔位置后,在
下拉菜单里指定样品类型,此例为standard标准品。
19.5.4在
打勾,为所选样品指定荧光类型(此例为SYBR),根据实验需要,还可在后面的输入扩增基因名称。
20.5.5根据需要可在
为输入所选样品孔位的样品名称。
21.5.6如果样品设置有重复,可在
里逐一指定,或者点击
快速设置重复。
中分别填入重复的数量以及起始重复编号,
可指定重复放置的方向,点击
即可。
22.5.7如果设置了标准品,需要为标准品赋值,可在
中逐一输入,或者点击
快速设定。
23.5.8
可为相对定量数据分析时指定内参基因的名称。
24.5.9
可解除所选样品的重复设置状态。
25.5.10
可删除当前选定的样品孔设置。
26.5.11有疑问可点击
,参考在线帮助。
27.5.12编辑好板位文件后,点OK保存。
28.确定样品设置后点击“Next”或者
准备运行系统。
点击
设备自动打开样品槽,按照设置好的样品位置放置好样品,然后点击
关闭样品槽。
热盖闭合后点击
,设备询问数据存放的位置,确定后开始运行。
29.程序运行时可对PCR程序循环数、样品类型进行实施再编辑,也可编辑新的实验方案或者分析数据。
注意事项:
1.设备长时间停用时请勿将样品槽打开闲置,以免灰尘在样品槽上长期积累,影响热传递。
2.样品槽开闭时让设备自由运行,不得强行人为掰开或压合。
3.不可同时使用不同规格的耗材。
4.避免意外断电,建议为设备配置在线式UPS系统。
5.程序未结束前不得关闭系统电源,不得带电扳动设备背后的锁定杆。
6.PCR运行时不要搬动设备,若需要长途运输务必先将设备设置为运输状态,正确打包(请联系BIO-RAD工程师)
7.系统电脑专人管理,制定仪器的合理管理制度严防电脑病毒感染,保证电脑系统的正常运行。