常用缓冲溶液的配制及氨基酸常数等.docx
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常用缓冲溶液的配制及氨基酸常数等
附录四常用缓冲溶液的配制
（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2mol/LHCl，再加水稀释至200毫升。
pH
X
Y
pH
X
Y
2.2
50
44.0
3.0
50
11.4
2.4
50
32.4
3.2
50
8.2
2.6
50
24.2
3.4
50
6.4
2.8
50
16.8
3.6
50
5.0
甘氨酸分子量＝75.07。
0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2mol/LHCl，再加水稀释至20毫升。
pH（20℃）
X
Y
pH（20℃）
X
Y
2.2
5
4.670
3.2
5
1.470
2.4
5
3.960
3.4
5
0.990
2.6
5
3.295
2.6
5
0.597
2.8
5
2.642
3.8
5
0.263
3.0
5
2.032
邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。
0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
pH
0.2mol/L
Na2HPO4（mL）
0.1mol/L
柠檬酸（mL）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4（mL）
1.10.1 mol/L
柠檬酸（mL）
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
8.28
8.82
9.35
9.86
10.30
19.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子量＝141.98；0.2mol/L溶液为28.40g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2mol/L溶液为35.61g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2mol/L溶液为71.64g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1mol/L溶液为21.01g/L。
（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
（mol/L）
柠檬酸（g）
C6H8O7·H2O
氢氧化钠（g）
NaOH97％
盐酸（mL）
HCl（浓）
最终体积
（L）①
2.2
0.20
210
84
160
10
3.1
0.20
210
83
116
10
3.3
0.20
210
83
106
10
4.3
0.20
210
83
45
10
5.3
0.35
245
144
68
10
5.8
0.45
285
186
105
10
6.5
0.38
266
156
126
10
①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
（五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）
pH
1.10.1 mol/L
柠檬酸（mL）
0.1mol/L
柠檬酸钠（mL）
pH
0.1mol/L
柠檬酸（mL）
0.1mol/L
柠檬酸钠（mL）
3.0
18.6
1.4
5.0
8.2
11.8
3.2
17.2
2.8
5.2
7.3
12.7
3.4
16.0
4.0
5.4
6.4
13.6
3.6
14.9
5.1
5.6
5.5
14.5
3.8
14.0
6.0
5.8
4.7
15.3
4.0
13.1
6.9
6.0
3.8
16.2
4.2
12.3
7.7
6.2
2.8
17.2
4.4
11.4
8.6
6.4
2.0
18.0
4.6
10.3
9.7
6.6
1.4
18.6
4.8
9.2
10.8
柠檬酸：
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1mol/L溶液为21.01g/L。
柠檬酸钠：
Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12；0.1mol/L溶液为29.41g/L。
（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
（18℃）
0.2mol/L
NaAc（mL）
0.2mol/L
HAc（mL）
pH
（18℃）
0.2mol/L
NaAc（mL）
0.2mol/L
HAc（mL）
3.6
0.75
9.35
4.8
5.90
4.10
3.8
1.20
8.80
5.0
7.00
3.00
4.0
1.80
8.20
5.2
7.90
2.10
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
6.40
0.60
NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2mol/L溶液为27.22g/L。
冰乙酸11.8mL稀释至1L（需标定）。
（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/LKH2PO4+Y毫升0.2mol/LNaOH加水稀释至20毫升。
pH（20℃）
X（mL）
Y（mL）
pH（20℃）
X（mL）
Y（mL）
5.8
5
0.372
7.0
5
2.963
6.0
5
0.570
7.2
5
3.500
6.2
5
0.860
7.4
5
3.950
6.4
5
1.260
7.6
5
4.280
6.6
5
1.780
7.8
5
4.520
6.8
5
2.365
8.0
5
4.680
（八）磷酸盐缓冲液
磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4（mL）
0.2mol/L
NaH2PO4（mL）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4（mL）
0.2mol/L
NaH2PO4（mL）
5.8
8.0
92.0
7.0
61.0
39.0
5.9
10.0
90.0
7.1
67.0
33.0
6.0
12.3
87.7
7.2
72.0
28.0
6.1
15.0
85.0
7.3
77.0
23.0
6.2
18.5
81.5
7.4
81.0
19.0
6.3
22.5
77.5
7.5
84.0
16.0
6.4
26.5
73.5
7.6
87.0
13.0
6.5
31.5
68.5
7.7
89.5
10.5
6.6
37.5
62.5
7.8
91.5
8.5
6.7
43.5
56.5
7.9
93.0
7.0
6.8
49.0
51.0
8.0
94.7
5.3
6.9
55.0
45.0
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2mol/L溶液为35.61g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2mol/L溶液为71.64g/L。
NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2mol/L溶液为27.6g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2mol/L溶液为31.21g/L。
（九）巴比妥纳-盐酸缓冲液
pH
（18℃）
0.04mol/L
巴比妥钠
（mL）
0.2mol/L
HCl（mL）
PH
（18℃）
0.04mol/L
巴比妥钠
（mL）
0.2mol/L
HCl（mL）
6.8
100
18.4
8.4
100
5.21
7.0
100
17.8
8.6
100
3.82
7.2
100
16.7
8.8
100
2.52
7.4
100
15.3
9.0
100
1.65
7.6
100
13.4
9.2
100
1.13
7.8
100
11.47
9.4
100
0.70
8.0
100
9.39
9.6
100
0.35
8.2
100
7.21
巴比妥钠分子量＝206.18；0.04mol/L溶液为8.25g/L。
（十）Tris-HCl缓冲液（0.05mol/L）
50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升。
pH（25℃）
X（mL）
pH（25℃）
X（mL）
7.10
45.7
8.10
26.2
7.20
44.7
8.20
22.9
7.30
43.4
8.30
19.9
7.40
42.0
8.40
17.2
7.50
40.3
8.50
14.7
7.60
38.5
8.60
12.4
7.70
36.6
8.70
10.3
7.80
34.5
8.80
8.5
7.90
32.0
8.90
7.0
8.00
29.2
Tris分子量＝121.14；0.1mol/L溶液为12.114g/L。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
（十一）、硼酸-硼砂缓冲液（0.2mol/L硼酸根）
pH
0.05mol/L
硼砂（mL）
0.2mol/L
硼酸（mL）
pH
0.05mol/L
硼砂（mL）
0.2mol/L
硼酸（mL）
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
8.5
8.4
4.5
5.5
7.8
2.0
8.0
8.7
6.0
4.0
8.0
3.0
7.0
9.0
8.0
2.0
硼砂：
Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05mol/L溶液（等于0.2mol/L硼酸根）含19.07g/L。
硼酸：
H3BO3分子量＝61.84；0.2mol/L的溶液为12.37g/L。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
（十二）甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2mol/LNaOH加水稀释至200毫升。
pH
X（mL）
Y（mL）
pH
X（mL）
Y（mL）
8.6
50
4.0
9.6
50
22.4
8.8
50
6.0
9.8
50
27.2
9.0
50
8.8
10
50
32.0
9.2
50
12.0
10.4
50
38.6
9.4
50
16.8
10.6
50
45.5
甘氨酸分子量＝75.07；0.2mol/L溶液含15.01g/L
（十三）硼砂-氢氧化纳缓冲液（0.05mol/L硼酸根）
X毫升0.05mol/L硼砂＋Y毫升0.2mol/LNaOH加水稀释至200毫升。
pH
X（mL）
Y（mL）
pH
X（mL）
Y（mL）
9.3
50
6.0
9.8
50
34.0
9.4
50
11.0
10.0
50
43.0
9.6
50
23.0
10.1
50
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05mol/L硼砂溶液（等于0.2mol/L硼酸根）为19.07g/L。
（十四）碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1mol/L）（此缓冲液在Ca2＋、Mg2＋存在时不得使用）.
pH
0.1mol/LNa2CO3
（mL）
0.1mol/LNaHCO3
（mL）
20℃
37℃
9.16
8.77
1
9
9.40
9.22
2
8
9.51
9.40
3
7
9.78
9.50
4
6
9.90
9.72
5
5
10.14
9.90
6
4
10.28
10.08
7
3
10.53
10.28
8
2
10.83
10.57
9
1
Na2CO3·10H2O分子量＝286.2；0.1mol/L溶液为28.62g/L。
NaHCO3分子量＝84.0；0.1mol/L溶液为8.40g/L。
附录五硫酸铵饱和度的常用表
1.调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃）
硫酸铵终浓度，%饱和度
硫酸铵
10
20
25
30
33
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
90
100
初浓度，%饱和度
每1升溶液加固体硫酸铵的克数①
0
56
114
144
176
196
209
243
277
313
351
390
430
472
516
561
662
767
10
57
86
118
137
150
183
216
251
288
326
365
406
449
494
592
694
20
29
59
78
91
123
155
189
225
262
300
340
382
424
520
619
25
30
49
61
93
125
158
193
230
267
307
348
390
485
583
30
19
30
62
94
127
162
198
235
273
314
356
449
546
33
12
43
74
107
142
177
214
252
292
333
426
522
35
31
63
94
129
164
200
238
278
319
411
506
40
31
63
97
132
168
205
245
285
375
469
45
32
65
99
134
171
210
250
339
431
50
33
66
101
137
176
214
302
392
55
33
67
103
141
179
264
353
60
34
69
105
143
227
314
65
34
70
107
190
275
70
35
72
153
237
75
36
115
198
80
77
157
90
79
1在25℃下硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
2.硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃）；
硫酸铵终浓度，%饱和度
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
85
90
95
100
硫酸铵
每100毫升溶液加固体硫酸铵的克数①
初浓度，%饱和度
0
10.6
13.4
16.4
19.4
22.6
25.8
29.1
32.6
36.1
39.8
43.6
47.6
51.6
55.9
60.3
65.0
69.7
5
7.9
10.8
13.7
16.6
19.7
22.9
26.2
29.6
33.1
36.8
40.5
44.4
48.4
52.6
57.0
61.5
66.2
10
5.3
8.1
10.9
13.9
16.9
20.0
23.3
26.6
30.1
33.7
37.4
41.2
45.2
49.3
53.6
58.1
62.7
15
2.6
5.4
8.2
11.1
14.1
17.2
20.4
23.7
27.1
30.6
34.3
38.1
42.0
46.0
50.3
54.7
59.2
20
0
2.7
5.5
8.3
11.3
14.3
17.5
20.7
24.1
27.6
31.2
34.9
38.7
42.7
46.9
51.2
55.7
25
0
2.7
5.6
8.4
11.5
14.6
17.9
21.1
24.5
28.0
31.7
35.5
39.5
43.6
47.8
52.2
30
0
2.8
5.6
8.6
11.7
14.8
18.1
21.4
24.9
28.5
32.3
36.2
10.2
44.5
48.8
35
0
2.8
5.7
8.7
11.8
15.1
18.4
21.8
25.4
29.1
32.9
36.9
41.0
45.3
40
0
2.9
5.8
8.9
12.0
15.3
18.7
22.2
25.8
29.6
33.5
37.6
41.8
45
0
2.9
5.9
9.0
12.3
15.6
19.0
22.6
26.3
30.2
34.2
38.3
50
0
3.0
6.0
9.2
12.5
15.9
19.4
23.0
26.3
30.8
34.8
55
0
3.0
6.1
9.3
12.7
16.1
19.7
23.5
27.3
31.3
60
0
3.1
6.2
9.5
12.9
16.4
20.1
23.1
27.9
65
0
3.1
6.3
9.7
13.2
16.8
20.5
24.4
70
0
3.2
6.5
9.9
13.4
17.1
20.9
75
0
3.2
6.6
10.1
13.7
17.4
80
0
3.3
6.7
10.3
13.9
85
0
3.4
6.8
10.5
90
0
3.4
7.0
95
0
3.5
100
0
1在0℃下硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
3．不同温度下的饱和硫酸铵溶液
温度（℃）
0
10
20
25
30
每1000毫升水中含硫酸铵摩尔数
5.35
5.53
5.73
5.82
5.91
重量百分数
41.42
42.22
43.09
43.47
43.85
1000毫升水用硫酸铵饱和所需克数
706.8
730.5
755.8
766.8
777.5
每升饱和溶液含硫酸铵克数
514.8
525.2
536.5
541.2
545.9
附录六氨基酸的一些理化常数
氨基酸名称
相对分子
质量
熔点**
（℃）
等电点
PI
溶解度
（%，25℃）
[a]24～26*
甘氨酸（Glycine）（Gly）
75.07
292d
5.97
24.99
L-丙氨酸（LAlanine）（Ala）
89.07
295d
6.00
16.6
A——+14.6
B——+1.8
L-丝氨酸（L-Serine）（Ser）
105.09
223d
5.68
25
A——+15.1
B——-7.5
L-苏氨酸（L-Tnreonine）（Thr）
119.12
253d
6.16
易溶
A——-15.0
B——-28.5
L-缬氨酸（L-Valine）（Val）
117.15
315d
5.96
8.85
A——+28.3
B——+5.63
L-亮氨酸（L-Leucine）（Leu）
131.17
337d
5.98
2.19
A——+16.0
B——-11.0
L-异亮氨酸（L-Isol
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